본 연구는 에탄올 농도별(0, 30, 50, 70, 100 %)로 추출한 사매추출물의 항산화 효과를 Oxygen Radical Absorbance Capacity(ORAC)로 평가한 결과 30 % 에탄올 추출물에서 가장 우수하였다. 따라서 30 % 에탄올 추출물의 주름 완화에 관련한 효능 및 효과를 확인하기 위하여 마우스 유래 섬유아세포에 대한 세포 독성, MMP-8 collagenase 억제 활성 검사를 실시하였다. 그 결과 30 % 에탄올 사매추출물을 섬유아세포에 처리한 결과 세포 독성이 없었고, 20 %의 MMP-8 collagenase 억제 활성을 보였다. 사매 추출물 1 %가 함유된 Di-Wrinkle Free Cream (DWFC)으로부터 35 ~ 50세의 21명 여성을 대상으로 하루에 2번 도포하여 8주간 인체 안전성과 주름개선 임상평가를 수행하였다. 주름 평가 방법은 3차원 입체 측정기(PRIMOS)를 이용하여 평가를 하였다. DWFC에 대한 안전성 평가는 피험자 방문 시 마다 이상반응, 부종, 인설, 가려움, 자통, 작열감, 뻣뻣함, 따끔거림이나 다른 이상반응이 발생하는지 육안평가와 문진으로 평가하였다. PRIMOS(GFM, Germany)를 이용하여 눈 주변의 주름을 분석한 결과 시험제품 사용 8주 후 통계적으로 유의하게 주름이 13 % 감소하였으며, 시험기간 동안 특별한 피부 이상반응은 관찰되지 않았다. 이와 같은 결과로 보아 사매추출물은 인체에 부작용이 없는 주름개선에 효과 있는 화장품으로 개발이 가능할 것으로 사료된다.
Aloe vera 껍질로부터 구내염등 항염증제재를 개발하기 위해 항염증 활성이 있는 분획을 분리, 동정하고, 염증과 관련된 효소활성에 대한 저해효과를 조사하였다. Aloe vera 껍질의 추출물을 용매에 따라 분획하였고, 활성이 우수한 ethylacetate층을 silica gel column chromatography 및 preparative thin layer chromatography를 통해 두 가지 활성물질을 정제하였다. 정제된 두 가지 물질은 UV spectrum과 FT-IR, $^1H-NMR$, 및 Mass spectrum 분석을 통해 aloe-emodin과 barbaloin으로 동정하였다. Aloe vera 분획물의 hyaluronidase 활성저해를 측정한 결과는 aloe-emodin은 $40\;{\mu}g/mL$, barbaloin은 $70\;{\mu}g/mL$의 $IC_{50}$값을 나타내었다. Leucko-cyte elastase 활성 저해를 측정한 결과는 aloe-emodin은 $50\;{\mu}g/mL$, barbaolin은 $60\;{\mu}g/mL$의 $IC_{50}$값을 나타내었다. Collagenase 활성 저해를 측정한 결과는 aloe-emodin은 $40\;{\mu}g/mL$, barbaloin은 $60\;{\mu}g/mL$의 $IC_{50}$값을 나타내었다. 또한 prostaglandin endoperoxide synthase 활성 저해를 측정한 결과는 aloe-emodin은 $40\;{\mu}g/mL$, barbaloin은 $70\;{\mu}g/mL$의 $IC_{50}$값을 나타내었다. 쥐를 이용한 carrageenan족 부종 억제효과는 aloe-emodin의 경우 100mg/kg 투여량으로 52.9%의 억제효과를 나타내었으며, 이 억제효과는 indomethacin의 약 1/10이었으며, aspirin과는 유사한 활성을 보였다. 반면 barbaloin의 경우 100mg/kg의 투여량으로 74.9%의 억제효과를 나타내었으며 이 억제효과는 indomethacin의 약 1/5이었으며, aspirin의 약 1.5배 효과를 나타내어 우수한 항염증 활성을 갖는 것으로 판단된다. 인체치은세포에 대한 독성은 aloe-emodin보다 barbaloin이 적게 나타났으며 이 두 가지 물질은 1 및 $5\;{\mu}g/mL$농도에서는 독성이 전혀 나타나지 않으나 10 및 $20\;{\mu}g/mL$에서는 독성이 있는 것으로 나타났다. 그러나 상용되고 있는chlorhexidin에 비해서는 유의적으로 독성이 적은 것으로 나타났다. 이상의 결과로 보아 aloe-emodin 과 barbaloin은 항우식 및 항염증 활성이 우수할 뿐만 아니라 치은세포의 독성이 비교적 낮아 구강병 예방제재로의 개발 가능성이 우수하다고 사료된다.
본 연구는 화장품 소재로서 금화규(Abelmoschus manihot) 꽃의 미백 활성율 및 항주름 활성을 평가하기 위해 수행하였다. 금화규 꽃은 물과 70% 에탄올을 이용하여 추출하였다. Tyrosinase 억제 활성은 물과 70% 에탄올 추출물 모두 농도 의존적으로 억제 활성이 증가 된다고 평가되었으며, B16F10 세포주에서 생존율에 영향을 미치지 않은 농도인 10, 25, 50, 75, 100 ㎍/mL에서 멜라닌 생합성을 저해하는 것으로 확인되었다. 금화규 꽃의 항주름 효능으로는 collagenase와 elastase의 활성 저해 능력을 측정한 결과 70% 에탄올 추출물이 물 추출물보다 높은 항주름 활성을 보였다. 본 연구 결과를 통하여 금화규 꽃 추출물은 미백 활성과 항주름 활성을 가지는 기능성 화장품 소재로 사용 가능할 것으로 사료된다.
Objectives : The purpose of this study was to investigate the anti-oxidative and anti-atopic dermatitis effects of persimmon leaf extract obtained from Cheongdo-gun, where more than 60% of Korean persimmon is produced. Methods : Anti-oxidative effects of the crude persimmon leaf extract harvested monthly between May and November were determined by in vitro assay using 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) and superoxide dismutase (SOD)-like reaction. Anti-atopic dermatitis effects of the crude persimmon leaf extract were determined by using collagenase type I inhibition assay and by quantitative assays including serum histamine, prostaglandin E metabolite and leukotriene $B_4$ levels in animal model of atopic dermatitis using Balb/c mice. Results : Persimmon leaf extract harvested in May had higher levels of total phenolic compounds (182.24 mg/g) and flavonoids (23.05 mg/g) than the ones of different month extract. Also, persimmon leaf extract harvested in May showed the most effective extract scavenging activities of DPPH free radical ($13.39{\pm}0.21\;{\mu}g/ml$) and superoxide anion radical ($40.52{\pm}2.32\;{\mu}g/ml$), leading to use the persimmon leaf extract harvested in May for the experiments hereafter. Persimmon leaf extract showed $326.71{\pm}4.6\;{\mu}g/ml$ of 50% inhibitory concentration ($IC_{50}$) for collagenase type I which is responsible for the degradation of extracellular matrix. In addition, persimmon leaf extract application group could decrease serum levels of histamine, prostaglandin E metabolite and leukotriene $B_4$ compared to the negative control in animal model of atopic dermatitis. Especially, persimmon leaf extract showed a significantly decreased serum leukotriene $B_4$ level relative to the levels of histamine and prostaglandin E metabolite. Conclusions : Persimmon leaf extract showed anti-oxidative and anti-atopic dermatitis effects in vitro and in vivo. These results suggest that persimmon leaf extract may have immunoregulatory function for alleviating atopic dermatitis by decreasing collagenase activity and mast cell activation.
율피를 기능성 화장품 소재로 활용하기 위하여 주름개선, 미백 및 수렴효과를 검증하였다. 주름개선 효과를 검증하기 위하여 elastase 저해활성과 collagenase 저해활성을 측정하였다. Elastase 저해활성을 측정한 결과 율피 아세톤 추출물 100 ug/ml에서 51.0%의 효과를 나타내었으며, collagenase 저해활성을 측정한 결과 아세톤 및 에탄올 추출물이 50 ug/ml 에서 96.4%, 94.3%의 저해활성을 나타내었다. 미백효과를 확인하기 위하여 tyrosinase 저해활성을 측정한 결과 아세톤 및 에탄올 추출물이 열수 추출물보다 높은 Tyrosinase 저해활성을 나타내었으나 대조군으로 사용한 Vitamin C와 비교시 약 50%의 효과를 나타내었다. 이상의 결과로 미루어 보아 율피 추출물의 주름개선 효과가 높음을 확인할 수 있었고, 주름개선 기능성 화장품 소재로서의 가능성을 확인하였다.
본 연구에서는 초임계 추출방법을 이용한 7가지 한방원료(음양곽, 복분자, 오미자, 구기자, 건지황, 사상자, 토사자)의 유효성분을 추출하였으며, 각 추출물의 항산화 효과, collagen 합성 촉진 효과, collagenase 활성 저해 효과를 비교 평가함으로써 주름개선 기능성 화장품 원료로서의 사용 가능성을 검토하였다. 실험결과 초임계 추출물의 항산화 활성측정시 DPPH 소거 효과, 리놀산 자동산화, superoxide radical, Hydroxyl radical 소거 작용의 경우 복분자 추출물이 뛰어난 항산화 능력을 볼 수 있었으며, 주름개선효과의 경우 초임계 추출물의 콜라겐 합성과 MMP-1 저해 효과는 구기자 추출물이 주름개선에 탁월한 효과를 확인 할 수 있었다. 이를 기초로 하여 초임계 복분자 추출물과 구기자 추출물을 이용시 항산화 활성과 주름개선 효능에 우수한 화장품의 소재로서 이용이 될 수 있다고 사료된다. 이러한 결과를 바탕으로 초임계 추출을 이용한 7가지 한방원료가 가지는 항산화 및 주름개선 효능을 효율적인 배합시 기능성 화장품 소재로 활용될 수 있을 것으로 사료된다. 이 후 실험으로는 melanocye 배양을 통한 직접적인 세포실험을 하여 초임계 한방원료 추출물의 tyrosinase inhibition 활성, 피부의 주름개선 효과를 in vivo 실험상에서 현재 진행 중에 있다.
Objectives: The purpose of this study is to investigate biological effects of Euiiin-tang(Y$\grave{i}$y$\check{i}$r$\acute{e}$n-t$\bar{a}$ng) extracts by extraction methods. Methods: To investigate the effects of anti-oxidative and anti-inflammatory activity, we measured DPPH radical scavenging assay, collagenase inhibition assay and COX-2 inhibition assay. Results: In case of measuring anti-oxidative and anti-inflammatory activities of Euiiin-tang(Y$\grave{i}$y$\check{i}$r$\acute{e}$n-t$\bar{a}$ng) by collagenase and COX-2 inhibition activity, it came out that Euiiin-tang(Y$\grave{i}$y$\check{i}$r$\acute{e}$n-t$\bar{a}$ng) was unable to inhibit collagenase, but was effective to inhibit COX-2. Cytotoxicity analysis of Euiiin-tang(Y$\grave{i}$y$\check{i}$r$\acute{e}$n-t$\bar{a}$ng) extracts by MTT assay principles, there was no cytotoxicity in aqueous and 50% ethanol extracts in any level of concentration. Conclusions: This results suggest that Euiiin-tang(Y$\grave{i}$y$\check{i}$r$\acute{e}$n-t$\bar{a}$ng) extracts have anti-oxidative and anti-inflammatory activities.
본 연구에서 우리는 오미자 종자 분획물의 항산화 활성과 자외선에 유도된 human HaCaT cell에서의 MMPs의 발현억제에 의한 항노화 효과를 조사하고자 하였다. 전자공여능, ABTS 라디칼 소거분석, 그리고 hydrogen peroxide 소거분석 실험을 통해, 오미자 종자의 분획물 중 에틸아세테이트 분획물(SCEAf)이 가장 우수한 라디칼 소거활성을 가졌고, collagenase 저해 활성 실험에서 SCEAf는 $500{\mu}g/ml$의 농도에서 92.3% 이상의 저해효과를 보였음을 확인하였다. SCEAf의 HaCaT cell에 대한 세포 독성을 확인하기 위해 MTT assay를 실시한 결과, SCEAf는 세포에 독성이 없음을 나타낼 뿐 아니라 UVB에 손상된 세포의 생존율을 증가시킴으로써 세포 활성에 도움을 주는 것을 확인할 수 있었다. SCEAf의 HaCaT cell에서의 항노화 효과를 조사하기 위해 UVB $50mJ/cm^2$에 유도된 HaCaT cell에 SCEAf를 처리한 후 MMP-1과 -3의 발현을 Western blotting과 reverse-transcription polymerase chain reaction으로 분석하였다. 그 결과 SCEAf가 MMP-1과 -3의 단백질과 mRNAs의 발현을 농도의존적으로 억제시켰다. 이러한 결과는 오미자 종자 에틸아세테이트 분획물이 자외선의 손상을 받은 피부 각질형성세포에서의 collageanse 활성을 억제하여 노화를 예방하고 증상을 완화시킬 것으로 기대할 수 있다. 이러한 결과를 바탕으로 우리는 오미자 종자가 화장품과 식품 산업에서 항노화 효과가 있는 기능성 원료로서 사용하기 위한 잠재성을 가질 것으로 기대한다.
This study was to investigate the chemical composition and biological activities of Pinus Koraiensis seed. The oil, moisture, ash, crude protein, and carbohydrate contents of P. Koraiensis seed were 58.21, 7.84, 1.56, 14.26, and 18.13%, respectively. The ratios of essential amino acid and nonessential amino acid against total amino acids were 36.6 and 60.3%, respectively. The saponification value of seed oil was 166.8 mg KOH/g oil. Among various fatty acids, the linoleic acid content was the highest, 35.5%, which was approximately 72.6% of polyunsaturated fatty acid. The ethylacetate extract of P. Koraiensis seed had the highest DPPH radical scavenging activity (62.8%) at 7.0 mg/mL, followed by hexane extract, methanol extract, and hot water extract. The maximum nitrite scavenging activity was obtained 59.3% at pH 1.2. The total phenolic concentration of ethylacetate extract was 98.7 mg/g, approximately 4.8 folds higher than that of the hot water extract. The maximum inhibition activities of elastase using ethylacetate extract and collagenase using hexane extract were 58.8 and 40.7%, respectively. These results indicate that P. koraiensis seed extract could be applied to present the possibilities of industrial applications for the developments of cosmetics.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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