• Parasites, Hosts and Diseases
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• 제21권1호
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• pp.41-48
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• 1983

The activity and distribution of aspartate aminotransferase (EC 2.6. 1. 1) and alanine aminotransferase (EC 2.6.1.2) in adult Fascicle hepatica have been studied. Fasciola hepatica was fractionated by differential centrifugation into nuclear, mitochondrial and cytosolic fractions. The activity of GOT and GPT was measured by the method of Reitman and Frankel. Isozyme patterns of those enzyme were also examined by DEAE-cellulose column chromatography. The results obtained were as follows; 1. The activity of aspartate and alanine aminotransferase was about 0.55 unit and 0.92 unit per 1g of Fascicle hepatica, respectively. 2. The activity of those enzymes was relatively low compared with those in mammalian tissues. 3. The distribution of aspartate aminotransferase in the subcellular organelles showed that 71% of the activity was in cytosolic, 24% in mitochondrial and 5% was in nuclear fraction. 4. About 22% of the total alanine aminotransferase activity was found in the mitochondrial fratstion, about 66% in the cytosolic fraction. 5. Aspartate aminotransferase from cytosolic fraction was separated into two types of isozymes, whereas alanine aminotransferase from cytosolic fraction gave only one active peak on DEAE-cellulose column chromatography.

• Journal of Plant Biology
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• 제33권1호
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• pp.73-80
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• 1990

Subcellular distribution of arginase activity was measured in leaves of Canavalia lineata. Both mitochondrial and cytosolic fraction were found to contain the arginase activity. It was noticible that cytosolic fraction contained a substantial amount of arginase activity. Different mobility of arginase from these two fractions was showed on DEAE-Sephacel chromatography and polyacrylamide gel electrophoresis. Also different pI value was showed 6.3 in cytosolic and 6.7, 7.1 in mitochondiral fraction on IEF gel electrophoresis. However, canavaine-dependent-activity (CDA) of arginase in these two fractions were not different. These results indicate that heterogenity of arginase occurs in leaves of C. lineata.

• Journal of Nutrition and Health
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• 제19권4호
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• pp.246-254
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• 1986

이유한 Sprague Dawley 종의 암컷 흰쥐를 두군으로 나누어 각각 pyridoxine이 충분한 식이 (22mg/kg diet)와 pyridoxine이 부족한 식이 (1.2mg/kg diet0로 성장시킨후, 적절한 시기에 임신시켰다. 태어난 새끼가 이유할 때 결핍식이군을 둘로 나누어, 한쪽은 pyridoxine이 충분한 식이로 바꾸어준후, 세군의 쥐를 생후 10-주까지 성장시켰다. 각 군의 새끼쥐가 각각 0, 3, 7, 10 주 되었을대, 간의 mitochondria 및 cytosolic fraction 에 있는 Asparate aminotransferase [ EC 2.6.1.1] activity 및 pyridoxal phosphate의 함량을 측정하였다. 결핍군의 간 aspartate aminotransterase activity는 mitochondria 및 cytosolic fraction에서 각각 대조군에 비해 유의적으로 낮았으며 10-4 M pyridoxal phosphate를 첨가한 후 측정한 total enzyme activity 는 거의 대조군과 비슷하였다. 3 주이후 pyridoxine 이 충분한 식이로 바구어준 회복군에서도 대조군에 비해 유의적으로 낮았으나, 결핍군보다는 높았다. 이두 fraction 에서의 pyridoxal phosphate 함량은 결핍군이 대조군보다 현저히 낮았으며, 회복군은 대조군과 비슷하였다. 이로써, 장기간에 걸친 pyridoxine결핍이간의 aspartate aminotransferase activity 및 pyridoxal phosphate에 현저한 영향을 미치며 이유기 이후의 식이보충에 의해서도 enzyme activity는 쉽게 회복되지 않음을 알 수있다.

• 생명과학회지
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• 제8권1호
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• pp.14-26
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• 1998

본 연구에서는 SDS/polyacrylamide 젤 전기영동에 의한 쥐의 성장과정에 따른 소뇌의 단백질양상의 변화양상과 immunocytochemistry를 이용하여 c-raf a-raf kinase의 정상 소뇌에서의 분포에 대해 관찰 하였으며 western blot을 이용하여 소뇌의 단백질들에서 c-raf의 존재에 대해 살펴보았다. 단백질 양상에서 쥐의 성장에 따라 crude에선,ㄴ 49,200 dalton과 169,000 dalton 사이의 bands가 양적 증가를 보였으며 cytosolic fraction 에서는 37,800 dalton의 band가 양적 증가를 보이는데 비해 membrane fraction 에서는 260,600 dalton의 band가 증가하였다. 이러한 결과로 성장 발달에 따라 고분자 량의 물질들이 이들 소뇌 부위에서 기여하였을 것으로 추정할 수 있었다. Immunocytochemistry에 의한 분석에서는 c-raf와 a-raf가 소뇌의 피질주위에서 조롱박 세포(Purkinje cell) 의 세포질 특히 핵 주변부위에서 강하게 검출되었으며 a-raf에 비해 c-raf가 더 강하게 나타났었다. 그리고 그 외에 Nucleus embolifornis의 큰 neuronal cell의 세포질 부위의 나타남을 볼 수 있었다. Immunoblot에 의한 분석에서는 crude와 cytosolic fraction에서 raf protein kinase의 존재를 확인할 수 있었으며, 이상의 결과들을 종합해 보았을 때 소뇌의 정상의 많은 신경세포(neuronal cell)에 raf protein kinase가 분포되어 있으며 이들이 정상의 cell에서 기능을 가질 것으로 추정된다.

• 한국식품영양과학회지
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• 제34권2호
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• pp.158-161
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• 2005

본 연구에서 는 P japonica와 c. mifitaris에서 혈당강하 기능성 성분을 분리하고 간세포내 glucokinase활성을 측정하여 항당뇨 작용 기전을 규명 하고자 하였다. 동충하초에서 분리 된 fraction A의 간세포내 glucokinase 활성은 대조군과 비교하여 C. militaris는 371.4%, P. japonica는 379%로 증가하였다. Fraction B의 활성은 C. miliraris 314.2%, P. japonim는 147.4% 증가하여 C. milifaris에서 추출된 fraction B는 P. japonin와 비교했을 때 2배 이상의 glucokinase의 활성 증가를 나타냈다. 이상의 결과를 근거로 C. militaris의 혈당 강하 작용을 in vivo에서 검증한 결과 C. militaris 첨가군의 glucokinase활성은 대조군에 비해 1300% 이상의 활성 증가를 나타냈다. 결론적으로 C. militaris추출물은 간세포 내 glucokinase활성을 현저히 증가시킴으로써 혈중 포도당의 급격한 상승을 억제할 수 있을 것으로 판단된다.

• BMB Reports
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• 제31권2호
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• pp.170-176
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• 1998

Phosphatidylethanolamine N-methyltransferase (PEMT) is known to be a membrane-associated protein. However, cytosolic PEMT was detected when sufficient amounts of exogenous phospholipids were added in the incubation media. The methylation of phospholipids was measured by the incorporation of the $[^3H]-methyl$ group from S-adenosylmethionine and the methylated phospholipids were analyzed by thinlayer chromatography. The essence of the assay condition for the cytosolic enzyme was the inclusion of 200 ${\mu}g$ of each substrate, phosphatidylethanolamine (PE), phosphatidyl N-monomethylethanolamine (PME) and phosphatidyl N,N-dimethylethanolamine (PDE), in the reaction mixture of 100 ${\mu}l$. The subcellular fractionation of brain PEMT activities revealed that approximately 38.1 % for PME, 39.5% for PDE, and 22.4% for PC formation was present in the cytosolic fraction. The general properties of cytosolic PEMT were characterized and compared with those of neuronal nuclei PEMT.

• Journal of Photoscience
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• 제2권1호
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• pp.1-5
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• 1995

The activity of phospholipase A$_2$ (PLA$_2$) was identified and characterized from cytosolic and membrane fractions of oat cells, respectively. PLA$_2$ activity was determined fluorometrically in the presence of serum albumin using phospholipids labeled at sn-2-acyl position with 10-pyrenyldecanoic acid. When the cell-free extracts of oat tissues were fractionated by ultracentrifugation at 100,000 x g and the PLA$_2$ activity was assayed, we found that most of the PLA$_2$ activity was revealed from the cytoplasmic fraction rather than from the membrane fraction. The activity of cytosolic PLA$_2$ was dependent on Ca$^{2+}$ concentration and the optimum concentration of Ca$^{2+}$ was found to be 100 $\mu$M. It was also found that PLA$_2$ could be translocated toward the membrane site from the cytosol upon increasing Ca$^{2+}$ concentration. These results might suggest that an increased [Ca$^{2+}$]$_i$ by phytochrome action could promote the translocation of the cytosolic PLA$_2$ toward the membrane site.

• 한국응용약물학회:학술대회논문집
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• 한국응용약물학회 1994년도 춘계학술대회 and 제3회 신약개발 연구발표회
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• pp.318-318
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• 1994

Addition of AAF to murine splenocytes culture produced a dose-related suppression of lymphoproliferative response to lipopolysaccharide (LPS). The time course of the suppression showed that a significant inhibition was occured after a 18 hr AAF treatment. Total protein kinase C activity in splenocytes was decreased to 72% of control level after a 18 hr AAF treatment. Phosphorylation of a PKC specific 80 kDa protein was increased by LPS and AAF down-regulated LPS-induced PKC activity. LPS-induced phosphorylation of overall proteins in membrane and cytosolic fraction were also decreased by the treatment of AAF. A significant increase of PKC activity in membrane fraction was noticed within 10 min of AAF treatment compared to LPS alone and then gradually decreased to LPS level in 60 min. Meanwhile, PKC activity in cytosolic fraction was increased slightly in 10 min by the treatment of AAF and then decrease to 80% LPS level in 30 min. These results suggested that suppressive effect of AAF on LPS-induced lymphoproliferative response may be associated with the down-regulation of PKC and other susceptible kinases in spleen cells.

• Applied Biological Chemistry
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• 제41권6호
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• pp.447-450
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• 1998

Spraque-Dawley계 수컷랫트에 계통분획한 단풍취의 각 분획물을 경구투여하고 혈청 ethanol농도와 간의 ADH활성에 미치는 효과를 검색 추적한 결과 알코올대사를 촉진시키는 성분은 주로 에탄올가용부에, 억제시키는 성분은 에탄올불용부에 주로 존재함을 추정할 수 있었고 현재 활성성분을 분리중에 있다.

• Journal of Chest Surgery
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• 제36권9호
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• pp.666-673
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• 2003

폐암의 주된 원인으로 알려진 흡연은 그 악성세포 발현기전이 아직 정확히 규명된 바 없다. 이에 저자들은 흡연에 의한 발암성의 지표로 흡연 중에 특이적으로 존재하는 강력한 발암물질인 NNK(4-(methylnitrosamino)-1-(3-pyridyl)-1-butanone)를 이용하여 흡연에 따른 폐암의 발생과 그 Protein kinase C (PKC) isoform과 관련된 기전에 관한 연구를 시도하였다. 대상 및 방법: 인체 상피세포를 NNK에 노출시킨 후 saturation density, soft agar colony formation, cell aggregation 및 foci의 출현 등의 양상을 파악하여 세포 발암성 여부를 관찰하였으며 NNK를 15분간 노출시킨 후 PKC의 변화는 세포 내 PKC isoform의 양을 cytosolic fraction과 membrane fraction으로 분리하여 측정하여 분석하였다. 결과: NNK 투여군에서 saturation density, soft agar colony formation, cell aggregation 및 foci의 출현 시기 등의 세포 발암성을 뚜렷이 나타내었으며 PKC isoform분석의 경우 PKC-$\alpha$의 membrane fraction의 뚜렷한 증가를 보였으며 이러한 활성은 용량-의존적인 형태를 유지하였다. PKC-$\varepsilon$은 NNK 처리 시 용량-의존적으로 cytosol fraction의 감소 및 membrane fraction의 증가를 뚜렷하게 보였고 NNK에 의한 PKC-λ의 변화는 감지되지 않았다. 결론: 본 연구는 화학적 발암물질인 NNK가 인체발암화에 관여함을 재차 확인하면서 초기 과정에 관여하는 PKC isoform의 변화를 분석함으로써 total PKC활성이 아닌 isoform 각각에 대한 변화를 확인하였다는 점에서 앞으로 인체상피세포 기원의 폐암 생성 기전 연구에 기여할 것으로 생각한다.