BACKGROUND: The analytical method was established for determination of fungicide chinomethionat in several animal commodities using gas chromatography (GC) coupled with electron capture detector (ECD). METHODS AND RESULTS: In order to verify the applicability, the method was optimized for determining chinomethonat in various livestock products including beef, pork, chicken, milk and egg. Chinomethionat residual was extracted using acetone/dichloromethane(9/1, v/v) with magnesium sulfate and sodium chloride (salting outassociated liquid-liquid extraction). The extract was diluted by direct partitioning into dichloromethane to remove polar co-extractives in the aqueous phase. The extract was finally purified with optimized silica gel 10 g. CONCLUSION: The method limit of quantitation (MLOQ) was 0.02 mg/kg, which was in accordance with the maximum residue level (MRL) of chinomathionate as 0.05 mg/kg in livestock product. Recovery tests were carried out at two levels of concentration (MLOQ, 10 MLOQ) and resulted in good recoveries (84.8~103.0%). Reproducibilities were obtained (Coefficient of variation <5.2%), and the linearity of calibration curves were reasonable (r2>0.995) in the range of 0.01-0.2 ㎍/mL. This established analytical method was fully validated and could be useful for quantification of chinomathionat in animal commodities as official analytical method.
Organophosphate pesticides were extracted with 70% acetone and then transferred to dichloromethane. Extracts were applied to open-column chromatography with florisil. The florial extract was analyzed by gas chromatography with nitrogen-phosphorus detector(GC/NPD). Recoveries of the 18 organophosphate pesticides were ranged from 88.7% to 100. 0% for the narrow-bore capillary GC(Ultra-21. The minimum detectable level of this analytical method was 0.019 - 0.035 mg/kg. Sample throughput(extraction, open-column chro- matography, and GC analysts) was decreased considerably (8h per sample).
Sora Lee;Seokju Kim;Bowook Moon;Sik-Won Choi;Rhim Ryoo;Hyung Won Lee
Journal of Korean Society of Forest Science
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v.113
no.1
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pp.73-87
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2024
Wolfiporia hoelen (Fr.) Y.C.Dai & V. Papp, commonly known as Poria cocos, is a significant traditional herb used for medicinal and culinary purposes Asian and European countries. Many studies have confirmed that the main components of W. hoelen have pharmacological activities and thatits extract has been shown to affect bone metabolism. This study aimed to the potential of a 50% ethanol extract of the sclerotium of W. hoelen for preventing and treating bone diseases. The ethanol extract was systematically fractionated using n-hexane, dichloromethane, and ethyl acetate. The dichloromethane fraction caused an approximately 29% increase in alkaline phosphatase (ALP) differentiation activity in C2C12 cells compared to the control. Four compounds isolated from this active dichloromethane fraction were identified through instrumental analysis and literature references as 3α-dehydrotrametenolic acid, ergosterol, pachymic acid, and dehydrotumulosic acid. All four compounds were evaluated at increasing concentrations (1, 3, 10, 30, and 100 μM) to determine their effects on ALP differentiation activity in C2C12 cells and RANKL-induced inhibition activity in bone marrow macrophages (BMMs), with a concurrent assessment of cytotoxicity at these concentrations. At a concentration of 3 μM, dehydrotumulosic acid caused a 160% increase in ALP activity, 24% higher than in the BMP-2 control. BMMs treated with dehydrotumulosic acid at concentrations between 10 and 100 μM showed a substantial 15-86% decrease in RANKL-induced inhibition activity compared to the control, with distinct patterns of RANKL inhibition and cytotoxicity observed at 10 μM. These findings suggest that the ethanol extract from the sclerotium of W. hoelen has potential to modulate bone-cell differentiation, while highlighting the possible benefits of dehydrotumulosic acid isolated from the dichloromethane fraction of W. hoelen for preventing and treating osteoporosis.
This study investigated the improved lipid metabolism effect of 3T3-L1 cells induced by adipocytes using the dichloromethane (DCM) fraction in the organic solvent extract of Wassong (Orostachys japonicus). To confirm the cell cytotoxicity, each of 6 fractions of organic solvent extracts (EtOH, Hexane, DCM, EtOAc, BuOH, and H2O) was examined using MTS assay. As a result, it was confirmed that the DCM extract was stable over the whole range of concentrations, and a DCM fraction was used to confirm the improved lipid metabolism effect. Lipid excretion was measured to confirm the change of lipid metabolism. 3T3-L1 cells induced by adipocytes were treated with DCM extract and stained with oil-red O to evaluate lipid accumulation. As a result, it was confirmed that the lipid efflux was significantly improved. In order to confirm the mechanism of lipid efflux, the mRNA expressions of ABCA1 and ABCG1, which are lipid transport proteins, were confirmed by real-time PCR. Therefore, the present study confirmed that the DCM extract from Orostachys japonicus has the effect of improving the lipid metabolism on 3T3-L1 adipocytes. In addition, the results of this study will be used as the basis for the development of functional foods using Orostachys japonicus and also for conducting research on the detailed mechanisms.
Viticis fructus (fruits of Vitex rotundifolia) is the dried fruit from Vitex rotundifolia; is a traditional medicine for treating inflammation, migraines, chronic bronchitis, headaches, eye pain, and gastrointestinal infections; and demonstrates various bioactivities, including anti-allergic, anti-cancer, and anti-inflammatory effects, which are partly due to its phenolic compound content. This study examines the inhibitory effects of viticis fructus (fruits of Vitex rotundifolia) on MMP-2 and MMP-9 expression using gelatin zymography and RT-PCR in phorbol-12-myristate-13-acetate (PMA)-induced HT-1080 fibro-sarcoma cells. Fruits of Vitex rotundifolia were extracted twice using dichloromethane ($CH_2Cl_2$) and methanol (MeOH). The combined crude extracts ($CH_2Cl_2$ and MeOH) significantly inhibited MMP-2 and MMP-9 activities in gelatin zymography. The combined extracts were fractionated into n-hexane, 85% aqueous methanol (85% aq. MeOH), n-butanol, and water, successively according to polarity. Among all solvent-partitioned fractions, 85% aq. MeOH fractions showed the strongest inhibition on the activation of MMP-2 and MMP-9 in gelatin zymography. In PMA-stimulated HT-1080 cells, the expression levels of MMP-2 and MMP-9 mRNA were also greatly inhibited by the 85% aq. MeOH fraction. These results suggest that viticis fructus can be used as an excellent source for anti-invasive agents.
Park, Yu-Hwa;Lim, Sang-Hyun;Ham, Hun-Ju;Kim, Hee-Yeon;Jeong, Haet-Nim;Kim, Kyung-Hee;Kim, Song-Mun
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.39
no.7
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pp.980-985
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2010
The objective of this study was to isolate and identify anti-inflammatory chemicals in Hippophae rhamnoides L. which was grown in Chuncheon, Korea. Treatment of ethanol extracts from stems, leaves, roots, and fruits to RAW 264.7 cells reduced amounts of nitrite by 56.0, 31.9, 49.1, and 18.9% respectively, compared to only lipopolysaccharide (LPS) treatment which is well-known as a inflammation-inducing agent. The stems were extracted with hexane, dichloromethane, ethyl acetate, butanol, and water and their nitrite contents in RAW 264.7 cells were measured. The dichloromethane extracts showed the highest inflammatory activity, exhibiting 80% reduction of the nitrite content at 1 mg/mL treatment. Activity-directed fractionation of dichloromethane extracts led to the identification of $\beta$-sitosterol as the anti-inflammatory chemical. 0.1 mg/mL treatment of $\beta$-sitosterol inhibited strongly the production of nitrite by 65%, compared to only LPS treatment. These results suggest that stem of H. rhamnoides L. may be useful for inflammation treatment.
The liquid culture extract of Coriolus versicolor was prepared by directly boiling the whole culture broth 7 days after incubation in 12% citrus extract medium. After removal of mycelial debris through filtration, this extract was further extracted with equal volume of ethyl acetate (1 : 1, v/v). The ethyl acetate extracts showed significant antibacterial activities against Stapylococcus aureus CCARM3230 and Psudomonas aeruginosa CCARM2171, which are resistant to several antibiotics. The most active fraction was eluted from a silica gel column with a mixture of dichloromethane and methanol (9 : 1, v/v) and the purity of this active substance was confirmed by HPLC analysis. The results suggest that the purified active substance could be a good source for the development of a new antimicrobial agent, especially for the treatment of antibiotic resistant bacteria.
Background: As a result of analyzing the components of wild Conyza canadensis, it contains physiologically active ingredients, so it is necessary to identify the compound. Purposes: It was to study the compound's molecular structure; a previous study showed that C. canadensis contains antioxidant substances. Methods: The ultrasonic pulverized lysate of C. canadensis stem and leaves was first extracted with 90% methanol and then five organic solvents. Next, the extracts was fractionated by HPLC, LC/MS chromatography, and NMR analyzers identified the molecular structure. Results: 100 g of dry C. canadensis was sonicated in 90% methanol and concentrated under reduced pressure to 11.96 g of a crude extract. Then, this crude was extracted with five types of solvents to obtain 123.8 mg of n-hexane, 448.2 mg of dichloromethane, 1047.7 mg of ethyl acetate (EA), 2563.8 mg of butanol, and 7.04 g of water. The EA extracts were fractionated by LC-MS and then re-fractionated to obtain F1 to F20. Next, the F15 was further fractionated to obtain nine fine fractions. Finally, the F17 fraction was re-fractionated to obtain ten fine fractions. As a result of LC-MS and NMR spectrometer analysis of the F15-7, the structure of this compound was confirmed as 3,5-dicaffeoylquinic acid. As a result of examining the structures of the F17-4 and F17-5 fractions, Quercetin-3-o-β-galactose was identified. In addition, the form of the F17-10 was confirmed to be 1,3,4-tri-caffeoylquinic acid. Conclusions: This study demonstrated that C. canadensis contained phenolic antioxidants, and its utilization may be expected.
This study was aimed at determining the antioxidant and antimicrobial effects of solvent extracts from Asparagus cochinchinensis. The Asparagus cochinchinensis was extracted with water, methanol, ethanol, n-hexane, dichloromethane, ethyl acetate, and ether. The antimicrobial activity of these extracts was determined by modified well diffusion methods against 4 species of respiratory disease bacteria (Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Staphylococcus epidermidis, and Pseudomonas aeruginosa). In addition, the amount of total polyphenol and flavonoid content, and antioxidant activity was evaluated. Ethyl acetate extract of A. cochinchinensis exhibited higher antimicrobial activity against tested microorganisms than water, methanol, ethanol, n-hexane, dichloromethane, and ether extracts. For antioxidant activity, the ethyl acetate extract of A. cochinchinensis exhibited a notable effect on the scavenging of superoxide against DPPH ($IC_{50}=3.81mg/ml$). Finally, the total polyphenol and flavonoid contents were $14{\pm}0.7mg/g$, and $0.50{\pm}0.13mg/g$, respectively. These results can be regarded as basic research into A. cochinchinensis for the prevention of respiratory diseases. The results indicate that A. cochinchinensis may be utilized as a nutraceutical for respiratory diseases when the physiologically active substances of A. cochinchinensis are increased by further study.
The astaxanthin recovery efficiencies were compared in acetonitrile, acetone, methanol, dichloromethane : methanol (1:3, v/v) and ethylacetate : ethanol (1:1, v/v) as a extraction solvent after the grinding of the H. pluvialis cells. The astaxanthin extraction yield in acetone was 1.13~1.29 times higher than other extraction solvents. It was also found that 96.7% of astaxanthin accumulated in H. pluvialis could be recovered by a single extraction. Since astaxanthin exists mainly as astaxanthin esters in H. pluvialis, a gradient reversed-phase HPLC analysis was carried out for the separation of astaxanthin esters from the extracts of H. pluvialis. Among the astaxanthin inside the H. pluvialis cell, free astaxanthin was 45.9% and astaxanthin esters were the rest.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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