Pasteuria penetrans KW1 (PP), parasitic bacterium of nematode, was isolated from oriental melon greenhouse soil in Korea and evaluated for the suppression effect on the reproduction of southern root-knot nematode, Meloidogyne incognita (MI), in lettuce (Lactuca sativa L. var. Chungchima) and oriental melon (Cucumis melo L. var. Eunchun). Pot experiments were conducted by planting the lettuce seedlings in medium inoculated with 5,000 MI juveniles/pot (J), J +100,000 PP endospores/l g medium, and J +200,000 PP endospores/1 g medium. After 11 weeks of plantation, number of root galls in J +200,000 PP endospores/1 g medium was decreased to 92/root (38.9%, control effect), compared to the J of 150/root. In the second plantation of lettuce in the same pots, the numbers of root gall were significantly decreased in PP treated pots with 75 (77.2%, control effect) and 150/root (54.4%, control effect) in J +200,000 and J +100,000 PP endospores/1 g medium, respectively, compared to the J of 330/root when harvested at 10 weeks after planting. In oriental melon, root gall percentages were 32.1 (60.2%, control effect) and 52.9% (34.5%, control effect) in J +200,000 and J + 1(10,000 endospores/l g medium which were significantly lower than that of 80.7% in J.
본 연구는 국내토착 토양세균인 Pasteuria penetrans 내생포자의 처리방법에 따른 땅콩뿌리혹선충(Meloidogyne arenaria) 방제효과를 파악하고자 수행하였다. 이를 위해 P. penetrans 내생포자의 농도($3{\times}10^4$, $3{\times}10^5$ 및 $3{\times}10^6$ endospores/5 g medium)별로 500마리 땅콩뿌리혹선충에 각각 부착한 후 기주식물인 토마토 뿌리에 접종하여 14주 후 뿌리에 형성된 뿌리혹 개체 수로 농도에 따른 선충방제 효과를 파악하였다. 그 결과 80%이상 방제효과를 보인 $3{\times}10^5$ 수준의 P. penetrans 내생포자를 500마리의 선충만을 접종한 토양과 혼합하여 처리한 시험구(토양혼화처리)와 토양표면에 처리한 시험구(토양표면처 리)로 구분하여 방제효과를 비교하였다. 이 중 방제효과가 높았던 토양혼화처리 방법을 이용하여 P. penetrans와 일본 상품인 $PASTORIA^{(R)}$그리고 국내에 등록된 살선충제인 선충탄(fosthiazate)과의 방제효과를 상호 비교하였다. 실험결과 P. penetrans의 농도가 높고 토양과 혼합하여 처리할 시 방제효과가 높았으며, P. penetrans 처리가 일본 제품보다는 우수한 방제효과를 보였고 국내 시판 화학방제제와는 유사하였다.
When quicklime is added into soil for various purposes, abrupt changes in soil chemistry may affect essential ecological functions played by indigenous bacterial communities in soil. The magnitude of influence was estimated by observing changes in abundance and diversity of soil bacteria after quicklime treatment. When several soil samples were treated up to 20% (w/w) quicklime, plate count of viable cells ranged $10^2{\sim}10^3$ CFU $g^{-1}$, showing a reduction of more than $10^4$ times from viable counts of the untreated sample. Diversity of the bacterial isolates that survived after quicklime treatment was analyzed by conducting $GTG_5$ rep-PCR fingerprinting. There were only two types of fingerprints common to both 5% and 20% quicklime samples, implying that bacteria surviving at different strength of quicklime treatment differed depending on their tolerance to quicklime-treated condition. Isolates surviving the quicklime treatments were further characterized by Gram staining and endospore staining. All isolates were found to be Gram positive bacteria, and 85.4% of them displayed endospores state. In conclusion, most bacteria surviving quicklime treatment appear to be endospores. This finding suggests that most of ecological functions of bacteria in soil are lost with quicklime treatment.
Beneficial bacteria, which have been used for medical purpose and for medicines for treating intestinal disorders, include strains of Bifidobacterium sp., Lactobacillus sp., Enterococcus sp., Clostridium butyricum, Lactobacillus sporogenes, Bacillus subtilis, Bacillus polyfermenticus and the like. Bacillus polyfermenticuss SCD with is commonly called as Bispan strain has been appropriately used for the treatment of long-term intestinal disorders, since the live strains in the form of active endospores can successfully reach the target intestine. In this study, the identification and characterization of Bispan strain was done using SEM observation, API 50CHB kits, isoprenoid quinone analysis, and fatty acid analysis. These results suggest that Bispan strain is very similar to Bacillus subtilis.
선충절대기생세균(Pasteuria penetrans)이 감염되어 있는 온실토양을 이용하여 세균의 내생포자가 땅콩뿌리혹선충(Meloidogyne arenaria) 유충 표면에 부착하는데 대한 온도의 영향에 대해 시험하였다. 갓 부화된 뿌리혹선충 2령충(J2)을 페트리디쉬 내의 토양에 접종한 후 $20^{\circ}C$, $25^{\circ}C$, $30^{\circ}C$, $35^{\circ}C$에서 7일간 처리하였다. 모든 온도에서 내생포자의 J2 부착률은 모두 100%로 나타났으나 J2당 내생포자 부착수는 $25^{\circ}C$에서 28.3개로 가장 많았으며 $30^{\circ}C$, $20^{\circ}C$ 및 $35^{\circ}C$에서 각각 J2 당 20.2, 18.6 및 13.6개로 낮아졌다. J2를 접종하기 전에 세균이 있는 토양을 온도별로 10일간 전처리하였을 때 내생포자 부착률은 실온에서의 60%에 비해 $-300^{\circ}C$, $4^{\circ}C$, $40^{\circ}C$, $50^{\circ}C$ 및 $100^{\circ}C$에서 각각 25.0, 31.7, 8.3, 5.0 및 0%로 현저하게 낮아졌다. J2 당 내생포자 부착수도 실온에서의 5.3개에 비해 $-30^{\circ}C$, $40^{\circ}C$, $40^{\circ}C$, $50^{\circ}C$ 및 $100^{\circ}C$에서 각각 3.5, 4.3, 1, 1, 0개로 적었다. P. penetrans 세균의 내생포자를 뿌리혹선충 종별로 J2에 부착 시험한 결과 땅콩뿌리혹선충에서는 100%였으나 당근뿌리혹선충(M. hapla)과 고구마뿌리혹선충(M. incognita)에서는 모두 0%로 본 균주는 뿌리혹선충 종에 대해 기주선호성을 가진 것으로 나타났다.
B. thuringiensis는 많은 해로운 곤충들을 박멸시키는데 널리 사용되는 생물학적 살충제로 잘 알려져 있다. 그것은 측포자 형태의 결정체($\delta$-내독소)를 생산하고 내생포자들을 형성한다. 본 논문에서는 B. thuringiensis BT-1과 BT-2에 의해 생산되는 내독소의 특성을 주사전자현미경(SEM), 투과전자현미경(TEM), SDS-PACE, 알칼리 용액에서의 용해 활성을 통하여 규명하였다. BT-1, BT-2 균주는 GBY 배지에서 배양되었고, 두 균주의 내독소는 당밀도구배법을 이용하여 정제되어, 주사전자현미경(SEM), 투과전자현미경(TEM)으로 관찰하였다. 형태학적으로, BT-1의 내독소는 사각형 및 납작형이고 크기는 $1.73{\mu}m{\times}0.7{\mu}m$, 그리고 BT-2 내독소는 구형이며 $1.1{\mu}m$, 폭이 $0.9{\mu}m$인 것으로 밝혀졌다. SDS-PACE 방법으로 분석한 결과, BT-1의 분자량은 28 kDa, 21 kDa, 반면에 BT-2의 분자량은 50 kDa, 35 kDa, 22 kDal으로 밴드가 형성되었다. 이들의 결정체는 알칼리 완충용액 내에서 시간에 지나감에 따라서 점차로 용해되었으며 3시간 후에는 거의 완전하게 용해되었다. 이 결과들을 통하여 BT1과 BT-2 결정체의 내독소가 곤충의 중장 내에서 시간이 흐름에 따라 비활성 상태에서 활성상태로 전환되는 것으로 보여진다.
본 연구에서 비스판균에 비해 아포형성능이 우수한 변이주를 선별하고, 발효조 배양에서 활성아포 생산성의 증가를 확인하였다. 최종 선별된 변이주 KD21균주를 5 L jar fermenter에서 배양한 결과, 36시간만에 총균수는 $5.5{\times}10^9$ CFU/mL에 도달하고, 최대 활성아포수는 $2.7{\times}10^9$ CFU/mL에 도달하였다. 이는 비스판 친균주에 비해 활성아포의 생산성이 77%증가하였음 확인 할 수 있었다. 장질환 치료제로 판매되고 있는 비스판 제제의 활성아포 생산성이 우수한 변이주를 획득함으로서 친균주에 비해 가격경쟁력을 가질수 있을것으로 판단된다.
Alternative methods for controlling bacterial endospore contamination are desired in a range of industries and applications. Attention has recently turned to natural products, such as essential oils, which have sporicidal activity. In this study, a selection of essential oils was investigated to identify those with activity against Bacillus subtilis spores. Spores were exposed to 13 essential oils, and surviving spores were enumerated. Cardamom, tea tree, and juniper leaf oils were the most effective, reducing the number of viable spores by 3 logs at concentrations above 1%. Sporicidal activity was enhanced at high temperatures ($60^{\circ}C$) or longer exposure times (up to 1 week). Gas chromatography-mass spectrometry analysis identified the components of the active essential oils. However, none of the major oil components exhibited equivalent activity to the whole oils. The fact that oil components, either alone or in combination, did not show the same level of sporicidal activity as the complete oils suggested that minor components may be involved, or that these act synergistically with major components. Scanning electron microscopy was used to examine spores after exposure to essential oils and suggested that leakage of spore contents was the likely mode of sporicidal action. Our data have shown that essential oils exert sporicidal activity and may be useful in applications where bacterial spore reduction is desired.
박테리아 종들은 정교한 효소 시스템의 존재로 인해 이온화 방사선 처리 후에 생존할 수 있는 것으로 보고되어 왔고 몇몇 내생 포자를 생산하는 박테리아 또한 두꺼운 포자껍질의 존재 때문에 방사선에 저항할 수 있다. 이 연구에서는 방사선이 조사된 토양의 시료에서 추출된 Paenibacillus swuensis $DY6^T$의 완전한 게놈 서열을 분석하였다. 이 게놈은 G+C 함량이 49.93%인 5,012,599 bp으로 구성되어 있고 단백질 정보를 암호화한 유전자 4,463개와 133개 RNA 유전자를 포함하고 있다.
Kim, Soo-Young;Kang, Min-Ho;Choi, Hee-Baeg;Lee, Jee-Un;Charles, Jean Francois;Dumanoir, Veronique Cosmao;Lecadet, Marguerite M.;Lee, Hyung-Hoan
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제9권5호
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pp.534-540
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1999
Thirty-seven strains of Bacillus thuringiensis were isolated from Korean soil and examined for H-antigen serotyping, toxicity, and different spectra of biological activities. The isolate HL-175 bore a specific H-antigen, different from the 51 known serotypes, a spherical $\delta$-endotoxin crystal, and minor different biochemical characteristics. It was resistant to ampicillin, colistin, and penicillin G. Therefore, it was classified as a new serotype, H52, with the name kim. The other 36 isolates also produced endotoxin crystals and endospores. The crystal shape of eight strains was cuboidal while the others were bipyramidal. Biochemical characteristics of the isolates were only slightly different from the known serotypes of B. thuringiensis. The flagellar (H) antigens of the 36 isolates were identified as: one colmeri (H21), three galleriae (H5a,5b); two pakistani (H13); one toumanoffi (H11a, 11b); and twenty-nine kurstaki (H3a,3b). All 36 isolates were resistant to ampicillin, colistin, penicillin, cephalothin, and chloramphenicol.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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