Collagenase existed in the internal organs of filefish Novoden modestrus was isolated with ammonium sulfate and was purified by ion exchange column chromatography with DEAE-Sephadex A-50 and gel filtration with Sephadex G-150. The activity of the purified enzyme was increased 92.4 folds than that of the crude one and the yield of the purified one was $10.9\%$. The optimum conditions showing the maximum activity of the crude enzyme to digest insoluble collagen(Type I) were $55^{\circ}C$ and pH 8.0, while those showing the maximum activity of the purified one were $55^{\circ}C$ and pH 7.75. However, the use of the crude enzyme for skinning of filefish was more profitable because the yield was 800 folds higher than that of the purified one and the cost was also able to economy. When hydrolysis for skinning of filefish was conducted with $0.3\%$(w/w) crude collagenase at $50^{\circ}C$ and pH 8.0 for 3hrs, there was some problem to cause a damage on muscle of the fish by heat. To solve such problem for the skinning, the hydrolysis at $18^{\circ}C$ for 4hrs with $0.3\%$ (w/w) crude enzyme after pretreated with 0.5M acetic acid for 10 min provided a good result for skinning of filefish.
Polyphenolic compounds from pomegranate fruit extracts (PFEs) have been reported to possess antiproliferative, pro-apoptotic, anti-inflammatory and anti-invasion effects in prostate and other cancers. However, the mechanisms responsible for the inhibition of cancer invasion remain to be clarified. In the present study, we investigated anti-invasive effects of ellagic acid (EA) in androgen-independent human (PC-3) and rat (PLS10) prostate cancer cell lines in vitro. The results indicated that non-toxic concentrations of EA significantly inhibited the motility and invasion of cells examined in migration and invasion assays. The EA treatment slightly decreased secretion of matrix metalloproteinase (MMP)-2 but not MMP-9 from both cell lines. We further found that EA significantly reduced proteolytic activity of collagenase/gelatinase secreted from the PLS-10 cell line. Collagenase IV activity was also concentration-dependently inhibited by EA. These results demonstrated that EA has an ability to inhibit invasive potential of prostate cancer cells through action on protease activity.
Im, Kyung Hoan;Baek, Seung A;Choi, Jaehyuk;Lee, Tae Soo
Mycobiology
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제47권4호
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pp.494-505
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2019
In this study, the antioxidant, anti-xanthine oxidase, anti-melanogenic and anti-wrinkle effects of methanol (ME) and hot water (HE) extracts from the fruiting bodies of Phellinus vaninii were investigated. The 1,1-diphenyl-2-picryl-hydrazyl free radical scavenging activity of 2.0 mg/mL HE (95.38%) was comparable to that of butylated hydroxytoluene (96.97%), the reference standard. The hydroxyl radical scavenging activities of ME (98.19%) and HE (97.55%) were higher than that of butylated hydroxytoluene (92.66%) at 2.0 mg/mL. Neither ME nor HE was cytotoxic to murine melanoma B16-F10 cells at 25-750 ㎍/mL. Although the xanthine oxidase (XO) inhibitory effects of ME and HE were significantly lower than that of allopurinol, the values were higher than 84 percent. The in vitro tyrosinase inhibitory activities of ME and HE were comparable to kojic acid at 2.0 mg/mL. The cellular tyrosinase and melanin synthetic activities of ME and HE on B16-F10 melanoma cells at 500 ㎍/mL were higher than arbutin, indicating that the inhibitory effects of arbutin on the tyrosinase and melanin synthesis were higher than those of ME and HE. The collagenase inhibitory activity of HE was comparable to EGCG at 2.0 mg/mL, however, the elastase inhibitory activity of ME and HE was lower than EGCG at the concentration tested. The study results demonstrated that the fruiting bodies of Ph. vaninii possessed good antioxidant, anti-xanthine oxidase, cell-free anti-tyrosinase, cellular anti-tyrosinase, anti-collagenase, and moderate anti-elastase activities, which might be used for the development of novel anti-gout, skin-whitening, and skin anti-wrinkle agents.
삼나물 추출물의 항산화 및 생리활성 효과를 검증하여 화장품의 기능성 소재로서의 가능성을 검증하였다. 항산화 실험 결과 삼나물의 ethyl acetate (EtOAc) 분획물 $1,000{\mu}g/mL$ 농도에서 DPPH, ABTS와 같은 전자 공여능 실험에서 가장 높은 활성을 나타났다. 미백효과 측정을 위한 tyrosinase 활성 억제도 삼나물 EtOAc 분획물에서 59.2%의 효과를 나타내었고, elastase 활성은 56% 그리고 collagenase 활성은 90% 저해효과로 항주름 효과가 검증되었다. 따라서 삼나물 추출물 특히 EtOAc 분획물은 우수한 항산화, 항주름 및 미백 생리활성으로 화장품의 새로운 기능성 소재로서 응용이 가능함을 확인하였다.
본 연구는 국내 자생 흰만가닥버섯(Hypsizygus marmoreus)을 시료로 선정하여 80% EtOH 추출 및 EtOAc, BuOH, D.W. 분획믈로 항노화 및 항산화 분석을 통해 복합 기능성 화장품 원료로서의 가능성을 제시하고자 하였다. 동물세포주인 HaCaT cell을 이용하여 시료의 세포 독성을 분석한 결과 시료의 독성은 세포에 거의 영향을 주지 않는 것으로 확인되었다. 시료농도 10%에서 30.41%의 elastase 저해율을 보였고 collagenase 저해활성은 시료농도 1%에서 11.65%의 저해율을 보여 유사 버섯류보다 우수한 항노화 활성을 보였다. 분획물의 총 페놀 함량은 778.4 mg, 흰만가닥버섯 1 g당 2.59 mg으로 천연 항산화제로서의 가능성을 확인 할 수 있었다. 이상의 결과로 흰만가닥버섯 추출물은 항노화 및 항산화 기능의 천연 화장품 소재로 활용 가치가 높을 것으로 판단된다.
노루궁뎅이버섯(Hericium erinaceum) 추출물의 총 페놀성 성분함량은 물 추출물은 $0.349{\pm}0.004mg/sample\;g$이었고, 에탄올 추출물은 $0.258{\pm}0.012mg/sample\;g$을 나타내었다. 노루궁뎅이버섯은 농도 의존적으로 DPPH 라디칼 소거활성이 있는 것으로 나타났으며, positive control로 사용한 BHA 보다 더 높은 항산화력을 나타내었다. 기능성식품활성에서 노루궁뎅이버섯 에탄올추출물은 $50-200{\mu}g/mL$ 페놀성 성분 농도구간에서 농도 의존적으로 xanthine oxidase 저해효과를 나타내었으며, ${\alpha}$-glucosidase 저해 활성은 $50{\mu}g/mL$ 페놀성 성분 농도에서 80% 이상의 높은 저해활성을 나타내었다. 항염증인자로 hyaluronidase 저해활성은 물과 에탄올 추출물 모두 농도의존적으로 저해효과를 나타내었다. 기능성 미용식품활성에서 노루궁뎅이버섯 에탄올추출물의 collagenase 저해활성은 $200{\mu}g/mL$ 페놀성 성분 농도에서 물과 에탄올 추출물에서 각각 65.09%와 58.38%의 높은 저해활성을 나타내었고, tyrosinase 저해활성을 측정한 결과, 물 추출물에서 9.4-58.24%의 농도의존적인 저해효과를 나타내었다. 또한 노루궁뎅이버섯 ethanol 추출물 $50-200{\mu}g/mL$ 페놀성 성분 농도구간에서 18.94-100%의 우수한 모공수축 효과가 확인되었다. 식품부패유발미생물에 대한 항균활성을 측정한 결과, 노루궁뎅이버섯 추출물은 2.5 mg/mL 이상의 농도에서 Staphylococcus aureus, Salmonella enteritidis, Vibrio parahaemolyticus 및 Escherichia coli에 대한 높은 항균활성을 나타내었다. 따라서 노루궁뎅이버섯은 건강기능성 식품 및 미용식품원료로 활용이 가능하며 부패균에 대한 천연방부제로 활용이 가능할 것으로 판단되었다.
야관문 추출물의 피부재생능력을 알아보고, 창상을 유발한 실험동물 모델에서 창상 치유 효과를 검증하고자 6개 군(NO, CO, PC, LCL, LCM, LCH)으로 나누어 5주간 실험하였다. Elastase 저해 활성을 평가한 결과 LCM군에서 항산화제인 BHA보다 2.7%($52.39{\pm}4.52$ vs $53.88{\pm}1.85$) 낮은 수치를 나타내었으며, collagenase 저해 활성을 평가한 결과 LCM군에서 BHA보다 7%($37.68{\pm}2.91$ vs $35.19{\pm}7.80$) 더 높은 활성을 나타내었다. 창상유발 21일에 LCL군, LCM군 및 LCH군의 왼쪽 창상 면적은 CO군과 비교하여 각각 54.2%, 53.5% 및 48.7% 현저한 창상면적 감소를 보였다. 이로서 야관문 추출물은 피부상피조직의 재생과 교원질의 합성을 도와 외과적 창상에 치료 효과가 있는 것으로 판단된다.
To examine the effect of Shiquandabutang on the metastasis of cancer, the following experiments were made. Before the main experiments, the cytotoxicity was measured by putting Shiquandabutang sample in HT1080. Then zymography was made to examine the change of gelatinolytic activity. And western blotting was carried out to examine the changes of Fos, Jun, Ets, the transcription factors of MMP-2, MMP-9, and Erk, JNK on signal transduction pathway to AP-1. Third, in vitro invasion assay with transwells coated by collagen and matrigel was carried out. From the results of the above the following conclusions were obtained. 1. The experimental result about cytotoxicity of Shiquandabutang against HT1080 was as below. The stained cell count after being treated by Shiquandabutang sample $400{\mu}g/ml$ for 24 hours was 0.9% of total cells, and the stained cell count by Shiquandabutang sample $100{\mu}g/ml$ was 1.5% of total cells. Both were near the level of control group which showed 0.6% stained. 2. The result of collagenase assay was as below. In Shiquandabutang sample $400{\mu}g/ml$, MMP-2 was reduced as compared with TPA control group, and the band of MMP-9 induced by TPA disappeared. In Shiquandabutang sample $800{\mu}g/ml$, both bands of MMP-2 and MMP-9 disappeared. 3. The results of western blots for Jun, Fos, Ets, Erk, JNK were as below. In Shiquandabutang sample $200{\mu}g/ml$, Ets was reduced, and Fos were increased. 4. The result of invasion assay was as below. The number of cells which migrated across transwell membrane in Shiquandabutang-treated group was less than that of +TPA control group. From the above results, it was concluded that Shiquandabutang might control the appearing and acting of collagenase not by the MMP-2, -9 promoter but by other way.
Background: The purpose of this study was to investigate whether Sibseonsan (SSS) is an effective antiinflammatory, anti-wrinkling, and whitening agent. Methods: To determine whether SSS had an anti-inflammatory effect, a murine macrophage cell line was used (RAW 264.7) and production of DPPH, NO, TNF-α, and PGE2 were measured. To ascertain potential anti-wrinkle effects of SSS in these cells, collagenase and elastase production were measured. To verify whether SSS had a whitening effect, tyrosinase activity and DOPA staining were performed using a melanoma cell line (B16/F10). Results: There was no significant reduction in survival of SSS-treated RAW 264.7 cells, up to 400 ㎍/mL. Free radical scavenging (23.96 ± 1.85%) was observed in RAW 264.7 cells treated with SSS at a concentration of 400 ㎍/mL. The SSS treatment group (400 ㎍/mL) significantly inhibited NO production compared with the LPS stimulated treatment group. The SSS treatment of macrophage cells appeared to reduce production of TNF-α in a concentration dependent manner. There was a significant reduction in the concentration of PGE2 by about 25% in the SSS treatment (400 ㎍/mL) group (p = 0.05). Compared with the control, the production of collagenase and elastase in B16/F10 cells treated with SSS (400 ㎍/mL) was greater by 26.37% and 45.71%, respectively. The SSS treatment (400 ㎍/mL) group showed a significant reduction by about 17% in tyrosinase production in B16/F10 cells. The SSS treatment group showed little change in DOPA staining. Conclusion: SSS extract may be useful for the treatment and prevention of inflammatory diseases and may have anti-wrinkle and whitening effects. These results may support the use of SSS in clinical practice.
본 연구에서 층꽃나무(Caryopteris incana Miq.)는 항산화, 피부미백 및 주름개선 활성을 측정하는 데에 사용되었다. 층꽃나무의 생리활성은 고형분 함량보다 첨가된 total phenolic compounds의 농도에 의해 영향을 받는 것으로 확인되어 이후 모든 실험은 층꽃나무로부터 추출한 물과 80 % ethanol 추출물의 total phenolic compounds 함량을 조절하여 실시하였다. 층꽃나무 추출물의 항산화 활성은 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH), 2,2-azinobis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid (ABTS), antioxidant protection factor (PF), Thiobarbituric acid reactive substances (TBARs)를 측정하였다. $200{\mu}g/mL$의 농도에서 물과 ethanol 추출물로 DPPH free radical 소거능을 측정한 결과 각각 84, 92 %의 활성을 나타내었고, ABTS radical 소거능은 물과 ethanol 추출물 둘 다 약 99 %의 활성을 나타내었다. PF를 측정한 결과 물과 ethanol 추출물이 각각 1.56, 1.67 PF 값을 나타내었고, TBARs는 각각 62, 82 %의 활성을 나타내었다. 주름개선 및 피부미백 활성을 측정하였을 때, $200{\mu}g/mL$의 농도에서 80 % ethanol 추출물이 물 추출물보다 눈에 띄게 높은 효과를 나타내었다. 주름개선과 연관된 elastase와 collagenase 저해활성은 ethanol 추출물에서 각각 58, 89 %로 측정되었다. 피부미백과 연관된 tyrosinase의 저해활성은 ethanol 추출물에서 13 %로 측정되었고, 수렴효과는 50 %로 측정되었다. 이러한 결과로 보아, 층꽃나무 추출물은 항산화 활성, 주름개선 및 미백효과가 우수하므로 기능성 화장품 원료의 새로운 자원이 될 것으로 기대되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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