13종의 한국산 야생버섯 추출물의 항돌연변이 효과의 검토는 S. typhimurium TA98과 TA100을 이용한 Ames 실험계로 확인하였다. 그 결과, 직접변이원인 MNNG에 대해 산속그물버섯 아재비와 구름버섯의 메탄올 추출물은 TA100에서 90-94%의 강한 항변이원성을 보였고, 갓버섯과 구름버섯의 열수 추출물도 58-61%의 저해효과를 보였다. 간접변이원인 B(a)P에 대해서는 TA98과 TA100에서 구름버섯과 턱받이금버섯 메탄올 추출물이 가장 강한 저해효과를 나타내었고, 열수 추출물중 잔피막흑주름버섯과 수원무당버섯은 TA98에서 60-70% 정도의 저해활성을, 갓버섯은 TA100에서 45% 정도의 돌연변이 억제효과를 볼 수 있었고, 나머지 버섯시료는 저해활성을 거의 보이지 않았다. 한편 야생버섯 메탄올 추출물 0.5mg/mL 투여시 결장암세포인 HT29에 대해 그물버섯, 산속그물버섯아재비, 방패외대버섯, 황소비단그물버섯, 구름버섯, 턱받이금버섯, 덕다리버섯에서 55-78% 이상의 억제 효과를 보였고, 1 mg/mL의 시료농도에서는 11종의 버섯에서 50% 이상의 억제 효과를 나타내었다. 간암세포인 HepG2에서 대해서는 방패외대버섯 메탄올 추출물 1 mg/mL에서만 58.4%의 저해능을 보였고, 나머지 시료에서는 45% 정도의 낮은 저해활성을 보였다. 혈액암세포주인 U937의 경우도 그물버섯, 산속그물버섯아재비, 수원무당버섯, 황소비단 그물버섯, 밀버섯, 잔피막흑주름버섯 메탄올 추출물에서 60% 이상의 높은 저해 활성을 나타내었다. 구름버섯 열수추출물의 경우 HepG2와 U937에 대해서 53-65% 정도의 비교적 높은 저해활성을 보였고, 대부분의 버섯 열수 추출물은 40%이하의 낮은 저해활성을 보였다. 정상 임파구에 대해서 야생버섯 추출물 0.5-1 mg/mL 농도에서 75-80% 이상의 생존율을 보여, 야생버섯 추출물을 1 mg/mL 농도로 처리할 경우 암세포에 대한 높은 억제효과에 비해 정상세포에 대해서는 비교적 낮은 독성을 가짐을 확인하였다.
Considering the dearth of information regarding the medicinal properties of Luffa cylindrica, we assessed the antioxidative, antimutagenic and hyperplasia inhibitory activity of cancer cells from Luffa cylindrica extracts by employing biological and biochemical assays. Ethanol extracts of Luffa cylindrica inhibited MDA-BSA (malondialdehyde-bovine serum albumin) conjugation reaction ($66.38{\pm}2.65$), DPPH (1,1-diphenyl-2-picryl-hydrazyl) radical production ($60.13{\pm}0.42$) and lipid peroxidation ($56.04{\pm}3.24$). In this study, Luffa cylindrica is believed to exert possible antioxidative effects. The direct and indirect antimutagenic effects of the ethanol extracts of Luffa cylindrica were examined by the Ames test using Salmonella typimurium TA98 and TA100. The inhibitory effects on indirect and direct mutagenicity shows an weak tendency, particularly in direct mutagenicity mediated by 2-nitrofluorene in Salmonella typimurium TA98 ($5.82{\pm}5.74$) and in indirect mutagenicity mediated by 2-anthramine in Salmonella typimurium TA100 ($5.76{\pm}2.15$). The ethanol extracts of Luffa cylindrica on cancer cell hyperplasia inhibitory activity via MTT (3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide) assay exerted cytotoxic effects on Hela cells ($55.83{\pm}3.83$) and MCF-7 cells ($33.03{\pm}2.09$), which were used in this study. Based on these results, it believed that the ethanol extracts of Luffa cylindrica have antioxidative capacities as well as hyperplasia inhibitory activity of cancer cells. Furthemore, Luffa cylindrica is a candidate for the prevention and dietetic treatment of chronic diseases and for the development of functional food.
The antimutagenic and cytotoxic activities of ethanol and water extracts from Rubus coreanum were investigated in this study. Their antimutagenic activities were measured by the Ames test and their cytotoxic activities were evaluated by the growth inhibition of cancer cells via the 3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyl tetrazolium bromide (MTT) assay and the sulforhodamine B (SRB) assay. In the results, the inhibition rates of the ethanol and water extracts toward mutagenicity induced by 4-NQO were 95.0% and 93.6% at 5 mg/plate, respectively, while their inhibition rates against mutagenicity induced by sodium azide were 27.2% and 40.8%, respectively. According to MTT assay, the cytotoxicity values of the ethanol extract against Hep3B and HeLa cells were 67.2% and 68.5%, respectively, and the values for the water extract were 65.8% and 66.4%, respectively. In the SRB assay, the ethanol and water extracts inhibited over 60% of cancer cell growth. In conclusion, both the ethanol and water extracts of Rubus coreanum offer potentially good antimutagenic and anticancer effects.
The antioxidative effect, antimutagenic capacity and inhibitory effect of cancer cell proliferation in ethanol extracts of Ganoderma lucidum were studied for suggestion of prevention and dietetic treatment of chronic diseases and development of antioxidative, antimutagenic and anticancer functional food by employing biological and biochemical assay. The IC/sub 50/ of MDA with BSA conjugation reaction, lipid peroxidation and scavenging effect on DPPH radical in ethanol extracts of Ganoderma lucidum showed 1026.21 mg/mL, 0.152 mg/mL and 0.412 mg/mL, respectively. So, the most effective antioxidative capacity in ethanol extracts of Ganoderma lucidum was the lipid peroxidation, among the method used this study. The indirect and direct antimutagenic effects of ethanol extracts of Ganoderma lucidum were examined by Ames test using Salmonella typimurium TA98 and TA100. The inhibition rates on indirect mutagenicity mediated by 2-Anthramine showed 100% in the Salmonella typimurium TA98 and 98.74% in the Salmonella typimurium TA100 and the direct mutagenicity mediated by sodium azide in Salmonella typimurium TA100 was 82.96%. But, the inhibitory effect on indirect mutagenicity mediated by 2-Nitrofluorene in Salmonella typimurium TA98 was low(7.81%). The inhibitory Effect of Ganoderma lucidum ethanol extracts on cell proliferation in Hela and MCF-7 by MTT test were 74.36% in HeLa and 73.90% in MCF-7 at the 0.50 mg/assay concentration and IC/sub 50/ were 0.163 mg/mL and 0.196 mg/mL respectively. From this result, it is suggested that Ganoderma lucidum is believed to have a possible antioxidative, antimutagenic and anticancer capacities.
This study was performed to determine the antimutagenic and cytotoxic effect of the Phellinus linteus methanol extract on Salmonella typhimurium TA98, TA100 and human cancer cell lines. In the Ames test, methanol extract of P. linteus alone did not exhibit any mutagenicity but showed substantial inhibitory effects against mutation induced by N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine(MNNG), 4-nitroquinoline-nitroquinoline-1-oxide(4NQO), 3-amino-1,4-dimethyl-5H-pyrdo[4,3-blindol(Trp-P-1) and benzo(α)pyrene(B(α)P). The methanol extracts of P. linteus(200㎍/plate) showed approximately 78.3%, 78.7% and 88.1% inhibitory effect on the mutagenesis induced by 4NQO, Trp-P-1 and B(α)P. The anticancer effects of P. linteus extract against human breast adenocarcinoma(MCF7), human lung carcinoma (A549), human fibrosarcoma (HT1080), human hepatocelular carcinoma (Hep3B) and human epitheloid carcinoma (HeLa) were investigated. The treatment of 1mg/mL P. linteus extracts had the highest cytotoxicity against MCF7 (92.0%), followed by Hep3B (84.9%), A549 (84.2%) and HT1080 (82.9%). In contrast 1mg/mL treatment of P. linteus extracts had only 10∼40% cytotoxicity on normal human liver cell (WRL68).
Salmonella Typhimurium TA98과 TA100 두 균주를 이용한 Ames Assay를 실시하여 신채류 생즙의 돌연변이원성과 돌연변이 억제효과를 검토하였다. 돌연변이 유발물질로는 Trp-P-1과 2-AF가 사용되었다. 쑥, 들미나라, 두릅, 돌나물 및 도라지의 생즙은 돌연변이원성을 나타내지 않았다. 산채류 생즙의 항돌연변이원성 효과는 쑥, 들미나리, 두릅이 가장 강하였으며 다음은 돌나물이었고, 도라지는 거의 항돌연변이효과를 나타내지 않았다. 이와 같은 결과는 TA98과 TA100을 이용한 실험에서 유사한 결과를 보였으며, 돌연변이 물질로 Trp-P-1을 사용하여 실험한 결과가 2-AF를 사용한 실험결과에 비하여 돌연변이 억제효과가 강하게 나타났다.
Water extracts of persimmon leaf tea(PLTE), green tea(GTE) and oolong tea(OTE), at the con centration used for human consumption, were examined for inhibitory effects on the mutagenicity of major classes of dietary and environmental mutagens including indirect acting mutagens, B[ ]P (benzo[ ]pyrene), IQ(2 amino 3 methylimidazo[4,5 f]quinoline), 2 AA(2 aminoanthracene) in the presence of S9 mix and direct acting mutagen, 4 NQO(4 nitroquinoline 1 oxide) without S9 mix, using the modified Ames Salmonella/microsome assay. PLTE, GTE and OTE showed very potent and concentration dependent antimutagenic effects against indirect acting mutagens B[ ]P and IQ. At the maximum concentration(16,200 g/plate) of each tea extract, number of colonies decreased in a dose dependent manner up to 82~100%. Similar inhibition of PLTE, GTE and OTE were seen at higher concentration in the mutagenicity of the 2 AA following an initial increase in the activity at lower concentration. However, the mutagenicity of the direct acting mutagen 4 NQO were not suppressed at lower concentration of the three tea extracts, and higher concentration of the tea extracts enhanced mutagenic activity of the mutagen. There were no differences in the mode of antimutagenesis between PLTE, GTE, and OTE, in both Salmonella typhimurium TA98 and TA100 strains against the same mutagen. In conclusion, the water extracts of persimmon leaf tea, green tea and oolong tea possess marked antimutagenic potential against a variety of important dietary and environmental indirect acting mutagens, but the activity was not observed against the direct acting mutagens. These results suggest that the mode of inhibitory action may not have resulted from direct interaction between tea extracts and the mutagens, but rather from indirect metabolic inactivation of mutagens by tea extracts.
동치미에서 분리한 Leu. mesenteroides subsp. cremoris DLAB19 균주의 MNNG와 4-NQO에 대한 항돌연변이원성물질 생산을 위한 최적 조건을 조사한 결과, 탄소원으로 glucos들 첨가시 가장 높은 항돌연변이 효과를 나타내었으며, 질소원으로서 yeast extract와 bactopeptone 첨가시 항돌연변이 효과가 우수하였다. 탄소원으로 glucose의 농도를 2% 첨가시 MNNG와 4-NQO에 대한 항돌연변이 효과가 가장 우수하였으며, 질소원으로서 yeast extract와 bac-topetone의 농도를 1% 첨가시 가장 우수한 항돌연변이효과를 나타내었다. 항돌연변이원성 물질 생산을 위한 최적 배양 조건은 pH, 배양 온도, 배양 속도가 각각 7.0, 3$0^{\circ}C$ 및 150 rpm이었다. 상기의 최적 조건에서 36시간 배양시 가장 높은 항돌연변이 효과를 나타내었는데 S. enterica serovar typhimurium TA100과 TA98을 이용한 겨우 항돌연변이 효과가 각각 96.4%와 53.8%이었다.
물 종류를 달리한 된장의 메탄올 추출물로 돌연변이유발 억제효과를 관찰한 결과 일반 수돗물로 담근 된장보다 게르마늄수와 고로쇠나무 수액으로 담근 된장이 Ames test와 SOS chromotest에서 높은 항돌연변이 효과를 나타내었다. 즉 Ames 실험에서 일반 재래식된장의 메탄올 추출물을 1 mg/plate 농도로 사용하였을 때 S. Typhimurium TA100에서 $AFB_1$의 돌연변이유발 억제작용을 나타내지 않았으나 게르마늄수 된장과 고로쇠나무 수액을 첨가한 된장의 메탄올 추출물은 $56{\sim}62%$ 억제되었으며 5 mg/plate 농도에서도 일반 된장보다 억제효과가 높았다. 또한 E. coli PQ37에서 MNNG의 돌연변이유발 억제효과도 일반 된장보다 게르마늄수 된장과 고로쇠나무 수액된장에서 더 높게 나타났다. S. Typhimurium TA100에서 MNNG를 돌연변이원으로 사용한 Ames test에서 천일염을 사용한 된장보다 구운 소금과 죽염을 사용한 것이 억제효과가 컸으며 1 mg/plate와 5 mg/plate 농도에서 1회 구운 죽염이 9회 구운 죽염을 첨가한 된장 추출물보다 항돌연변이 효과가 크게 나타났다. SOS chromotest에서도 1회 구운 죽염 된장은 다른 소금 된장 추출물에 비하여 MNNG의 돌연변이를 가장 크게 억제하였다. 이상의 결과에서 된장을 담글 때 사용하는 물과 소금의 종류에 따라 항돌연변이 효과는 차이가 있는 것을 알 수 있었으며 향후 된장에 물과 소금이 미치는 다양한 생리적 기능에 대한 더 많은 연구가 필요할 것으로 사료된다.
이 연구에서는 오이 methanol 추출물과 methanol 추출물의 분획물에 대한 항돌연변이 효과와 항미생물 효과를 조사하였다. Ames 실험계를 이용한 항돌연변이 효과는 Salmonella typhimurium TA100에서 간접 돌연변이원인 aflatoxin B$_1$에 대해 methanol 추출물은 1.25~5.0%에서 11~70%의 항돌연변이 활성을 나타냈었고, 직접 돌연변이원인 MNNG에 대해서는 46~85%의 항돌연변이 활성을 나타내었다. 또한 methanol 추출물을 분획하여 얻은 각 용매별 획분 중에서는 aflatoxin B$_1$에 대해서는 hexane 획분이, MNNG에 대해서는 butanol획분이 89% 및 95%로 가장 큰 항돌연변이 효과를 나타내었다. 항미생물 효과의 조사에서는 오이 metanol 추출물이 실험균주 11종 중 8종의 세균에 대하여 항균활성을 나타내었다. 이 중 K. pneumonia KCTC 2208, P. aeruginosa KCTC 2004가 clear zone 13 mm로서 가장 항균 활성에 민감한 균종으로 나타났다. 각 용매별 획분 중에서는 hexane 획분은 V. parahaemolyticus KCTC 2471에 대하여 항균효과를 보였고, chloroform과 ethyl acetate 획분에서도 약하게 항균 효과를 보였다 Methanol추출물의 농도에 따른 균증식억제 효과의 결과로는 V. parahaemolyticus가 가장 낮은 최소증식억제농도를 보여 500 ppm으로 나타났다. Methanol 추출물의 살균효과는 P. aeruginosa에서 1%의 농도가 0.5%의 농도에 비하여 약 10배정도의 빠른 살균효과를 보였다. 즉 초기 균수의 90%균을 살균하는데 1%와 0.5%의 농도에서 각각 26분, 250분이 소요되는 것으로 예측되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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