In this paper a new cell sizing method is proposed. The new method calculates cell size at a point using given size control elements directly without the aid of background grid as other cell sizing algorithms do. The calculation method and related definitions are described in detail, and typical cell sizing results are given.
The outer dense fiber 2 (ODF2) protein is an important component of sperm tail outer dense fiber and localizes at the centrosome. It has been reported that the RO072 ES cell derived homozygote knock out of ODF2 results in an embryonic lethal phenotype, and XL169 ES cell derived heterozygote knock out causes severe defects in sperm tail development. The ODF2s splicing variant, Cenexin1, possesses a C-terminal extension, and the phosphorylation of serine 796 residue in an extended C-terminal is responsible for Plk1 binding. Cenexin1 assembles ninein and causes ciliogenesis in early stages of the cell cycle in a Plk1-independent manner. Alternatively, in the late stages of the cell cycle, G2/M phase, Cenexin1 binds to Plk1 and results in proper mitotic progression. In this study, to identify the in vivo function of Plk1 binding to phosphorylated Cenexin1 S796 residue, and to understand the in vivo functional differences between ODF2 and Cenexin1, we generated ODF2/Cenexin1 S796A/Cenexin1 WT expressing transgenic mice in a RO072 ES cell derived $ODF2^{+/-}$ knock out background. We observed a severe defect of sperm tail development by ectopic expression of Cenexin1 S796A mutant and no phenotypic differences between the ectopic expression of ODF2/Cenexin1 WT in $ODF2^{+/-}$ background and in normal wild type mice.
Human cyclin D3 gene (CCND3) located on 6p21.1 is important for the regulation of the G1-S phase transition of the cell cycle by modulating the activity of the cyclin-dependent kinases Cdk4 and Cdk6. Because little is known about the effect of cyclin D3 in various human cancers, we evaluated the intricate relationship between expression of cyclin D3 and the process of HCC development using immunohis tochemistry and TUNEL assay on 43 paraffin embedded tissues. Cyclin D3 immunoreactivity was more frequently observed in the tumors with high histologic grade and the tumors with metastasis, and more frequently expressed in HCCs with cirrhotic background and gain of 6p21.1 when compared with those with non-neoplastic tissue. Apoptotic cells were more common in tumor with cirrhotic background, amplification of 6p21.1 and expression of cyclin D3 when compared with HCCs with lower level of cyclin D3 expression. Also, we observed that some of the cyclin D3 positive cell and apoptotic cell were co-localized. From these results, it is suggested that over-expression of cyclin D3 may contribute to more rapid cell turn-over in the background of HCC, and balance between proliferation and apoptosis is a role in the progression of HCC with cirrhotic background.
In order to elucidate the properties of the background current whole cell patch clamp studies were performed in rabbit ventricular cells. Ramp pulses of ${\pm}80\;mV$ from holding potential of 40 mV(or 20 mV) at the speed of 0.8 V/sec were given every 30 sec(or 10 sec) and current-voltage diagrams(I-V curve) were obtained. For the activation of the background current isoprenaline, adenosine 3',5'-cyclic monophosphate(dBcAMP), guanosine 3',5'-cyclic monophosphate(cGMP), and $N^6$-2'-o-dibutyryladenosine 3',5'-cyclic monophosphate(dBcAMP) were applied after all known current systems were blocked with 2mM Ba, 1 mM Cd ,5 mM Ni, 10 ${\mu}M$ diltiazem, 10 ${\mu}m$ ouabain, and 20 mM tetraethylammonium(TEA). The conductance of background current in control was $0.65{\pm}0.69$ nS at 0 mV, its I-V curves was almost linear and reversed near 50 mV. When there was no taurine in pipette solution, isoprenaline hardly activated the background current but when taurine existed in pipette solution, isoprenaline activated the larger background current. Cyclic AMP or cyclic GMP alone had little effect on the activation of the background current, while cGMP potentiated cGMP effect. When the background current was activated with cGMP and cAMP, isoprenaline could not further increased the background current. The background current activated by isoprenaline depended on extracellular $Cl^-$ concentration and its reversal potential was shifted according to chloride equilibrium potential. The change of extracellular $Na+$ concentration had little effect on reversal potential of the background current activated by isoprenaline.
We report a case of Warthin's tumor of the parotid gland in a 53 year old man, which is incorrectly diagnosed as squamous cell carcinoma. Fine needle aspiration cytology(FNAC) smear obtained from the right parotid gland revealed scattered epithelial cell clusters or nests in a diffuse inflammatory and necrotic background. Some epithelial cells had squamoid appearance showing variable sized bizarre shaped nuclei. They had abundant of dense eosinophilic keratinized cytoplasm. Occasionally, parakeratotic cells were also present. These cytologic findings with significant atypia and necrotic background made diagnosis as squamous cell carcinoma. But, the resection specimen from this patient showed classic Warthin's tumor in addition to abundant areas of inflammation and squamous metaplasia. Metaplastic or infarcted Warthin's tumor in the salivary gland may be confused with false positive diagnosis of malignancy on FNAC. Therefore, cytopathologist should have adequate awareness of potential of erroneous diagnosis in FNAC of Warthin's tumor.
Background: The Hypothalamo-Pituitary-Adrenal (HPA) axis is an important regulator for the body's stress response. As a primary stress responsive system, HPA-axis secretes various neurotransmitters, hormones, and cytokines, which regulates the immune system. Natural killer (NK) cell which is plays an important role in the innate immune response, is specially decreased their numbers and loose cytolytic activity in response to stress. However, the effect of HPA-axis secreted proteins on NK cell activity has not been defined. Herein, we studied the effect of adrenal secreted adiponectin on NK cell cytotoxicity. Adiponectin which is well-known metabolic control protein, plays important roles in various diseases, including hypertension, cardiovascular diseases, inflammatory disorders, and cancer. Methods: Signal sequence trap was used to find stress novel secretory protein from HP A-axis. Selected adiponectin was treated mouse mature primary NK cells and then examined the effect of adiponectin to NK cell cytotoxicity and cytokine expression level. Results: We found that adiponectin which is secreted from adrenal gland, suppress IL-2 induced NK cell cytotoxicity. And also investigated cytolytic cytokines are suppressed by adiponectin. Conclusion: These data suggest that adiponectin inhibites NK cell cytotoxicity via suppression of cytotoxicity related target gene.
Background: Coating a culture plate with molecules that aid in cell adhesion is a technique widely used to produce animal cell cultures. Extracellular matrix (ECM) is known for its efficiency in promoting adhesion, survival, and proliferation of adherent cells. Gelatin, a cost-effective type of ECM, is widely used in animal cell cultures including feeder-free embryonic stem (ES) cells. However, the optimal concentration of gelatin is a point of debate among researchers, with no studies having established the optimal gelatin concentration. Methods: In this study, we coated plastic plates with gelatin in a concentration-dependent manner and assessed Young's modulus using atomic force microscopy (AFM) to investigate the microstructure of the surface of each plastic plate. The adhesion, proliferation, and differentiation of the ESCs were compared and analyzed revealing differences in surface microstructure dependent on coating concentration. Results: According to AFM analysis, there was a clear difference in the microstructure of the surface according to the presence or absence of the gelatin coating, and it was confirmed that there was no difference at a concentration of 0.5% or more. ES cell also confirmed the difference in cell adhesion, proliferation, and differentiation according to the presence or absence of gelatin coating, and also it showed no difference over the concentration of 0.5%. Conclusions: The optimum gelatin-coating for the maintenance and differentiation of ES cells is 0.5%, and the gelatin concentration-mediated microenvironment and ES cell signaling are closely correlated.
Background: B cell subset has been divided into B-1 cells and B-2 cells. B-1 cells are found most prominently in the peritoneal cavity, as well as constituting a small pro portion of splenic B cells and they are larger and less dense than B-2 cells in morphology. This study was designed to compare the differences in their proliferation and differentiation between B-1 and B-2 cell. Methods: We obtained sorted B-1 cells from peritoneal fluid and B-2 cells from spleens of mice. Secreted IgM was measured by enzyme-linked immunosorbent assay. Entering of S phase in response to LPS-stimuli was measured by proliferative assay. Cell cycle analysis by propidium iodide was performed. p21 expression was assessed by real time PCR. Results: Cell proliferation and cell cycle progression in B-1 and B-2 cells, which did not occur in the absence of LPS, required LPS stimulation. After LPS stimulation, B-1 and B-2 cells were shifted to Sand G2/M phases. p21 expression by resting B-1 cells was higher than that of resting B-2 cells. Conclusion: B-1 cells differ from conventional B-2 cells in proliferation, differentiation and cell cycle.
Background: Corticotropin-Releasing Hormone (CRH), an important regulator of stress response, has a potent immunoregulatory effect with the ability to promote the growth of various cancer through CRH receptor type 1 under stress. Although the metastasized cancers through cell migration are more aggressive than the primary cancers, little is known about the effect of CRH on cell migration. Gastric cancer is prone to metastasize to other tissues and it is reported that gastric cancer is response to various stresses such as oxidative stress. Herein, we studied the relationship between CRH and gastric cancer cell migration. Methods: We used gastric cancer cell line, MKN-28 and tested the CRH receptor type 1 expression on MKN-28 by RT-PCR. To examine the change in the ability of migration by CRH in MKN-28, cells were incubated with CRH and then migration ability was measured using a cell migration assay. Results: We confirmed that CRH receptor type 1 was expressed in MKN-28 and HaCaT cells. The migration ability of MKN-28 cells was increased by CRH in a time-, dose- dependent manner. Conclusion: These data suggest that CRH increases migration ability in gastric cancer cell line and that CRH may be a critical regulator in the metastasis of gastric cancer cell.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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