Resistance to induction of apoptosis is a major obstacle for bladder cancer treatment. Bcl-2 is thought to be involved in anti-apoptotic signaling. In this study, we investigated the effect of Bcl-2 overexpression on apoptotic resistance and intracellular reactive oxygen species (ROS) generation in bladder cancer cells. A stable Bcl-2 overexpression cell line, BIU87-Bcl-2, was constructed from human bladder cancer cell line BIU87 by transfecting recombinant Bcl-2 [pcDNA3.1(+)-Bcl-2]. The sensitivity of transfected cells to adriamycin (ADR) was assessed by MTT assay. Apoptosis was examined by flow cytometry and acridine orange fluorescence staining. Intracellular ROS was determined using flow cytometry, and the activities of superoxide dismutase (SOD) and catalase (CAT) were also investigated by the xanthinoxidase and visible radiation methods using SOD and CAT detection kits. The susceptibility of BIU87-Bcl-2 cells to ADR treatment was significantly decreased as compared with control BIU87 cells. Enhanced expression of Bcl-2 inhibited intracellular ROS generation following ADR treatment. Moreover, the suppression of SOD and CAT activity induced by ADR treatment was blocked in the BIU87-Bcl-2 case but not in their parental cells. The overexpression of Bcl-2 renders human bladder cancer cells resistant to ADR-induced apoptosis and ROS might act as an important secondary messenger in this process.
Leaves of two-week old seedlings of tomato (Lycopersicon esculentum) were treated with various concentrations (0∼100 M) of $CdCl_2$ for up to 9 days and subsequent growth of seedlings, symptoms of oxidative stress and isozyme activities of antioxidant enzymes including superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT), ascorbate peroxidase (APX) and peroxidase (POX) were investigated. Compared with the non-treated control, Cd exposure decreased biomass but increased Cd accumulation, hydrogen peroxide production and lipid peroxidation as malondialdehyde (MDA) formation in leaves and roots. Further studies on the developmental changes of isozyme activities showed that Fe-SOD, Cu/Zn-SOD and one of three APX isozymes decreased and CAT and one of four POX isozymes increased in leaves, whereas Fe-SOD, one of three POX isozymes and two of four APX isozymes decreased and CAT increased in roots, showing different expression of isozymes in leaves and roots with Cd exposure level and time. Based on our results, we suggest that the reduction of seedling growth by Cd exposure is the oxidative stress resulting from the over production of $H_2O_2$ and the insufficient activities of antioxidant enzymes particularly involved in the scavenging of $H_2O_2$. Further, the decreased activities of SOD and APX isozymes of chloroplast origin, the increased activities of CAT and POX and high $H_2O_2$ contents with Cd exposure might indicate that Cd-induced oxidative stress starts outside chloroplast.
Skin is constantly exposed to air, solar radiation, ozone and other air pollutants formulating free radicals. The reactive oxygen species(ROS), formed under these conditions, are associated with skin cancers, cutaneous photoaging, and cutaneous inflammatory disorders. In this study, we sought to establish an animal model for UVB-induced skin alteration using BALB/c mice. The level of UVB irradiation used in this model was within physiological dose. BALB/c mice were exposed to a single dose of UVB ($200mJ/cm^2$ and were sacrificed at 3, 6, 24, and 48 hours following the irradiation. The effect of a single exposure to UVB irradiation on skin catalase(CAT), superoxide dismutase(SOD), and glutathione peroxidase(GPx) activities were examined. Significant decrease in the activity of all enzymes were observed at 6 hours after irradiation(p<.05). The activity of CAT decreased more sharply than those of SOD and GPx, and then remained depressed until 48 hours after UVB irradiation, whereas the activity of GPx recovered to basal level at 48 h after UVB irradiation. Our results indicate that BALB/c mouse could be an adequate animal model of UVB irradiation experiment. These results will also provide fundamental knowledge for the effective nursing strategies in reducing UV-induced skin disorders.
Streptozotocin(STZ)을 45mg/kg, body weight(b.w)의 용량으로 흰쥐의 미정맥에 투여 한 후 유발된 당뇨 흰쥐에게 우엉 뿌리 에탄올 추출물을 1일 1회 7일간 1,000mg/kg,bw의 용량으로 투여하고 항산화작용에 관여하는 glutathione-s-transferase(GST), catalase(CAT), glutathioneperoxidase (GSH-Px)활성과 malondialdehyde(MDA)와 glutathione(GSH) 함량을 측정한 결과 우엉 뿌리 에탄올 추추물 투여군에서 MDA 함량, CAT와 GSH-Px 활성 등의 유의적인 감소(p<0.05)를, GSH 함량과 GST 활성은 유의적인 증가(p<0.05)를 나타내었다. 이와 같이 우엉 뿌리 에탄올 추출물이 항산화 개선효과를 갖는 유효성분을 함유하고 있음을 알 수 있었다.
The purpose of this study was to investigate the effects of Houttuynia cordata Thunb and Oriental Herb Mixture Extract (HCTM) through anti-oxidation against the hepatotoxicity-inducing lipopolysaccharide (LPS) in HCTM and LPS-treated rats. HCTM of 100 mg/kg concentration was intraperitoneally administered into rats at dose of 1.5 ml/kg for 20 days. On the day 21, 1.5 ml/kg of LPS was injected 5 hours before anesthetization. The activity of superoxide dismutase (SOD) was measured in mitochondrial fraction and malondialdehyde (MDA), catalase (CAT), glutathione peroxidase (GPx) were measured in liver homogenate. LPS-treatment markedly increased the levels of MDA and significantly decreased those of SOD, CAT and GPx. But HCTM pretreatment significantly increased those of SOD, CAT and GPx by 86.9%, 57.2% and 72.7% respectively. Moreover HCTM pretreatment decreased the levels of MDA. These results showed the HCTM had the effects against the hepatotoxicity-inducing LPS in the anti-oxidation. This suggested that HCTM could be used for functional beverage.
본 연구에서는 한방에서 약용으로 사용하고 있는 미나리과에 속하는 천궁을 에탄올 추출을 사용하여 고지방식 이에 의해 유발된 고지혈 및 비만 흰쥐에서의 항산화 활성과 간 보호 효과에 미치는 영향을 관찰하였다. 고지방 식이에 의해 유도된 고지혈 및 비만 흰쥐에 있어서의 간 손상에 대한 천궁 추출물의 보호효과를 연구한 결과 고지방 식이를 먹인 흰쥐의 혈청 aspartate aminotransferase (AST)와 alanine aminotransferase (ALT)는 증가 되었고, 간조직의 균질액에서 과산화지질의 최종 산물인 MDA도 높게 나타났다. 이와 반대로 천궁 추출물을 처치한 군에서는 간 기능 지표효소의 증가를 억제시켰다. 간조직의 항산화 효소인 SOD, catalase와 GPx의 활성은 고지방식이 의해 감소되었고, 천궁 추출물의 투여로 인해 효소 활성도 가증가됨을 볼 수 있었다. 본 연구를 통해 천연물을 이용한 기반연구로서 향후 천궁의 지질개선 효과와 항산화 효과에 대한 분자생물학적 조직병리학적 후속연구가 필요하다고 사료되며 이 연구의 결과를 바탕으로 천궁의 항산화 식품이나 지질개선 기능성 식품소재로의 활용이 기대되어진다.
The fruits of Cornus officinalis have been used in traditional Oriental medicine for treatment of inner ear diseases, such as tinnitus and hearing loss. In the present study, we showed that the ursolic acid obtained from Corni fructus protected HEI-OC1 auditory cells from hydrogen peroxide cytotoxicity in a dose-dependent fashion. In addition, to investigate the protection mechanism of ursolic acid on hydrogen peroxide cytotoxicity toward HEI-OC1, we measured the effects of ursolic acid on lipid peroxidation and activities of superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT), and glutathione peroxidase (GPX) in hydrogen peroxide treated cells. Ursolic acid (0.05 - 2 ${\mu}g/ml$) had protective effect against the hydrogen peroxide-induced HEI-OC1 cell damage and reduced lipid peroxidation in a dose-dependent manner. Pre-treatment with ursolic acid significantly attenuated the decrease in activities of CAT and GPX, but SOD activity was not affected by the ursolic acid or hydrogen peroxide. These results indicate that ursolic acid protects hydrogen peroxide-induced HEI-OC1 cell damage through inhibition of lipid peroxidation and induce the antioxidant enzymes CAT and GPX.
Cadmium is a strong toxic heavy metal which presents in paints and liquid wastes and causes oxidative stress in fish. On the other hand, lead is widely used for different purposes, e.g. lead pipes, it targets vital organs such as liver and kidney causing biochemical alterations. The present study evaluates the effects of 60 days exposure to Cd and Pb either single or combined together in African catfish. Sixty-four fishes were divided into 3 groups and exposed to $CdCl_2$ (7.02 mg/L) or $PbCl_2$ (69.3 mg/L) or a combination of them along with control group. Activities of acid phosphatase (ACP), lactate dehydrogenase (LDH) and glucose-6-phosphate dehydrogenase (G-6-PDH) were estimated. Moreover, gill, liver and kidney were assayed for activities of superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT) and levels of glutathione (GSH) and malondialdehyde (MDA). Individual exposure showed that both Cd and Pb significantly decreased LDH activity and SOD activity in the kidney. Pb significantly increased G-6-PDH activity and decreased GSH level in the gill. CAT activity in liver and kidney elevated significantly on Cd exposure while lead caused a significant depletion in the liver and significant elevation in the kidney. Both Cd and Pb significantly increased MDA levels in liver and kidney while Pb increased its level in gills. The combined exposure resulted in normalization of LDH, G-6-PDH activity, and CAT activity in liver and kidney as well as GSH level in both tissues and MDA in gill and kidney. The combination increased SOD activity and MDA level in liver and decreased SOD activity in kidney and GSH level in gills. In conclusion, the antioxidant system of African catfish was adversely affected by prolonged exposure to Cd and Pb. The combined exposure caused less damage than individual exposure and returned most parameters to those of controls.
본 연구는 돼지난자의 체외성숙시 난구세포와 cat-alase의 영향을 검토하고저 수행되었다. 체외성숙율은 catalase의 첨가유무에 관계없이 유의적인 차이는 인정되지 않았으나, 난구세포가 부착된 난자가 제거된 난자에 비해 유의적으로 높은 성숙율을 나타냈다 (P<0.05). 또한 48시간 (57%) 동안 난구세포가 부착된 경우 단지 처음 24시간 (42%) 동안만 난구세포가 부착된 경우에 비하여 유의적으로 높은 성숙율을 나타냈다 (P<0.05). 한편, 난구세포가 부착 또는 제거된 난자의 성숙시 처음 24시간 동안보다는 후반기 24시간 동안 catalase를 첨가한 경우 유의적으로 높은 성숙율을 나타냈으며 (P<0.05), 난구세포를 제거한 경우 성숙배양 24시간에서 M-II기로 성숙된 난자가 관찰되었다. 그러나 난구세포가 부착된 난자를 72시간 성숙배양 했을 때, catalase 무첨가 (65%)보다는 첨가시(79%) 유의적으로 높은 성숙율을 나타냈다. 본 연구의 결과로부터 난구세포는 돼지난자의 체외성숙시 필수적인 것으로 인정되며, catalase는 첨가시기에 따라 난자의 성숙에 효과적으로 작용하였으며, 체외성숙시 난자의 노화를 방지할 수 가능성이 있는 것으로 추측된다.
Background: To assess the antioxidant effects of gamma-oryzanol on human prostate cancer cells. Materials and Methods: Cytotoxic activity of gamma-oryzanol on human DU145 and PC3 prostate cancer cells was determined by proliferation assay using 3-(4, 5-dimethylthiazol, 2-yl)-2, 5-diphenyl tetrazolium bromide (MTT) reagent. mRNA levels of genes involved in the intracellular antioxidant system, superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT), glutathione peroxidase (GPX) and glutathione reductase (GSR) were determined by reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR). Cancer cell lysates were used to measure lipid peroxidation using thiobarbituric acid reactive substance (TBARS). Glutathione contents of the cell lysates were estimated by the reaction between sulfhydryl group of 5, 5'-dithio (bis) nitrobenzoic acid (DTNB) to produce a yellow-color of 5-thio-2-nitrobenzoic acid using colorimetric assay. Catalase activity was also analysed by examining peroxidative function. Protein concentration was estimated by Bradford's assay. Results: All concentrations of gamma-oryzanol, 0.1-2.0mg/ml, significantly inhibited cell growth in a dose- and time-dependent fashion in both prostate cancer cell lines, DU145 and PC3. Gene expression of catalase in DU145 and PC3 exposed to gamma-orizanol at 0.5mg/ml for 14 days was down regulated, while mRNA of GPX was also down regulated in PC3. The MDA and glutathione levels including catalase activity in the cell lysates of DU145 and PC3 treated with gamma-oryzanol 0.1 and 0.5mg/ml were generally decreased. Conclusions: This study highlighted effects of gamma-oryzanol via the down-regulation of antioxidant genes, catalase and GPX, not cytotoxic roles. This might be interesting for adjuvant chemotherapy to make prostate cancer cells more sensitive to free radicals. It might be useful for the reduction of cytotoxic agents and cancer chemoprevention.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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