In order to clarify effects of phytohormones on the viability and the cell wall regeneration of protoplasts isolated from Nicotiana tobacum L. var. BY4, protoplasts isolated from mesophyll tissue were cultured on the Murashige-Skoog liquid media supplemented with auxin(2, 4-D, NAA, IAA) and/or cytokinin (kinetin, BAP, 2ip). Viability of protopplasts was higher in the culture medium containing auxin and cytokinin, especially in the combination of 2, 4-D and BAP. The effectual cell wall regeneration of protolasts was observed when theprotoplasts were cultrued on the medium supplemented with auxin alone, especially with IAA. Cell wall regernation started from 2-3 days after culture and was not detected at budding regions. When the protoplasts were cultured on the phytohormone-free medium, the viability of protoplasts dramatically decreased 4 days after culture.
This experiment was aimed to develop possible methods to control the maturity of grape berries through the application of exogenous plant growth substances and physical treatments such as defoliation or girdling. 1. Chlormequat and paclobutrazol increased anthocyanin but did not affect soluble solids contents and maturity. Girdling enhanced maturation and solids accumulation whereas defoliation delayed maturity. Solids content of berries in defoliation treatment did not reach to the level of other treatments even when fully ripened. 2. Ripening of grapes is greatly delayed for 20 to 30 days by the application of auxins (2,4-D and fenoprop) compared to the untreated control. Uneven ripening of berries in those clusters was observed when the concentration of auxin was over 50 ppm. Thus, about 30% of berries remained green until the normal berries were overripened. 3. Gibberellin did not affect the maturity of grape berries but maturity was greatly delayed when GA was applied with auxins. Also, uneven coloration between berries was observed such as in the application of auxin alone. 4. Ethephon application combinded with calcium at veraison showed no effect on berry ripening but increased anthocaynin contents. It can be concluded that harvest time of 'Campbell Early' grapes can be effectively extended by delaying the maturity through the application of auxin.
By screening a cDNA library of auxin-treated mung bean (Vigna radiata L.) hypocotyls, we have isolated two full-length cDNA clones, pVR-ACS6 and pVR-ACS7, for 1-aminocyclopropane-1-carboxylate (ACC) synthase, the rate-limiting enzyme in the ethylene biosynthetic pathway. While PVR-ACS6 corresponds to the previously identified PCR fragment pMBA1, pVR-ACS7 is a new cDNA clone. A comparison of deduced amino acid sequences among auxin-induced ACC synthases reveal that these enzymes share a high degree of homology (65-75%) to VR-ACS6 and VR-ACS7 polypeptides, but only about 50% to VR-ACS1 polypeptide. ACS6 and ACS7 are specifically induced by auxin, while ACS1 is induced by cycloheximide, and to lesser extent by excision and auxin treatment. Results from nuclear run-on transcription assay and RNA gel blot studies revealed that all three genes were transcriptionally active displaying unique patterns of induction by IAA and various hormones in etiolated hypocotyls. Particularly, 24-epibrassinolide (BR), an active brassinosteroid, specifically enhanced the expression of VR-ACS7 by distinct temporal induction mechanism compared to that of IAA. In addition, BR synergistically increased the IAA-induced VR-ACS6 and VR-ACS7 transcript levels, while it effectively abolished both the IAA- and kinetin-induced accumulation of VR-ACS1 mRNA. In light-grown plants, VR-ACS1 was induced by IAA in roots, whereas W-ACS6 in epicotyls. IAA- and BR-treatments were not able to increase the VR-ACS7 transcript in the light-grown tissues. These results indicate that the expression of ACC synthase multigene family is regulated by complex hormonal and developmental networks in a gene- and tissue-specific manner in mung bean plants. The VR-ACS7 gene was isolated, and chimeric fusion between the 2.4 kb 5'-upstream region and the $\beta$-glucuronidase (GUS) reporter gene was constructed and introduced into Nicotiana tobacum. Analysis of transgenic tobacco plants revealed the VR-ACS7 promoter-driven GUS activity at a highly localized region of the hypocotyl-root junction of control seedlings, while a marked induction of GUS activity was detected only in the hypocotyl region of the IAA-treated transgenic seedlings where rapid cell elongation occurs. Although there was a modest synergistic effect of BR on the IAA-induced GUS activity, BR alone failed to increase the GUS activity, suggesting that induction of VR-ACS7 occurs via separate signaling pathways in response to IAA and BR.
This experiment was conducted to evaluate the effect of gibberellin biosynthesis retardants as used by rice lodging inhibitors on the gibberellin antagonism, auxin interation, ethylene evolution and growth of second crops. Results obtained can be summarized as follows. Inabenfide, paclobutrazol and uniconazole markedly inhibited the epicotyl elongation of mung bean. Inhibiting effect of epicotyl by these chemicals was markedly stimulated by gibberellic acid, thus showing clear antagonism between these chemicals and gibberellic acid. Significantly large number of roots were formed in the mung bean cuttings which were rooted in the paclobutrazol and uniconazol of 1 ppm. The higher the concentration, the more the number of roots forms. It was guessed that these effect was closely related with auxin. Ethylene evolution was a little stimulated in the leaf of rice under the treatment of inabenfide, paclobutrazol and uniconazole at earlier stage(5 DAT), however it was suppressed at later stage(10, 30 DAT) at higher concentration. The effect of gibberllin biosynthesis inhibitors to second crops retarded tomato plants without influencing the height of barley. The treatment of paclobutrazol and uniconazol which is triazole-type more severely inhibited than that of inabenfide which is isonicotinanilide-type. The more the concentration, the less the height of tomato plants.
Auxin-producing antagonistic bacterium K11, which can inhibit Phytophtora capsici, was isolated from a local red-pepper field soil in Gyeong-buk. In order to check for additional PGPR(plant growth promoting rhizobacterium) functions of the strain K11, we confirmed siderophore and cellulase productions by CAS (chrome azurol S) blue agar and CMC plate with congo red, respectively. The strain K11 was identified as Bacillus licheniformis with 98% similarity on 16s rDNA comparison and Biolog analyses. B. licheniformis K11 promoted mung bean adventitious root induction and enhanced root growth of mung bean (160%), pea (150%), and Chinese cabbage (130%), Also, B. licheniformis K11 was able to effectively suppress (63%) P. capsici causing red-pepper blight in the pot in vivo test. Therefore, we could select a triple-functional PGPR which has auxin, siderophore, and cellulase producing ability for effective crops production in organic farming.
The Journal of the Convergence on Culture Technology
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v.7
no.4
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pp.721-726
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2021
Plant cells have a totipotencial capacity, the ability of each cell to produce a new complete individual through development. By applying this, several technologies are being developed for widespread application of somatic embryogenesis by processing hormones in vitro as a method of propagation of plants. In order to use this technology, in Kalanchoe pinnata, a plant capable of asexual reproduction with more regular cell division, kinetin belonging to cytokinin and picloram among hormones belonging to auxin were added in combination and treated for 8 weeks, and then the typical performance was evaluated. As a result of our experiment, the rooting effect in leaf slices showed a 70% incidence rate at a picloram concentration of 0.1 mg/L. It has been proven that a concentration difference of 1:5-1:10 in the ratio of kinetin and picloram is effective. It is the experimental result that the effect of auxin is essential for the development of Kalanchoe roots. As for the effect of shooting, the incidence rate was 60% at the picloram concentration of 0.5 mg/L. The kinetin concentration from 0.5 and 1.0 mg/L and has a significant effect on development. It has been proven that the ratio of kinetin to picloram is effective with a concentration difference of 1:1-1:2. These results show that the combination of cytokinin and auxin is crucially important for shooting. It is thought that it can be the basis of a technology for inducing mass proliferation in vitro by inducing direct organogenesis with a combination of hormones.
Peach (Prunus persica L.) is a model species for stone fruit studies within the Rosaceae family. Auxin plays an important role in the development of peach fruit. To reveal the distribution of auxin in the tissues of peach fruit, immunohistochemical localization of IAA was carried out in the seed, mesocarp, and endocarp in developing peach fruit using an anti-indole-3-acetic acid (anti-IAA) monoclonal antibody. A strong IAA signal was observed throughout the outer and inner integument during peach fruit development, and the distribution was zonal. The IAA signal was mainly focused in mucilage layers in the outer integument. The outer integument may function to produce or store IAA in the seed; a strong IAA signal was detected in the cells around the vascular tissue, whereas a weak IAA signal was located in the vascular tissues. In the mesocarp, the cells around the vascular bundle tissue gave rise to an IAA signal that increased in the late phase of fruit growth, which coincided with a significant increase in fruit growth. The distribution of IAA, however, was changed when fruit was treated with auxin transport inhibitors NPA (1-N-naphthylphthalamic acid) or TIBA (2, 3, 5-triiodobenzoic acid); in mesocarp tissues, an IAA signal was detected mainly in vessels of the treated fruit. During the critical period of endocarp lignification, the vessel lignification process was negatively correlated with IAA signal. The present results confirmed that the distribution of IAA was different in various tissues of peach fruit according to the developmental stage. This research provides cytological data for further study of the regulatory mechanism of auxin in peach fruit.
Callus culture initiation of strawberry (Fragaria${\times}$ananassa Duch.) was investigated at different Murashige and Skoog (MS) medium strengths, types and concentrations of plant growth regulators, and incorporating a cold pretreatment period to determine the optimal nutritional and environmental conditions. No high quality callus was induced on MS media without auxin regardless of medium strength. When 6-benzylaminopurine (BA) was combined with indole acetic acid (IAA), naphthalene acetic acid (NAA), and 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D), high quality callus were highly induced compared to medium supplemented with auxin alone. When $0.5mg{\cdot}L^{-1}$ BA was combined with IAA, NAA, and 2,4-D, high quality callus induction was more effective than the medium supplemented with the other BA concentrations. The best combination of auxin and cytokinin for high quality callus induction was $1.0mg{\cdot}L^{-1}$ NAA and $0.5mg{\cdot}L^{-1}$ BA. Although the differences in callus induction were not significant, high quality callus induction at half strength MS medium was more effective than at full strength medium. When $30g{\cdot}L^{-1}$ sucrose was added to the half strength MS medium, the rate of high quality callus induction increased. The optimum cold pretreatment temperature and period for high quality callus induction were $4^{\circ}C$ and 72 h, respectively. Regeneration rate of high quality callus increased in MS medium supplemented with thidiazuron.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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