Purpose: This study was designed to investigate the anti-tumor metastasis by immunomodulating effects of extracts of Prunellae Spica. Methods: Antimetastatic experiment was conducted in vivo by using colon 26-M3.1 carcinoma. And we observed cytotoxicity of Prunellae Spica on colon 26-M3.1 carcinoma, L5178Y-R lymphoma cell, hela cell and macrophage. To observe the immnomodulating effects of Prunellae Spica, we estimated IL-6, IL-10, IL-12, TNF-${\alpha}$ from peritoneal macrophages. And we evaluated the activation of NK cell by using anti-asialo-GM1 serum. Results: We found that the administration of Prunellae Spica extracts significantly inhibited tumor metastasis in vivo. In an in vitro cytotoxicity analysis, cell growth are closer to 100% in case of colon 26-M3.1 carcinoma, L5178Y-R lymphoma cell, hela cell at low concentration. In case of macrophage, cell proliferation is closer to 100% less than $62.5{\mu}g/m{\ell}$ of Prunellae Spica extracts. The level of cytokine such as IL-6, IL-10, IL-12 which stimulates Prunellae Spica extracts was increased in dose-dependent manner compared to the control group. TNF-${\alpha}$ is hardly secreted less than $250{\mu}g/m{\ell}$ The depletion of NK cells by anti-asialo GM1 serum partly abolished the inhibitory effect of Prunellae Spica on tumor metastasis. Conclusion: Prunellae Spica appears to have considerable activity on the anti-metastasis by activation the immune system such as macrophage and NK cell.
Activin is a multifunctional growth and differentiation factor of the growth factor-beta (TGF-${\beta}$) superfamily, which inhibits the proliferation of colon cancer cells. It induces phosphorylation of intracellular signaling molecules (Smads) by interacting with its type I and type II receptors. Previous studies showed that human activin receptor-interacting protein 2 (hARIP2) can reduce activin signaling by interacting with activin type II receptors; however, the activity of hARIP2 in colon cancer has yet to be detailed. In vitro, overexpression of hARIP2 reduced activin-induced transcriptional activity and enhanced cell proliferation and colony formation in human colon cancer HCT8 cells and SW620 cells. Also, hARIP2 promoted colon cancer cell apoptosis, suggesting that a vital role in the initial stage of colon carcinogenesis. In vivo, immunohistochemistry revealed that hARIP2 was expressed more frequently and much more intensely in malignant colon tissues than in controls. These results indicate that hARIP2 is involved in human colon tumorigenesis and could be a predictive maker for colon carcinoma aggressiveness.
대장암의 발생에는 adenoma-carcinoma sequence 가설과 de novo cancer 가설이 있다. 서양에서는 adenoma-carcinoma sequence에 의해 주로 대장암이 발생한다고 생각하지만 최근 일본을 중심으로 1 cm 이하의 작은 용종에서 암 조직이 많이 발견되면서 어느 가설이 옳은 것인지에 대한 논란이 되고 있다. 이에 우리나라 사람에서의 작은 용종의 특성을 알고자 본 연구를 시행하였다. 연구 대상은 1999년 5월부터 1999년 9월까지 각종 소화기 증상 및 대장암의 감시검사를 원하는 환자를 대상으로 전향적 검사를 시행하였고 용종의 대장 내시경 소견과 조직검사 소견을 분석하여 용종의 발견빈도, 위치, 크기, 모양, 조직소견 등을 관찰하고 시술의 안정성을 조사 하였다. 전체 508명의 환자 중 210명에서 대장 용종이 발견되었고(41.3%), 나이별 분포는 50대와 60대에서 가장 많았으며 나이가 증가 할수록 의미있게 용종의 빈도가 증가하였으며, 남녀의 차이는 없었다. 용종의 육안적 소견상 Yamada type II가 가장 많았으며 1 cm 이하 크기가 395개였고 1 cm 이상인 것이 13개였다. 위치는 상행결장, 직장, S자형 결장 순으로 많았다. 1 cm 이하인 용종의 위치도 상행 결장, 직장, S자형 결장 순으로 많았다. 용종의 제거는 EMR을 가장 많이 이용하였고, cold polypectomy나 생검겸자를 이용한 제거, 고주파 올가미법으로 하였고 여러가지 이유로 제거가 불가능한 것은 생검겸자로 생검만 하였다. 용종제거후 출혈이나 천공 등의 합병증은 전례에서 없었고 합병증을 예방하기 위해 19예에서 clipping을 시행하였다. 전체 408개의 용종 중 5개의 용종에서 암성 조직이 발견되었다. 간 만곡부와 상행결장에 1.5cm, 2.0cm 크기의 유경성 용종이었고 조직 검사상 tubulovillous adenoma에 국소 암성 조직을 포함하고 있었으며 1 cm 이하의 용종은 상행결장, 직장, 간 만곡부에 0.4 cm, 0.5 cm, 0.6 cm 크기의 용종에서 암 조직이 발견 되었는데 모두 주위에 선종 조직이 없는 암성 용종이었다. 결론적으로 우리나라 사람에서 용종은 결코 드문 질환이 아니며 작은 용종에서도 암 조직을 관찰할 수 있기 때문에 대장 내시경 검사시 용종이 발견되면 반드시 모두 제거하여 검사하는 것이 좋으며 용종 절제술 후에 합병증을 예방하는 내시경적 시술을 병행하면 합병중음 충분히 예방할 수 있다고 생각하며 우리나라 사람에서 대장암의 발생이 모두 adenoma-carcmoma scquence에 의해서 발행하는 것인지에 대해서는 앞으로 더 많은 연구가 필요할 것으로 생각된다.
본 연구는 만형자(Vitex rotundifolia)의 세포독성을 확인하기 위한 목적으로 methanol, ethanol, acetone으로 추출한 뒤, 인간 유래의 대장암 세포주인 HT-29에 처리하여 MTT reduction assay를 이용하여 실험을 하였다. 그 결과, 모든 만형자 추출물에서 농도 의존적으로 성장 저해 효과가 나타났으며, 그 중에서도 acetone 추출물을 50 ${\mu}g/ml$ 농도로 처리 시 18%로 가장 높은 항암 효과를 보였다. 또한 각 용매별 추출물을 50 ${\mu}g/ml$를 처리하여 HT-29 세포주의 성장을 관찰한 결과, acetone 추출물은 대조구에 비하여 암세포의 수축 등 형태변화가 두드러지게 나타났으며, Hoechst 33342 staining을 통하여 apoptotic body가 형성된 것을 확인 하였다. 그리고 가장 활성이 좋은 acetone 추출물을 용매 분획하여 얻은 분획물 중, n-hexane 분획물에서 농도 의존적으로 세포독성을 나타냄을 알 수 있었다. 또한 만형자의 n-hexane 분획물은 다른 대장암 세포주 SW620에 대해서도 50 ${\mu}g/ml$ 농도에서 대조군에 비하여 7배 정도의 높은 세포독성을 나타내고 있음을 MTT reduction assay와 LDH release assay를 통하여 확인 할 수 있었다.
It is reported that sinomenine (SIN) and 5-fluorouracil (5-FU) both are effective for colon cancer, but their cooperative suppressive effects and toxicity remain to be clarified in detail. This study aimed to determine suppressive effects and toxicity of sinomenine (SIN) plus 5-fluorouracil (5-FU) on LoVo colon carcinoma cells in vitro and in vivo. CCK-8, Hoechst 33258 staining and an annexin V-FITC/PI apoptosis kit were used to detect suppressive effects. Western blotting was applied to investigate the essential mechanism underlying SIN and 5-FU-induced apoptosis. SIN or 5-FU or both were injected into nude mice, and then suppressive effects and side effects were observed. SIN plus 5-FU apparently inhibited the proliferation of LoVo cells and induced apoptosis. Moreover the united effects were stronger than individually (p<0.05). The results of annexin V-FITC/PI staining and Hoechst 33258 staining showed that the percentage of apoptotic cells induced by SIN and 5-FU combined or alone was significantly higher than the control group (p<0.05). Expression of Bax and Bcl-2 was up-regulated and down-regulated respectively. SIN or 5-FU significantly inhibited effects on the volume of tumour xenografts and their combined suppressive effects were stronger (p<0.05). No obvious side effects were observed. It was apparent that the united effects of SIN and 5-FU on the growth of colorectal carcinoma LoVo cells in vitro and in vivo were superior to those using them individually, and it did not markedly increase the side effects of chemotherapy.
조각인(Gleditsiae Semen)은 동아시아 지역에서 장 기능을 향상시키는 등의 여러 가지 민간요법으로 사용되는 한약재이다. 본 연구에서는 조각인의 항암활성을 검색하기 위한 목적으로 methanol, ethanol, acetone으로 추출한 뒤, 인간 유래의 대장암 세포주 HT-29에 처리하여 각 추출물의 암세포 성장 억제능을 확인하기 위하여 MTT-dye reduction assay를 이용하여 실험하였다. 그 결과, methanol 추출물에서 가장 높은 세포독성을 확인할 수 있었고, ethanol 추출물에서도 비교적 높은 암세포 성장 억제능을 볼 수 있었으나, acetone 추출물에서는 거의 세포독성이 나타나지 않았다. 그리고 추출물들을 $25\;{\mu}g/ml$의 농도로 암세포에 처리하여 위상차 현미경으로 세포주의 형태학적 변화를 관찰한 결과에서도 methanol 추출물에서의 활성이 가장 강력하게 나타남을 알 수 있었다. 조각인의 항암활성물질들의 용매특성을 알아보기 위하여 methanol 추출물을 극성도에 따라 용매분획 하여 분리한 각 분획물의 세포독성을 확인한 결과, water층 분획물에서 농도 의존적으로 세포독성을 나타냄을 확인하였다. 또한 조각인의 water층 분획물은 또 다른 대장암 세포주인 SW620에 대해서도 대조군에 비해 $25\;{\mu}g/ml$의 농도에서 2배 정도 높은 항암활성을 나타내고 있음을 MTT reduction assay와 LDH release assay를 통하여 확인 할 수 있었다.
Background: A human orthologue of mouse S100A6-binding protein (CacyBP), Siah-1-interacting protein (SIP) had been shown to be a component of novel ubiquitinylation pathway regulating $\beta$-catenin degradation. The role of the protein seems to be important in cell proliferation and cancer evolution but the expression pattern of SIP in actively dividing cancer tissues has not been known. For the elucidation of the role of SIP protein in carcinogenesis, it is essential to produce monoclonal antibodies specific to the protein. Methods: cDNA sequence coding for ORF region of human SIP gene was amplified and cloned into an expression vector to produce His-tag fusion protein. Recombinant SIP protein and monoclonal antibody to the protein were produced. The N-terminal specificity of anti-SIP monoclonal antibody was conformed by immunoblot analysis and enzyme linked immunosorbent assay (ELISA). To study the relation between SIP and colon carcinogenesis, the presence of SIP protein in colon carcinoma tissues was visualized by immunostaining using the monoclonal antibody produced in this study. Results: His-tag-SIP (NSIP) recombinant protein was produced and purified. A monoclonal antibody (Korea patent pending; #2003-45296) to the protein was produced and employed to analyze the expression pattern of SIP in colon carcinoma tissues. Conclusion: The data suggested that anti-SIP monoclonal antibody produced here was valuable for the diagnosis of colon carcinoma and elucidation of the mechanism of colon carcinogenesis.
비특이적인 위장관 징후나 증상이 있는 환자를 우선적으로 초음파검사를 시행 해보면 결직장에 국한성 종괴나 분절성 벽비후 등을 묘출해 낼 수 있다. 저자들은 다양한 증례를 통하여 대장암의 초음파검사상 특징적인 소견과 유용성이 있는지를 살펴보았다. 대장조영촬영술을 실시하기 전 복부 초음파검사로 대장암 소견을 보여 수술로 확진된 11명과 타 병원에서 대장암으로 진단 받고 치료를 받고자 내원한 환자 40명을 중심으로 총 51명의 초음파검사 결과를 분석하였다. 대장암 발생부위는 결장 및 직장에서 27예(53%)로 가장 많았고, $40{\sim}50$대(60%)에서 암 발생율이 높았으며, 남녀 비율은 비슷했다. 초음파검사의 비교적 특징적인 소견은 부분적인 대장벽 비후 42예, 종괴형태 9예로 나타났다. 복부동통, 종괴, 배변습관의 변화 등 비특이적인 증상이 있는 환자에서 초음파검사로 대장암의 가능성이 있는 불규칙한 종괴나 분절성 벽비후를 쉽게 찾아 낼 수 있었다. 초음파검사는 고통이 없고 비침습적인 검사로서 내부장기의 검사를 하는데 유용하며, 복부검사 시 위장관을 포함하여 검사한다면 위장관 질환 등을 보다 조기에 발견할 수 있을 것으로 기대된다.
대한약학회 2003년도 Proceedings of the Convention of the Pharmaceutical Society of Korea Vol.2-2
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pp.150.2-151
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2003
We have focused on various biological activities of acharan sulfate (AS) isolated from the giant African snail Achatina fulica. In a previous study, AS showed antiangiogenic and immunomodulating activity. We also investigated antitumor activity of AS. In vitro AS had no cytotoxicity within 0 to 200 ug/ml in tumor cells such as Lewis lung carcinoma(LLC) , KM1214 (human colon cancer cell) and Caki-1 (human kidney cancer cell) by both MTT and SRB assay. In vivo AS was used to treat C57BL/6 mice bearing LLC by subscutaneous injection. (omitted)
Molecular-targeted therapy has gained attention because of its high efficacy and weak side effects. Previously, we confirmed that transmembrane 4 superfamily member 5 protein (TM4SF5) can serve as a molecular target to prevent or treat hepatocellular carcinoma (HCC). We recently extended the application of the peptide vaccine, composed of CpG-DNA, liposome complex, and TM4SF5 peptide, to prevent colon cancer in a mouse model. Here, we first implanted mice with mouse colon cancer cells and then checked therapeutic effects of the vaccine against tumor growth. Immunization with the peptide vaccine resulted in robust production of TM4SF5-specific antibodies, alleviated tumor growth, and reduced survival rate of the tumor-bearing mice. We also found that serum levels of VEGF were markedly reduced in the mice immunized with the peptide vaccine. Therefore, we suggest that the TM4SF5-specific peptide vaccine has a therapeutic effect against colon cancer in a mouse model.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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