시판 9개 회사의 요구르트를 $25^{\circ}C$에 보관하면서 yeast 오염에 의한 팽창 현상이 관찰되는 시료에서 10균주의 yeast와 starter를 분리하여 potassium sorbate농도에 따른 생육 특성을 조사한 결과 start로 사용되고 있는 유산균중 potassium sorbate에 대해 영향을 받지 않는 균주가 있는 반면 다소간의 생육 억제 현상을 보이는 균주를 관찰할 수 있었다. 분리 yeast는 모두 성장이 억제되었으며 potassium sorbate 농도가 증가함에 따라 억제 현상은 더욱 뚜렷하였다. 선발된 유산균과 yeast를 skim milk에 혼합 배양한 결과 유산균은 potassium sorbate 0.3% 첨가에 의해 영향을 받지 않았으며, yeast의 경우 성장 현상은 관찰되지 않았으나 potassium sorbate 첨가구는 배양 18시간 이후 생균수가 감소하는 경향을 나타내었다. 선발된 유산균으로 yogurt를 제조한 후 선발 yeast를 오염시켜 $4{\pm}1{\circ}C$와 $25{\pm}1{\circ}C$에서 7일간 저장하면서 생균수의 변화를 조사한 결과 전 저장 기간중 유산균의 변화는 관찰할 수 없었으며 $10^9/ml$을 유지하였다. 오염 yeast는 $4{\pm}1{\circ}C$의 경우 대조구에서는 성장을 관찰할 수 없었으며, potassium sorbate 첨가구의 경우 저장이 계속됨에 따라 완만하게 감소하였고, $25{\pm}1{\circ}C$의 경우에서도 0.3% 첨가구의 경우 차츰 감소하는 경향을 나타내었다.
In order to study ecology of microorganisms during Takju brewing, microflora changes were examined fromm the start to the sixth day of Takju fermentation in 24 hours intervals. Takju made from rice, flour and dried sweet potato in a liter volume open container at the laboratory and a sanple of Takju brewing factory were studied for their microflora and their changes during fermentationl together with a sample of Kokja. Results obtained were as follows ; 1. The followings were the identified microorganisms in Kokja. The molds ; Absidia spinosa, Aspergillus parasiticus. The yeasts ; Candida melinii, Candida Solani, Hansenula anomala. The bacteria ; Luctobacillus casei, Leuconostoc mesenteroides, Bacillus subtilis, Bacillus pumilus. 2. Torulopsis inconspicua, Lactobacillus casei, Leuconotoc mesenteroides, Bacillus subtilis, Bacillus pumilus were isolated from main mash of laboratory-made Takju samples. The yeast, Torupsis inconspicua which was not present in Kokja and, probably of a contaminant yeast, dominated the yeast flora of Takju mash of rice, flour and sweet potato of labotatory brewing. The laboratory brewing lost also always showed large population of lactic acid bacteria flora. 3. None of the wild yeasts which were present in Kokja appeared in Takju mashes. The Kokja appears to be of no use as the yeast source for Takju fermentation. Also the Kokja appears to be of not so effective amylolytic and proteolytic enzyme sources considering the microflora characteristics. Probably the major role of Kokja in Takju fermentation may be to contribute in taste formation. 4. Inoculation of Sacharomyces cerevisiae into the mash to the level of $10^7$ ml at the start of fermentation greatly changed the ecological aspects eliminating conditions of rather slow rising of natural contaminant yeast populaiton and fermentation which might give rise to prosperity of lactic acid and Bacillus bacteria that would be avoidable. 5. Examination of microflora of the large factory scale Takju fermentation showed the quite similar pattern of microflora and their changes to that of the cultured yeast-inoculated laboratory batch Takju fermentation. The cultured yeast dominated as the only predominant microflora, and the lactic acid bacteria flora were completely suppressed and aerobic bacteria, greatly. Probably this may be the regular microflora pattern of normal Takju fermentation. The role of lactic acid bacteria and aerobic bacteria in Takju fermentation may not be clear yet from this experiment alone.
본 연구는 야생 killer 효모에 의한 포도주의 이상발효를 방지하고 오염균주에 내성이 강한 killer 특성을 이용하는 전 단계로서 국내 포도에서 생육하는 야생 killer 효모를 분리하고자 수행되었다. 그 결과 17개의 killer 효모 균주를 분리하였고 그 중 K109와 K112의 killer 활성이 가장 강하였으며, K117 균주의 killer 활성이 가장 약하였다. 분리된 17개의 균주는 서로의 상호작용에 의하여 생육을 억제하는 특성을 보이지 않았으며, 생리학적 및 배양학적 특성을 조사한 결과 지금까지 killer 효모로서 보고된 적이 없는 Candida dattila로 동정되었다. 이에 각 균주를 Candida dattila K101-K117로 명명하였다.
가공유는 우유에 과즙 등을 첨가하여 우유의 성분을 변화시킨 우유로서 백색 시유와는 달리 가공공정 중 각종 첨가물에 의해 미생물이 오염되어 품질악화를 초래할 수도 있다. 미생물 오염에 의한 가공유의 품질악화를 방지하고 품질개선을 위해 chitosan의 이용 가능성을 검토하였다. 시판 가공유에서 api 20E kit 와 api 20C AUX kit 로 동정한 결과 Saccharomyces cerevisiae와 Pseudomonas fluorescence를 분리동정하였다. 0.01%, 0.03%, 0.05%, 0.1% chitosan 을 함유한 YM broth에서 분리 yeast의 성장을 측정한 결과 0.03% chitosan 첨가구에서 배양 12시간후 성장이 완전히 저해되었다. 분리 P. fluorescence는 chitosan 0.03%를 함유한 TSB 에서 2~3 l$og_{10}$ cycle 성장이 억제되었다. Chitosan 0.03%를 첨가한 가공 시유를 제조하여 15일 동안 $4^{\circ}C$, 1$0^{\circ}C$, $25^{\circ}C$에서 저장하면서 품질특성을 조사한 결과 $4^{\circ}C$와 1$0^{\circ}C$에서는 대조구와 뚜렷한 차이를 나타내지 않았으나 $25^{\circ}C$ 저장의 경우 대조구는 저장 2일째부터 이화학적 변화(pH, 산도)를 나타낸 반면 chitosan 첨가구의경우 저장 15일 동안 저장초기와 거의 같은 수준을 나타내었다. Chitosan 첨가 가공유는 5% 유의수준에서 taste는 감소하였으며 texture는 증가하여, chitosan 첨가에 의한 가공유의 기호성 저하는 없었다.
본 연구에서는 발효식품의 저장기간을 연장하거나 이상발효를 방지하기 위해 미생물 유래의 천연 항균성 물질인 killer toxin 생산 균주인 K3, K5, K11, K12, K15를 전통누룩으로부터 분리하였다. 분리된 killer toxin 생산 균주 중 식중독의 원인균인 Salmonella Typhimurium 및 장염비브리오의 원인균인 Vibrio parahaemolyticus의 생육을 저해하며, killer toxin 활성이 가장 우수한 K15를 최종 선발하고 이를 Biolog사 동정시스템과 ITS영역의 염기서열 homology를 조사하여 동정한 결과, Pichia anomala에 99% 상동성을 나타내어 Pichia anomala K15로 명명하였다. P. anomala K15가 생산하는 killer toxin은 단백질 분해효소에 의해 불활성화 되므로 인체에서 단백질 분해효소에 의해 쉽게 분해가 가능한 안전한 항균물질임을 확인할 수 있었다. 또한 p. anomala K15는 에탄올 내성은 약하나 고농도의 당에서 저항성이 크므로 주조 발효초기 환경에서의 이상발효를 방지할 수 있을 것으로 사료되어진다.
Yeast Dekkera/Brettanomyces bruxellensis is probably the most common contaminant in wineries and ethanol production processes. The considerable economic losses caused by this yeast, but also its ability to produce and tolerate high ethanol concentrations, make it an attractive subject for research with potential for industrial applications. Unfortunately, efforts to understand the biology of D. bruxellensis and facilitate its broader use in industry are hampered by the lack of adequate procedures for delivery of exogenous DNA into this organism. Here we describe the development of transformation protocols (spheroplast transformation, LiAc/PEG method, and electroporation) and report the first genetic transformation of yeast D. bruxellensis. A linear heterologous DNA fragment carrying the kanMX4 sequence was used for transformation, which allowed transformants to be selected on plates containing geneticin. We found the spheroplast transformation method using 1M sorbitol as osmotic stabilizer to be inappropriate because sorbitol strikingly decreases the plating efficiency of both D. bruxellensis spheroplast and intact cells. However, we managed to modify the LiAc/PEG transformation method and electroporation to accommodate D. bruxellensis transformation, achieving efficiencies of 0.6-16 and 10-20 transformants/${\mu}g$ DNA, respectively. The stability of the transformants ranged from 93.6% to 100%. All putative transformants were analyzed by Southern blot using the kanMX4 sequence as a hybridization probe, which confirmed that the transforming DNA fragment had integrated into the genome. The results of the molecular analysis were consistent with the expected illegitimate integration of a heterologous transforming fragment.
Kim, Hyobi;Yum, Bora;Yoon, Sung-Sik;Song, Kyoung-Ju;Kim, Jong-Rak;Myeong, Donghoon;Chang, Byungjoon;Choe, Nong-Hoon
한국축산식품학회지
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제36권1호
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pp.100-108
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2016
Microbiological contamination of eggs should be prevented in the poultry industry, as poultry is one of the major reservoirs of human Salmonella. ClO2 gas has been reported to be an effective disinfectant in various industry fields, particularly the food industry. The aims of this study were to evaluate the antimicrobial effect of chlorine dioxide gas on two strains of Salmonella inoculated onto eggshells under various experimental conditions including concentrations, contact time, humidity, and percentage organic matter. As a result, it was shown that chlorine dioxide gas under wet conditions was more effective in inactivating Salmonella Enteritidis and Salmonella Gallinarum compared to that under dry conditions independently of the presence of organic matter (yeast extract). Under wet conditions, a greater than 4 log reduction in bacterial populations was achieved after 30 min of exposure to ClO2 each at 20 ppm, 40 ppm, and 80 ppm against S. Enteritidis; 40 ppm and 80 ppm against S. Gallinarum. These results suggest that chlorine dioxide gas is an effective agent for controlling Salmonella, the most prevalent contaminant in the egg industry.
Ochratoxin A (OTA)는 주로 Aspergillus가 생성하는 진균 독소의 하나로 저장 곡물의 흔한 오염물질로 인간과 가축의 건강을 위협하고 있다. 본 연구의 목적은 분리 세균인 Bacillus subtilis AF13과 Streptomyces shenzhenensis YR226의 OTA 생성 Aspergillus 균주들에 대한 생장과 OTA 생성 저해능 조사이다. OTA 생성 세 균주들의 균사 생장과 포자 형성에 대한 항진균활성은 한천 평판에서 AF13과 YR226 균주와의 공동배양에 의해 조사되었다. AF13과 YR226은 10일 배양 중 진균 집락 직경을 각각 77.58%와 78.48% 감소시켰으며, 두 균주 모두 포자 형성을 99%까지 저해하였다. YR226은 또한 세 진균 균주의 포자 발아도 91% 이상 감소시켰다. Yeast extract sucrose 배지에서 Aspergillus와 AF13 또는 YR226 균주를 동시배양하였을 때 세 종류 진균 모두 균사체 생장과 OTA 생성이 감소하였다. 특히 AF13은 A. alutaceus의 균사체 생장을 완전히 저해하고 OTA 생성은 99% 감소시켰으며, YR226은 균사체 생장과 독소 생성을 99%까지 저해하였다. AF13과 YR226이 생성하는 항진균물질에는 siderophore, chitinase, protease, ${\beta}$-1,3-glucanase와 biosurfactant가 포함된다. 이 결과는 AF13과 YR226이 독소생성 진균으로부터 가치있는 농작물을 보호하는 생물학적 방법으로 이용될 수 있으며, 따라서 농업과 사료산업에서 경제적 피해를 감소시킬 수 있을 것이다.
Estuarine sediments are frequently polluted with hydrocarbons from fuel spills and industrial wastes. Polycyclic aromatic hydrocarbons (PAHs) are components of these contaminants that tend to accumulate in the sediment due to their low aqueous solubility, low volatility, and high affinity for particulate matter. The toxic, recalcitrant, mutagenic, and carcinogenic nature of these compounds may require aggressive treatment to remediate polluted sites effectively. In petroleum-contaminated sediments near a petrochemical industry in Gwangyang Bay, Korea, in situ PAH concentrations ranged from 10 to 2,900 ${\mu}g/kg$ dry sediment. To enhance the biodegradation rate of PAHs under anaerobic conditions, sediment samples were amended with biostimulating agents alone or in combination: nitrogen and phosphorus in the form of slow-release fertilizer (SRF), lactate, yeast extract (YE), and Tween 80. When added to the sediment individually, all tested agents enhanced the degradation of PAHs, including naphthalene, acenaphthene, anthracene, fluorene, phenanthrene, fluoranthene, pyrene, chrysene, and benzo [a] pyrene. Moreover, the combination of SRF, Tween 80, and lactate increased the PAH degradation rate 1.2-8.2 times above that of untreated sediment (0.01-10 ${\mu}g$ PAH/ kg dry sediment/day). Our results indicated that in situ contaminant PAHs in anoxic sediment, including high molecular weight PAHs, were degraded biologically and that the addition of stimulators increased the biodegradation potential of the intrinsic microbial populations. Our results will contribute to the development of new strategies for in situ treatment of PAH-contaminated anoxic sediments.
Kandasamy, Sujatha;Park, Won Seo;Yoo, Jayeon;Yun, Jeonghee;Kang, Han Byul;Seol, Kuk-Hwan;Oh, Mi-Hwa;Ham, Jun Sang
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제33권6호
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pp.1002-1011
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2020
Objective: This study was conducted to determine the composition and diversity of the fungal flora at various control points in cheese ripening rooms of 10 dairy farms from six different provinces in the Republic of Korea. Methods: Floor, wall, cheese board, room air, cheese rind and core were sampled from cheese ripening rooms of ten different dairy farms. The molds were enumerated using YM petrifilm, while isolation was done on yeast extract glucose chloramphenicol agar plates. Morphologically distinct isolates were identified using sequencing of internal transcribed spacer region. Results: The fungal counts in 8 out of 10 dairy farms were out of acceptable range, as per hazard analysis critical control point regulation. A total of 986 fungal isolates identified and assigned to the phyla Ascomycota (14 genera) and Basidiomycota (3 genera). Of these Penicillium, Aspergillus, and Cladosporium were the most diverse and predominant. The cheese ripening rooms was overrepresented in 9 farms by Penicillium (76%), while Aspergillus in a single farm. Among 39 species, the prominent members were Penicillium commune, P. oxalicum, P. echinulatum, and Aspergillus versicolor. Most of the mold species detected on surfaces were the same found in the indoor air of cheese ripening rooms. Conclusion: The environment of cheese ripening rooms persuades a favourable niche for mold growth. The fungal diversity in the dairy farms were greatly influenced by several factors (exterior atmosphere, working personnel etc.,) and their proportion varied from one to another. Proper management of hygienic and production practices and air filtration system would be effective to eradicate contamination in cheese processing industries.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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