Phosphorylation and glycosylation are two of the most important and widespread post-translational modifications (PTMs) in an organism. Proteomics analysis of the PTMs has been challenged by low stoichiometry of the modified proteins and suppression effects by high abundance proteins, typically no-functional house-keeping proteins. In this study, a novel method was applied for not only isolating PTM peptides from intact peptides but also concurrently characterizing of glyco- and phosphoproteome using electrostatic repulsion hydrophilic interaction chromatography (ERLIC) packed with silica coated by crosslinked polyethyleneimine. For 2 mg tryptic digest of mouse proteome of epicardial adipose tissue with fat diet, 802 N-glycosylated peptides of 316 glycoproteins and 159 phosphorylated peptides of 75 phosphoproteins were identified using HPLC chip/quadrupole time-of-flight (Q-OF) tandem mass spectrometer.
Proceedings of the Korean Society of Toxicology Conference
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2000.11a
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pp.31-41
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2000
The major issue in the post genome sequencing era is determination of gene expression patterns in variety of biological systems. A microarray system is a powerful technology for analyzing the expression profile of thousands of genes at one experiment. In this study, we constructed cDNA microarray which carries 2,304 cDNAS derived from oligo-capped mouse cDNA library. Using this hand-made microarray we determined gene expression in various biological systems. To determine tissue specific genes, we compared Nine genes were highly-expressed in adult mouse brain compared to kidney, liver, and skeletal muscle. Tissue distribution analysis using DNA microarray extracted 9 genes that were predominantly expressed in the brain. A database search showed that five of the 9 genes, MBP, SC1, HiAT3, S100 protein-beta, and SNAP25, were previously known to be expressed at high level in the brain and in the nervous system. One gene was highly sequence similar to rat S-Rex-s/human NSP-C, suggesting that the gene is a mouse homologue. The remaining three genes did not match to known genes in the GenBank/EMBL database, indicating that these are novel genes highly-expressed in the brain. Our DNA microarray was also used to detect differentiation specific genes, hormone dependent genes, and transcription-factor-induced genes. We conclude that DNA microarray is an excellent tool for identifying differentially expressed genes.
A large amount of information is currently available for somatic embryogenesis of plants. However, one common problem related to somatic embryos is that the conversion rate can be low for some species. Apical meristems are responsible for post-embryonic growth of the embryo. The low percentage observed is most likely a result of poor apical meristem development or defects in the meristem organization during somatic embryogenesis. In flowering plants, apical meristems are well developed by the late heart stage of zygotic embryo development. In conifers, such as white spruce, apical meristems are formed at the pre-cotyledon stage. Thus, apical meristem development occurs very early, prior to the maturation stage of embryo development. Once formed, meristems are stably determined. In the somatic embryo, as exemplified by white spruce, since embryo development is not synchronous, tissue differentiation including apical meristem formation occurs throughout the“maturation”stage. Different apical meristem organizations can be found among different individuals within a population. In contrast to their zygotic counterparts, the apical meristems appear not to be stably determined as their organization, as the shoot apical meristem especially, can be easily modified or disrupted. Precocious germination seldom results in functional plantlets. All these observations suggest that the conditions for somatic embryo maturation have not been optimized or are not suitable for meristem formation and development. The following strategies could improve meristem development and hence conversion: 1. Simulate in ouuio conditions to promote meristem development prior to the“maturation”treatment.2. Prevent deterioration of apical meristem organization during somatic embryo maturation.3. Promote further meristem development during embryo germination.
Evaluation of the methods of processing allogenic bone must be considered in order to make an effective choice of graft materials in oral surgery. Allograft materials processed by the tissue banking industry have varying capacities of bone reconstruction. The biological function of processed bone can be affected by many factors, like particle size, processing parameters, and inclusion or exclusion of mineral and moisture. For example, freeze drying step offers a safe and economical means for packaging, shipping, storage, and preservation of homologous bone. Demineralization of cortical bone using hydrochloric acid can produce a uniform demineralized surface with a capacity for osteoinduction. The objectives of this review were to evaluate the processing methods for allogenic bone and to characterize processed materials for grafting. It is important to understand the biological, biomechanical healing of different types of allografts to make the right choice for allogenic bone on each clinical application and to achieve a successful outcome for alveolar bone reconstruction in oral surgery.
The oxygen saturation of blood can be measured by the difference absorption in optical spectra of Hb and Hb0$_2$, as the well known previous study. In this study we developed the non-invasive oxygen measurement device for diagnosis of peripheral vascular disease in lower extremity using infrared and red LED which produce a peak spectral emission at a wavelength of 660 nm, and 940 nm. To evaluate the clinical application of the oxygen measurement device, we performed lower extremity study to measure the oxygen changes in response to physiological changes within biological tissue. The results showed that oxygen saturation of blood in biological tissue can be monitored from the separation arrangement light source and detector.
Aging is the most important single risk factor for many chronic diseases such as cancer, metabolic syndrome, and neurodegenerative disorders. Targeting aging itself might, therefore, be a better strategy than targeting each chronic disease individually for enhancing human health. Although much should be achieved for completely understanding the biological basis of aging, cellular senescence is now believed to mainly contribute to organismal aging via two independent, yet not mutually exclusive mechanisms: on the one hand, senescence of stem cells leads to exhaustion of stem cells and thus decreases tissue regeneration. On the other hand, senescent cells secrete many proinflammatory cytokines, chemokines, growth factors, and proteases, collectively termed as the senescence-associated secretory phenotype (SASP), which causes chronic inflammation and tissue dysfunction. Much effort has been recently made to therapeutically target detrimental effects of cellular senescence including selectively eliminating senescent cells (senolytics) and modulating a proinflammatory senescent secretome (senostatics). Here, we discuss current progress and limitations in understanding molecular mechanisms of senolytics and senostatics and therapeutic strategies for applying them. Furthermore, we propose how these novel interventions for aging treatment could be improved, based on lessons learned from cancer treatment.
Microvel $^{\textregistered}$ double velour graft impregnated with a biodegradable algin was studied as a new vatscular graft. It is impervious to blood but still retains high porosity. This graft does not require preclotting during implantation and has good tissue ingrowth and biological healing properties. Two vascular grafts impregnated with algin (6mm in diameter) were implanted in the aorta of mongrel dogs without preclotting. Two identical grafts were preclctted and served as controls. The grafts were harvested 2 and 4 months postoperatively, and the healing pattern was examined by a light microscope after hemRtoxylineosin staining. It was observed that endothelial cells were incompletely covered on both algin-impregnated and control grafts after 2 month Implantation, while they were fully covered on both grafts after 4 month. There were no significant differences in subendothelial granulation tissue organization and fibrinoid material absorption between the algin-impregnated and control grafts. The algin-impregnated graft did not show any harmful effect on the healing and thus can be a new promising graft which is not necessary preclotting during the implantation.
Chronic liver diseases and hepatic cancer have been reported as 10% of cause of death in Koreans. Regardless of various causes, chronic liver disease accompanies commonly hepatic fibrosis. But still the mechanism of hepatic fibrosis remains poorly understood. Using the dimethylnitrosamine(DMN)-induced hepatic fibrosis rat model, We performed to evaluate the possible therapeutic effect of RIP(extracts of Phellodendron amurense and Patrinia scabiosaefolia) and to investigate the changes in referential connective tissue proteins($TGF-{\beta}_1$, ${\alpha}$-smooth muscle actin, and vimentin) as a marker of fibrogenesis. For these purposes, liver tissues were stained with H & E, and Azan staining for estimation of developing fibrosis. In the DMN-treated rat liver tissue, fibrosis were developed forming incomplete septal fibrosis. Whereas, in the RIP-treated rat liver tissues, the fibrosis were decreased recovering to normal morphology. The expressions of $TGF-{\beta}_1$, ${\alpha}$-smooth muscle actin($\alpha-SMA$), and vimetin were increased in the DMN-treated rat liver tissues, but decreased in the various areas of RIP-treated rat liver tissues. According to these results, RIP could be a possible therapeutic agent to reduce hepatic fibrosis, and the $TGF-{\beta}_1$, ${\alpha}$-SMA, and vimentin could be possible indicative markers of hepatic fibrosis development and recovery.
Image-based three dimensional radiation treatment planning(3D RTP) has a potential of generating superior treatment plans. Advances in computer technology and software developments quickly make 3D RTP a feasible choice for routine clinical use. However, it has become clear that an evaluation of a 3D plan is more difficult than a 2D plan. A number of tools have been developed to facilitate the evaluation of 3D RTP both qualitatively and quantitatively. For example, beam's eye view(BEV) is one of the most powerful and time-saving method as a qualitative tools. Dose-volume histogram(DVH) has been proven to be one of the most valuable methods for a quantitative tools. But it has a limitation to evaluate several different plans for biological effects of the tissue and critical organ. Therefore, there is a strong interest in developing quantitative models which would predict the likely biological response of irradiated organs and tissues, such as tumor control probability(TCP) and normal tissue complication probability(NTCP). DVH and NTCP of hepatoma were evaluated for three dimensional conformal radiotherapy(3D CRT). Also, 3D RTP was analysed as a dose optimization based on beam arrangement and beam modulation.
In the present study we determined if NELL2, a neural tissue-specific protein containing 6 epidermal growth factor (EGF)-like repeat domains, plays an important role in the regulation of puberty initiation in the rat hypothalamus. We origin811y found that NELL2 is a new estrogen-responsive gene in hypothalami derived from estrogen-sterilized and control rats using a PCR differential display. In the 40-day-old female rat hypothalamus, NELL2 was up-regulated by neonatal estrogen treatment. In situ hybridization histochemistry showed that NELL2 is very abundant in the ventromedial hypothalamic nucleus that is responsible for the control of sex behavior. NELL2 mRNA level in the medial basal hypothalamus showed a dramatic increase before female puberty onset, which suggests that NELL2 may be involved in the process regulating female puberty onset. We attemped to block NELL2 synthesis with intracerebroventricular injection of an antisense oligodeoxynucleotide (ODN) to the NELL2 mRNA, and examined its effect on the puberty onset of the female rat. The antisense ODN significantly delayed puberty initiation determined by vaginal opening. In summary, NELL2 may play an important role in the regulation of female puberty onset.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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