PURPOSE. This study investigated the effects of silver nanoparticle (SN) loading into hydraulic calcium silicate-based Portland cement on its mechanical, antibacterial behavior and biocompatibility as a novel dental bone substitute. MATERIALS AND METHODS. Chemically reduced colloidal SN were combined with Portland cement (PC) by the concentrations of 0 (control), 1.0, 3.0, and 5.0 wt%. The physico-mechanical properties of silver-Portland cement nanocomposites (SPNC) were investigated through X-ray diffraction (XRD), setting time, compressive strength, solubility, and silver ion elution. Antimicrobial properties of SPNC were tested by agar diffusion against Streptococcus mutans and Streptococcus sobrinus. Cytotoxic evaluation for human gingival fibroblast (HGF) was performed by MTS assay. RESULTS. XRD certified that SN was successfully impregnated in PC. SPNC at above 3.0 wt% significantly reduced both initial and final setting times compared to control PC. No statistical differences of the compressive strength values were detected after SN loadings, and solubility rates of SPNC were below 3.0%, which are acceptable by ADA guidelines. Ag ion elutions from SPNC were confirmed with dose-dependence on the concentrations of SN added. SPNC of 5.0 wt% inhibited the growth of Streptococci, whereas no antimicrobial activity was shown in control PC. SPNC revealed no cytotoxic effects to HGF following ISO 10993 (cell viability > 70%). CONCLUSION. Addition of SN promoted the antibacterial activity and favored the bio-mechanical properties of PC; thus, SPNC could be a candidate for the futuristic dental biomaterial. For clinical warrant, further studies including the inhibitory mechanism, in vivo and long-term researches are still required.
Flavonoids, which form a major component in Houttuynia cordata Thunb., display a wide range of pharmacological activities. The expression of plant flavonoids is partly regulated by fermentation. Therefore, we studied the effects of fermentation on H. cordata in order to identify the strains present during the fermentation process, and to determine whether fermented H. cordata could be used as a probiotic. Our results showed that all 6 of the bacterial strains isolated from fermented H. cordata (FHC) belonged to the genus Bacillus. As expected, fermenting H cordata also increased the flavonoid content as increases were observed in the levels of rutin, quercitrin, and quercetin. To test the effects of fermentation, we treated LPS-stimulated RAW264.7 cells with non-fermented H. cordata extracts (HCE) or FHC extracts (FHCE). Compared to the HCE-treated cells, the FHCE-treated cells showed increased viability. No cytotoxic effects were detected in the FHCE-treated groups in the 2 cell lines used in the study, namely, RAW264.7 and RBL-2H3. FHCE-treated HepG2 cells showed decreased growth, compared to HCE-treated HepG2 cells. These results indicate that the fermented H. cordata predominantly contained Bacillus strains. Furthermore, FHCE are able to prevent LPS-induced inflammatory effects and inhibit the growth of HepG2 cells.
Targeting the pathogen viability using drugs is associated with development of drug resistance due to selective pressure. Hence, there is an increased interest in developing agents that target bacterial virulence. In this study, the inhibitory effect of ciclopirox, an antifungal agent with iron chelation potential, on the microbial virulence factors was evaluated in 26 clinical MDR Pseudomonas aeruginosa isolates collected from Alexandria Main University Hospital, a tertiary hospital in Egypt. Treatment with 9 ㎍/ml ciclopirox inhibited the hemolytic activity in 70% isolates, reduced pyocyanin production, decreased protease secretion in 46% isolates, lowered twitching and swarming motility, and decreased biofilm formation by 1.5- to 4.5-fold. The quantitative real-time PCR analysis revealed that treatment with ciclopirox downregulated the expression levels of alkaline protease (aprA) and pyocyanin (phzA1). Ciclopirox is used to treat hematological malignancies and the systemic administration of ciclopirox is reported to have adequate oral absorption with a satisfactory drug safety profile. It is important to calculate the appropriate clinical dose and therapeutic index to reposition ciclopirox from a topical antifungal agent to a promising virulence-modifying agent agent against P. aeruginosa, a problematic Gram-negative pathogen.
Objectives This study was evaluated the effects of CSE the regulatory mechanism of NO and cytokines in the LPS-stimulated Raw 264.7 cells. Methods The Coicis Semen MeOH extract dissolved in EMEM for 1 hour prior to the addition of LPS(1${mu}g/ml$). The cell viability was measured by MTT assay, and Nitric Oxide production was monitored by measuring the nitrite content in culture medium. The levels of cytokine and PGE2 were analyzed by sandwich immunoassays. Results CSE inhibited the production of NO (0.03 and 0.1 mg/ml), $TNF-{\alpha}$ (0.03 and 0.1 mg/ml), $IL-1{\beta}$ (0.03 and 0.1 mg/ml), IL-6 (0.03, 0.1 mg/ml) and PGE2(0.03 and 0.1 mg/ml) in Raw 264.7 cells activated with LPS(lipopolysaccharide). Conclusion According to the results above, Coicis Semen can produce anti-inflammatory effect, which may play a role in adjunctive therapy in Gram-negative bacterial infections.
Pseudomonas diminuta (ATCC 19146) has been typically used in the bacterial challenge test for validation of the sterilizing filtration process. Cell size is critical for determining the retention characteristics of membrane filters with pore-size of $0.2{\mu}m$. The changes of cell sizes after osmotic shocks at 150, 260, 500, and 700 mosM were measured by a particle size analyzer and the changes of their buoyant densities were analyzed with a Percoll gradient. The results indicated that there were no significant differences when cells were cultured in 260 mosM medium and osmotically shocked at 500 and 700 mosM. However, the osmotically shocked cells at 150 mosM showed a 38% increase of the cell size compared to the cells at 260 mosM. From these study, we concluded that the worst case condition for validation of a sterilizing filter would be 500 mosM, not because of changes in the cell size, but due to decrease in cell viability under those conditions.
Lactic acid bacteria (LAB) quickly attenuate or are killed during the freeze-drying process and storage. The effect of some natural polysaccharides, which are known as potent antitumor and immunomodulating substances, on the viability of the LAB, Lactobacillus acidophilus and Bifidobacterium breve, on freeze-drying and storage were investigated. Among the polysaccharides tested, red ginseng polysaccharide (RGP) and chitosan significantly inhibited the cell death of the LAB during freeze-drying, and fucoidan and RGP most potently protected the cell death of the LAB during storage. The stabilities of the LAB on the addition of RGP and fucoidan were comparable to that of skimmed milk. However, white ginseng polysaccharide (WGP) did not promote storage stability. When 5% skimmed milk/5% RGP treated LAB were freeze-dried and stored, their viabilities were found to be significantly higher those treated with 5% or 10% RGP. The stabilizing effect of 5% RGP/5% skimmed milk during LAB freeze-drying and storage stability was comparable to that of treatment with 10% skimmed milk. Based on these findings, we believe that RGP beneficially improves the stability of LAB during the freeze-dry process and storage.
Objectives The purpose of this study is to find out the effect of Taraxaci Herba Extract (THE), LPS, on pro-inflammatory mediatory. Methods After the treatment of Taraxaci Herba MeOH extract dissolved in EMEM for 1 hour prior to the addition of LPS ($1\;{\mu}g/ml$), cell viability was measured by MTT assay, Nitric Oxide production was monitored by measuring the nitrite content in culture medium. And levels of cytokine and PGE2 were analyzed by sandwich immunoassays. Results THE inhibited the production of nitrite and nitrate (0.03 and 0.1 mg/ml), TNF-$\alpha$, (0.03 and 0.1 mg/ml), IL-$1{\beta}$(0.03 and 0.1 mg/ml), IL-6 (0.01, 0.03 and 0.1 mg/ml) and PGE2(0.03 and 0.1 mg/ml) activated with LPS. In Raw 264.7 cells activated with lipopolysaccharide. Conclusions According to the results above, Taraxaci Herba can produce anti-inflammatory effect, which may play a role in adjunctive therapy in Gram-negative bacterial infections.
Cytolethal distending toxin (CDT) is a secreted tripartite genotoxin produced by many pathogenic gram-negative bacteria. It is composed of three subunits, CdtA, CdtB and CdtC, and CdtB-associated deoxyribonuclease (DNase) activity is essential for the CDT toxicity. In the present study, to design a novel potentially antitumor drug against lung cancer, the possible mechanisms of cdtB anticancer properties were explored in the A549 human lung adenocarcinoma cell line. A recombinant plasmid pcDNA3.1/cdtB was constructed expressing CdtB of human periodontal bacterium Aggregatibacter actinomycetemcomitans and investigated for toxic properties in A549 cells and possible mechanisms. It was observed that plasmid pcDNA3.1/cdtB caused loss of cell viability, morphologic changes and induction of apoptosis. Furthermore, measurement of caspase activity indicated involvement of an intrinsic pathway of cell apoptosis. Consequently, the recombinant plasmid pcDNA3.1/cdtB may have potential as a new class of therapeutic agent for gene therapy of lung cancer.
Background: This study was performed to provide a long-term bacterial seal through the formation of reparative dentin bridge, calcium silicate-based pulp capping materials have been used at sites of pulpal exposure. The aim of this study was to evaluate the mineralization-inducing potentials of calcium silicate-based pulp capping materials (ProRoot MTA [PR], Biodentine [BD], and TheraCal LC [TC]) in human dental pulp cells (HDPCs). Methods: Specimens of test materials were placed in deionized water for various incubation times to measure the pH variation and the concentration of calcium released. The morphology of HDPCs cultured on the specimens was examined using a confocal laser scanning microscope (CLSM). Alizarin red S staining and alkaline phosphatase assays were used to evaluate mineralization-inducing potentials of the capping materials. Results: BD showed the highest calcium release in all test periods, followed by PR and TC. (p<0.05). All experimental groups showed high alkalinity after 1 day, except at 14 days. BD showed the highest cell viability compared with PR and TC after 1 and 3 days, while TC showed the lowest value (p<0.05). The CLSM analysis showed that cells were well adhered and expressed actin filaments for all pulp capping materials. Mineralization by PR and BD groups was higher than that by TC group based on alizarin red S staining. BD showed significantly higher alkaline phosphatase activity than PR and TC, while TC showed the lowest value (p<0.05). Conclusion: Within the limitations of the in vitro study, BD had higher mineralization-inducing potential than PR and TC.
The present study was conducted to evaluate the effect of Yongdamsagantang (YST) on the regulatory mechanism of cytokines and nitric oxide (NO) for the immunological activities in RAW 264.7 cells. After the treatment of YST water extract, cell viability was measured by MTT assay, and NO production was monitored by measuring the nitrite content in culture medium. Inducible nitric oxide synthase (iNOS) and phospholylation of inhibitor of nuclear factor kappa B alpha ($p-I{\kappa}B{\alpha}$) were determined by Immunoblot analysis, and levels of cytokine were analyzed by sandwich immunoassays. Results provided evidences that YST inhibited the production of NO. iNOS, and interleukin-6, and the activation of $p-I{\kappa}B{\alpha}$ in RAW 264.7 cells activated with lipopolysaccharide. These findings showed that YST could have some anti-inflammatory effects which might play a role in therapy in Gram-negative bacterial infections.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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