Phyllosticta melochiae, an endophytic fungus isolated from the healthy leaves of Melochia corchorifolia, was screened for the production of an anticancer drug, taxol on modified liquid medium and potato dextrose broth medium in culture for the first time. The presence of taxol was confirmed by spectroscopic and chromatographic methods of analysis. The amount of taxol produced by this fungus was quantified by high performance liquid chromatography. The maximum amount of fungal taxol production was recorded as $274{\mu}g/L$. The production rate was increased to $5.5{\times}1,000$ fold than that found in the culture broth of earlier reported fungus, Taxomyces andreanae. The fungal taxol extracted also showed a strong cytotoxic activity in the in vitro culture of tested human cancer cells by apoptotic assay. The results designate that the fungal endophyte, P. melochiae is an excellent candidate for an alternate source of taxol supply and can serve as a potential species for genetic engineering to enhance the production of taxol to a higher level.
Ascomycota is the largest phylum of the Fungi, including approximately 6,600 genera. They are often isolated from soils, indoor air, and freshwater environments, but also from plants as pathogens or endophytes. In this study, four species of Ascomycota (two of Cladosporium and one of each Daldinia and Nigrospora) were collected from the leaves of four woody plants (Camellia japonica, Ginkgo biloba, Quercus sp., Vitis vinifera). Their cultural characteristics were investigated on five different media (PDA, V8A, CMA, MEA, CZA) at 3 days after incubation at $25^{\circ}C$ in darkness. BLASTn search and phylogenetic analysis were performed using the internal transcribed spacer (ITS) rDNA sequences, in addition to tef1 gene sequences for Cladosporium species. Based on the cultural, morphological, and phylogenetic data, the isolates were identified as Cladosporium anthropophilum, Cladosporium pseudocladosporioides, Daldinia eschscholtzii, and Nigrospora chinensis. Previously, some members of Cladosporium and Nigrospora have been recorded as endophytes inhabiting the leaves and stems of various plants, whereas Daldinia eschscholtzii is a wood-inhabiting endophyte or wood-decaying fungus. To our knowledge, this is the first report of these four ascomycetes in Korea.
Kim, Kang Min;Liu, Jie;Go, Youn Suk;Kang, Jae Seon
Journal of Life Science
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v.25
no.8
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pp.910-916
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2015
Scientists have recently shown an interest in the characteristics of Bacillus mojavensis strains because of their increasing use in plants as a defense against diseases and mycotoxins. We have shown here that B. mojavensis KJS-3 possesses the typical characteristics of B. mojavensis strains including a strong resistance to high temperatures (≤50℃), tolerance to high salt concentrations (7% NaCl), ethanol tolerance (40% ethanol), and pH range for growth (pH 5-9). B. mojavensis KJS-3 has been used for the production of cyclic lipopeptides including important antifungal substances such as surfactin, iturin, and fengycin. Polymerase chain reaction analysis in this study showed that B. mojavensis KJS-3 can be used for the production of fengycin and the findings of LC-MS/MS analyses suggest that B. mojavensis KJS-3 can be used to produce iturin and surfactin. Antifungal activity analys is confirmed that B. mojavensis KJS-3 has antifungal effects on Botrytis cinerea, Rhizoctonia solani AG-4, Sclerotinia sclerotiorum, and Colletotricum goeosporioides. A microscopy assessment of the roots of wild ginseng plants planted together with B. mojavensis KJS-3 revealed that the roots contained B. mojavensis KJS-3, confirming the bacteria to be a plant growth promoting endophyte (PGPE) which acts against plant diseases and mycotoxins. Our findings lead us to conclude that B. mojavensis KJS-3 can be produced at an industrial level as a microbial pesticide or microbial fertilizer.
Investigating endophyte distribution, naturally occurring in native grasses, is important for understanding endophyte-grass associations and using the beneficial effects of endophytes in cultivated plants. The goal of this study was to investigate endophytes from natural Festuca spp. in Yunnan, Guizhou, and Sichuan Provinces of China, and to study the compatibility between the endophytes and turf type tall fescue (Festuca arundinacea) which is widely used for lawn and athletic fields in that region. Of 628 accessions in F. ovina, 421 had endophytes identified in leaf sheath from on-site microscopic examination. From Festuca spp, three isolates were obtained from the seeds and ninety isolates were obtained from seedlings established from the collected seeds. The isolates from F. ovina and F. stapfii were tentatively identified as Neotyphodium typhinum and Neotyphodiumstarii, respectively. We tested compatibility of the two fungal species with seven tall fescue cultivars, Little Hero, Sub Boy, Eldorado, Arid III, Millennium, Crossfire, and Fawn. N. typhinum or N. starii did not infect 'Fawn' with either seed injection or seed soaking method. The highest infection rate byboth N. typhinum and N. starii was in 'Sun Boy' and 'Eldorado'. There were significant interaction effects between tall fescue cultivar and type of endophyte on infection.
Actinorhizal plants being capable of fixing atmospheric nitrogen in symbiotic association with Frankia were surveyed for their root nodules, and the root nodules were collected for further studies. Three species of Alnus and Elaeagnus (A. hirsuta, a. firma, A. japonica; E. glabra, e. umbellata, E. macrophylla) and one species of Myrica (M. rubura) were confirmed to bear the root nodules of typical external shape. Morphological studies using light microscope and scanning electron microscope revealed the presence of vesicle clusters in the cortex region of the root. Two tentative endophyte colonies were isolated from the root nodule of A. hirsuta.
Um, Yurry;Kim, Bo Ra;Jeong, Jin Ju;Chung, Chan Moon;Lee, Yi
Korean Journal of Medicinal Crop Science
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v.22
no.4
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pp.306-312
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2014
Endophytes are microorganisms that live in the internal tissues of plants without harming the host plants. In this symbiotic relationship, the host plants provide nutrients and shelter to the endophytes, in turn, endophytes can promote the growth of host plants and act as a biological control agents against plant pathogens. Plant-microbe interactions like this are noted for natural methods for sustainable agriculture and environmental conservation. However, in spite of the infinite potential, there are only a few reports on the endophytes present in ginseng. In this study, we isolated and identified the endophytes from Panax ginseng seeds and evaluated the biological activities (IAA production ability, nitrogen fixation ability, phosphate solubilization capacity, siderophore production ability, and antifungal activities) of the endophyte isolates. Eight different endophytes were identified by 16S rRNA sequencing. Most of the endophytes have antibiotic and plant growth promoting (PGP) activities. Particularly, PgSEB5-37E have the highest antibiotic activity, both PgSEB5-37B and PgSEB5-37H have high PGP traits such as an abilities to produce IAA, solubilize phosphate and fix nitrogen. These results indicated that the endophytes from P. ginseng seeds may have applicable value to many industries. In order to use the isolated endophytes, quantitative analysis and field tests are needed to be performed.
Fernando Dini;Mortatti, Marcelo-Jose;Souza, Andre-Oliveira de;Walter Maccheroni;Joao Lucio;Welington Luiz
Journal of Microbiology
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v.42
no.3
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pp.169-173
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2004
Enterobacter cloacae (strain PR2/7), a genetically modified endophyte(GME) in citrus plants, carrying different plasmids (pEC3.0/18, pCelE, pEglA and pGFP), was inoculated into Citrus sinensis seedlings under greenhouse conditions. The impact of this on the indigenous bacterial endophytic community was studied by analyses of 2 different morphologic groups. The germination rates of inoculated seeds were evaluated in greenhouse, and plasmid stability under in vitro conditions. Results demonstrated a great and diverse endophytic community inside plants, and specialization in tissue colonization by some bacterial groups, in different treatments. Shifts in seed germination rate were observed among treatments: in general, the PR2/7 harboring pEglA bacterial- clone significantly reduced seed germination, compared to the PR2/7 harboring pEC3.0/18 clone. This suggests that the presence of the pEglA plasmid changes bacteria-seed interactions. The endophytic community of citrus seedlings changed according to treatment. In seedlings treated with the PR2/7 with pEglA clone, the population of group II decreased significantly, within the context of the total endophytic community. These results indicate that the application of GMEs induces shifts in the endophytic bacterial community of citrus seedlings.
Gauna, M. Cecilia;Parodi, Elisa R.;Caceres, Eduardo J.
ALGAE
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v.24
no.4
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pp.249-256
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2009
The occurrence of Laminarionema elsbetiae (Ectocarpaceae, Phaeophyceae), as epi-endophyte of Rhodymenia pseudopalmata (Rhodymeniales, Rhodophyta), described from Santa Isabel, Rawson, Argentina. L. elsbetiae grows in the host tissues forming epi-endophytic relationship in the epidermal, cortical and medullar layers. Epiphytic thalli of L. elsbetiae were unbranched filaments emerging from hostis surface. Reproductive structures of L. elsbetiae on the host were absent. On the contrary, free cultured individuals formed different reproductive structures. Macrozoosporangia containing a single large motile zoospore originated from vegetative cells, they were conical to cylindrical in shape, 30-50 ${\mu}m$ in length and 18-20 ${\mu}m$ in wide. Uniseriate plurilocular zoosporangia were cylindrical shape, 40 ${\mu}m$ in length and 10-13 ${\mu}m$ in wide. Sexual fusion was not seen. In mixed cultures of L. elsbetiae with R. pseudopalmata fronds, L. elsbetiae infected the host, grew as in natural host and, formed macrosporangia between host subcortical cells. Gametophytes of L. elsbetiae were filaments with diffuse growth, branched with a branch pattern alternate or opposite. Gametangia were plurilocular, uni or biseriate and lateral. When mature they contained 2 to 6 isogametes. The presence L. elsbetiae on R. pseudopalmata could be defined as an epi-endophytic relationship. The percentage of infection of R. pseudopalmata thalli by L. elsbetiae was 34%.A25% of the infected thalli presented a low, non-symptomatic level infection, whereas a 62% and a 13% of them exhibited respectively moderate and high indexes of infection.
Lee, Ki-Won;Moon, Jin Young;Ji, Hee Chung;Choi, Gi Jun;Kim, Ki-Yong;Hwang, Tae Young;Lee, Sang-Hoon
Journal of Animal Environmental Science
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v.19
no.1
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pp.63-68
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2013
In vitro culture and radiation techniques were used for obtaining mutants tin tall fescue. Endophyte free and friendly tall fescue cultivars Kentucky-31 and Jesup were used for induction of genetic variability through in-vitro mutagenesis. Mature seeds was used for callus induction on 6 mg/L 2,4-D. Actively growing and compact callus was treated with three different doses of gamma rays (10 Gy, 30 Gy and 50 Gy). Maximum proliferation and plantlets regeneration growth was observed in control and minimum at 10 Gy. Furthermore, the maximum number of tiller in the irradiated population was observed in 10 Gy. The treatments 30 Gy and 50 Gy exhibited negative impact on the tillering potential of the tall fescue plant. The object of this study was to develop protocols for mutation breeding in tall fescue through radiation techniques.
Kim, Kyuri;Jeong, Hae-In;Yang, Inho;Nam, Sang-Jip;Lim, Kyung-Min
Journal of Ginseng Research
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v.45
no.1
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pp.98-107
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2021
Background: Ginseng extracts and ginseng-fermented products are widely used as functional cosmetic ingredients for their whitening and antiwrinkle effects. Recently, increasing attention has been given to bioactive metabolites isolated from endophytic fungi. However, little is known about the bioactive metabolites of the fungi associated with Panax ginseng Meyer. Methods: An endophytic fungus, Penicillium sp. SNF123 was isolated from the root of P. ginseng, from which acremonidin E was purified. Acremonidin E was tested on melanin synthesis in the murine melanoma cell line B16F10, in the human melanoma cell line MNT-1, and in a pigmented 3D-human skin model, Melanoderm. Results: Acremonidin E reduced melanogenesis in α-melanocyte-stimulating hormone (α-MSH)-stimulated B16F10 cells with minimal cytotoxicity. qRT-PCR analysis demonstrated that acremonidin E downregulated melanogenic genes, including tyrosinase and tyrosinase-related protein 1 (TRP-1), while their enzymatic activities were unaffected. The antimelanogenic effects of acremonidin E were further confirmed in MNT-1 and a pigmented 3D human epidermal skin model, Melanoderm. Immunohistological examination of the Melanoderm further confirmed the regression of both melanin synthesis and melanocyte activation in the treated tissue. Conclusion: This study demonstrates that acremonidin E, a bioactive metabolite derived from a fungal endophyte of P. ginseng, can inhibit melanin synthesis by downregulating tyrosinase, illuminating the potential utility of microorganisms associated with P. ginseng for cosmetic ingredients.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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