Sprague-Dawley male rats (150 g) were chronically treated with 5 v/v % ethanol admixed with nutritionally complete liquid diet and fed ad libitum for 3 weeks. Controls were pair fed with the isocaloric sucrose liquid diet. One half of each group was exposed to cold stress at $4^{\circ}C$ either for 24 h (for determination of mRNA by in situ hybridization) or for 48 h (for determination of enzyme activity). Chronic ethanol treatment (ethanol) did not affect tyrosine hydroxylase (TH) mRNA level in locus coeruleus (LC) of brain and adrenal medulla (AM) compared to controls. Cold stress showed strong increase of TH mRNA level in LC and AM compared to controls. Pretreated ethanol reduced the increased TH mRNA level by cold stress in LC and AM. Ethanol did not affect TH activity in LC and adrenal glands (adrenals). Cold stress increased TH activity in LC but not in adrenals. Pretreated ethanol did not reduce the increased TH activity by cold stress in LC but this result was not shown in adrenals. It is suggested that ethanol does not affect the message level and enzyme protein level for TH in LC and AM in normal rat. It is also hypothesized that pretreated ethanol reduces the magnitude of acute cold stress response, that is induction of TH mRNA in LC and AM, and does not reduce the increased TH enzyme protein that is also acute cold stress response in LC.
Bradyrhizobium japonicum is a soil bacterium with a unique ability to infect the roots of leguminous plants and establish a nitrogen-fixing symbiosis, which has been used as a microbial manure. In this study, we examined the stress response after pretreatment of cells with cold temperature. When pre-treated with cold temperature ($4^{\circ}C$) for 16 hr, B. japonicum increased the viability in subsequent stress-conditions such as alcohol, $H_2O_2$, heat, and dehydration. For cold adpatation, cultured B. japonicum was exposed to $4^{\circ}C$. Upon subsequent exposure to various conditions, the number of adapted cells pretreated by cold adaptation was 10-1000 fold higher than that of non-adaptated ones. It appeared de novo protein synthesis occurred during adaptation, because a protein synthesis inhibitor, chloramphenicol abolished the increased stress tolerance. By using a degenerate PCR primer set, a csp homolog was amplified from B. japonicum genome and sequenced. The deduced partial amino acid sequence of the putative Csp (Cold shock protein) shares a significant similarity with known Csp proteins of other bacteria.
It is noted that Dioscorea quinqueloba is a medicinal herb that is widely used to treat cardiovascular disease and is assessed as useful to treat other various medical conditions. The immunopotentiating effects of the protein extract (DQP-1) from Dioscorea quinqueloba were thus formally investigated in vivo under incident of cold stress. In this case study, the spleen and thymus weight in mice was shown to have decreased after a measured exposure to cold stress, while the adrenal gland weight in the mice was shown to have increased. The systematic oral administration of DQP-1 significantly recovered the weight loss of the spleen and suppressed the adrenal gland hypertrophy during the association with cold stress. Additionally, the DQP-1 also restored the ascorbic acid level in the adrenal gland reduced after cold stress. The cold stress exposure lowered the percentage of $CD4^+$ and $CD8^+$ cells in the mouse thymus as determined by the flow cytometric analysis, as well as the levels of some serum immunological cytokines(interleukin-2, interleukin-12, and interferon-${\gamma}$) in the studied mice. The resulting identified weakened immunity caused by cold stress was also recovered by a treatment with DQP-1. The DQP-1 significantly suppressed the formation of serum enzymes of alanine aminotransferase, aspartate aminotransferase, and lactate dehydrogenase, which were systematically elevated during the cold stress episode. These results indicate that DQP-1 can improve immunity in mice that are characteristically weakened under stress.
Cold stress is one of the most vulnerable environmental stresses that affect plant growth and crop yields. With the recent advancements in genetic approaches using Arabidopsis and other model systems, genes involved in cold-stress response have been identified and the key cold signaling factors have been characterized. Exposure to low-temperature stress triggers the activation of a set of genes known as cold regulatory (COR) genes. This activation process plays a crucial role in enhancing the resistance of plants to cold and freezing stress. The inducer of the C-repeatbinding factor (CBF) expression 1-CBF module (ICE1-CBF module) is a key cold signaling pathway regulator that enhances the expression of downstream COR genes; however, this signaling module in Panax ginseng remains elusive. Here, we identified cold-signaling-related genes, PgCBF1, PgCBF3, and PgICE1 and conducted functional genomic analysis with a heterologous system. We confirmed that the overexpression of cold- PgCBF3 in the cbf1/2/3 triple Arabidopsis mutant compensated for the cold stress-induced deficiency of COR15A and salt-stress tolerance. In addition, nuclearlocalized PgICE1 has evolutionarily conserved phosphorylation sites that are modulated by brassinsteroid insensitive 2 (PgBIN2) and sucrose non-fermenting 1 (SNF1)-related protein kinase 3 (PgSnRK3), with which it physically interacted in a yeast two-hybrid assay. Overall, our data reveal that the regulators identified in our study, PgICE1 and PgCBFs, are evolutionarily conserved in the P. ginseng genome and are functionally involved in cold and abiotic stress responses.
Dehydrins (LEA Dll proteins) are one of the typical families of plant proteins that accumulate in response to dehydration, cold stress, abscisic acid, or during seed maturation. A 1.3-kb cDNA was cloned from a cDNA expression library of 5-day-old germinating maize scutellums under drought stress. The deduced protein sequence indicated a dehydrin gene encoding SK$_3$ LEA protein typically expressed during cold acclimation, but not by drought stress in barley and wheat. Thus, it was named maize DEHYDRIN2 (ZmDhn2). It accumulates rapidly and highly in drought-stressed scutellum and leaf tissues at any stage, but not under cold stress. ZmDhn2 gene was transformed into Arabidopsis thaliana for functional analysis under drought condition. From electrolyte leakage test, no significant difference showed between wild type and transformants under normal growth condition, but the leakage level of electrolyte in wild type plants was about 3 times as high as that in the transformed plants under drought stress. It suggests that ZmDHN2 playa role in increasing drought tolerance.
Objectives : The aim of this study was to evaluate the efficacy of Hwangnyeonhaedok-tang (HH) and Geongangbuja-tang (GB) on the plasma hormone level in mice exposed to cold stress. HH and GB are the representative prescriptions of cold and hot property, respectively. Methods : We established cold condition by confining ICR mice to a $4^{\circ}C$ cage for 24 hours, ICR mice were given a HH (100, 300, 1000 mg/kg) or GB (100, 300, 1000 mg/kg) extract orally twice a day for three consecutive days. From the second day, they were given cold stress ($4^{\circ}C$) for twenty four hours. To measure the plasma corticosterone, insulin, thyroxine, epinephrine and norepinephrine levels of mice, their blood samples were collected from cardiac puncture, immediately centrifuged at $4^{\circ}C$. The protein level of HSP70 and JNK was examined using western blot analysis in cortex and hypothalamus. Results : Oral administration of GB more significantly reduced plasma corticosterone level raised by cold stress than HH. Gardeniae Fructus (CJ), the constituent of HH, significantly increased the thyroxine level. Western blot analysis showed that cold stress-induced Heat shock protein 70 (HSP70) expression was increased by HH and GB, HH decreased JNK expression and GB increased JNK expression dose-depently in hypothalamus. Scutellariae Radix (HG), Zingiberis Rhizoma (GG) and Aconiti Tuber (BJ) decreased HSP70 in hypothalamus and GG, BJ decreased HSP70 in cortex as well. Conclusions : These results suggest Geongangbuja-tang (GB) is more effective for ameliorating the stress response caused by cold stress.
Glutathione and ascorbic acid have been shown to fulfill many essential functions in animal and plant growth, development, defence and protection against oxidative damage. Effects of glutathione and ascorbic acid were examined in transgenic N. tabacum cells producing hGM-CSF to determine the effects of the vitamins on growth and cell viability. In lag phase, cell viability was preserved by glutathione and ascorbic acid. Therefore, recombinant protein productivity was increased. The purpose of present study is to investigate the role of antioxidants in cold stress-induced apoptosis in plant suspension cells. Cold stress lowered cell viability and increased total genomic DNA fragmentation. Supplementing the cell cultures with glutathione and ascorbic acid inhibited cold stress-induced decrease in cell viability and increase in total genomic DNA fragmentation.
Proceedings of the Korean Society of Applied Pharmacology
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1994.04a
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pp.259-259
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1994
Protein kinase C (PKC) participates in many cellular signal transduction. Previously we found that PKC activity of whole rat brain was altered after an exposure to cold temperature of 4 $^{\circ}C$ (Lee and Choi, Exp. Neurobiol., 2, 6, 1993). In this time PKC activity in each region of rat brain was investigated in order to know each regions is affected mostly by the stress.
The ecophysiological changes occurring upon cold stress were studied using cold tolerant transgenic and wild-type tobacco plants. In a previous study, cold tolerance in tobacco was induced by the introduction of a gene encoding the zinc finger transcription factor, PIF1. Gas-exchange measurements including net photosynthesis and stomatal conductance were performed prior to, in the middle of, and after a cold-stress treatment of $1{\pm}2^{\circ}C$ for 96 h in each of the four seasons. In both transgenic and wild-type plants, gas-exchange parameters were severely decreased in the middle of the cold treatment, but had recovered after 2-3 h of adaptation in a greenhouse. Most t-test comparisons on gas-exchange measurements between the two plant types did not show statistical significance. Wild-type plants had slightly more water-soaked damage on the leaves than the transgenic plants. A light-response curve did not show any differences between the two plant types. However, the curve for assimilation-internal $CO_2$ in wild-type plants showed a much higher slope than that of the PIF1 transgenic plants. This means that the wild-type plant is more capable of regenerating Ribulose-1,5-bisphosphate carboxylase/oxygenase (Rubisco) and has greater electron transport capacity. In conclusion, cold-resistant transgenic tobacco plants demonstrated a better recovery of net photosynthesis and stomatal conductance after cold-stress treatment compared to wild-type plants, but the ecophysiological recoveries of the transgenic plants were not statistically significant.
Proceedings of the Plant Resources Society of Korea Conference
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2018.10a
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pp.100-100
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2018
Zoysia japonica Steud.(Zj) is a typical warm-season Korean lawn grass, which is used in many places such as river banks, roadside and soccer fields in Korea. Recently, it has also been used in school yards and the Saemangeum reclaimed land to reduce water pollution. Although the cultivated area of turfgrass is steadily increasing worldwide, it grows fast requiring frequent mowing and is difficult to grow in shady areas and the cold region. Therefore this study aims searching for useful gene(s) to develop abiotic stress tolerant and dwarf zoysiagrass. We isolated Ycf4 gene based on the sequence from Oryza sativa Japonica through RT-PCR and RACE PCR. Ultimately, open reading frame (ORF) of ZjYcf4 was 558bp long, encoding a protein of 186 amino acid residues. NCBI blast results showed that the ZjYcf4 protein is evolutionarily closely related to Ycf4 protein from Zoysia macrantha and Setaria italica (100% and 98%, respectively). To determine whether ZjYcf4 was involved in environmental stress in wild-type zoysiagrass, expression patterns of the gene were analyzed by real-time PCR under salt, cold and dark conditions. They were analyzed after each stress treatment for 3 hours. In salt and cold stresses, the expression was higher compared to control (3-fold and 1.5-fold, respectively), although there was a 1.6-fold decrease in expression under dark stress treatment. As reported previously, we suggest that ZjYcf4 gene affects abiotic stress such as salt, cold and dark.
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