Park Seung-Moon;Choi Eun-Jin;Kwon Tae-Ho;Jang Yong-Suk;Yoo Han-Sang;Choi Woo Bong;Park Bong-Kyun;Kim Dae-Hyuk
Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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제10권4호
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pp.362-366
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2005
Actinobacillus pleuropneumoniae is an important pig pathogen, which is responsible for swine pleuropneumonia, a highly contagious respiratory infection. To develop subunit vaccines for A. pleuropneumoniae infection, the Apx toxin genes, apxI and apxII, which are thought to be important for protective immunity, were expressed in Saccharomyces cerevisiae, and the induction of immune responses in mice was examined. The apxI and apxII genes were placed under the control of a yeast hybrid ADH2-GPD promoter (AG), consisting of alcohol dehydrogenase II (ADH2) and the GPD promoter. Western blot analysis confirmed that both toxins were successfully expressed in the yeast. The ApxIA and ApxIIA-specific IgG antibody response assays showed dose dependent increases in the antigen-specific IgG antibody titers. The challenge test revealed that ninety percent of the mice immunized with ApxIIA or a mixture of ApxIA and ApxIIA, and sixty percent of mice immunized with ApxIA survived, while none of those in the control groups survived longer than 36 h. These results suggest that vaccination of the yeast expressing the ApxI and ApxII antigens is effective for the induction of protective immune responses against A. pleuropneumoniae infections in mice.
B형간염 바이러스 연구에 관한 최근의 주제는 혈중 B형간염 표면항원농도(HBsAg)를 예후 판정의 지표로 활용하는 것이다, 본 연구에서는 B형간염에 대한 자가진단을 목적으로 하여 컴퓨 터 상 분석 기법을 사용하는 HBsAg에 대한 정량적 면역크로마 토그래피 측정법을 개발하였다. 본 방법을 사용하였을 때 측정 된 integrated optical density(IOD)은 2~200 ng/mL의 범위 내에 서 표준 HBsAg 농도의 log값에 비례하여 증가하였데, ELISA 측정법은 0.1~100 ng/mL의 범위 내에서 표준 HBsAg 농도의 log값에 비례하여 증가하였다. 3개의 혈청 겸제를 가지고 두 가 지의 측정법으로 각각 시험하여 표준곡선에 대입하였을 때 동일 한 농도를 나타내 었는데 그 값이 각각 9,000, 7,000, 4,000 ng/mL 이었다. 또한 컴퓨터 상 분석 기법을 사용하는 HBsAg에 대한 정량적 면역크로마토그래피 측정법으로 동일 겸체를 5회 반복 시험하였을 때 측정된 IOD값이 재현성이 있었으며, 변이계수가 1.38 ~ 6.30% 이내였다.
Insulin 83건을 검사 대상으로, 장비 WIZARD(PerkinElmer, USA)와 DREAM- G-10(Shinjin, KOREA)의 Graph Algorithm 중에 표준곡선과 신뢰성이 가장 높은 Excel의 추세선은 다항식 추세선이다. 다음으로 다항식 추세선식을 이용하여 표준농도 1개씩을 제외하여 표준농도의 회귀식에 미치는 영향을 비교한 결과 최고농도($315{\mu}IU/m{\ell}$)의 평균값이 표준물질 6개로 실시한 표준 회귀식을 이용한 평균값과 비교하여 49%나 평균값이 저하되었다. 단 낮은 농도에서는 영향이 미비하였다. 마지막으로 WIZARD의 Point to Point형식과 DREAM G-10의 Point to Point형식이 적합성이 높고, DREAM G-10(Point to Point)와 Excel 다항식 추세선이 적합성이 높으며, Excel 다항식 추세선과 DREAM G-10(2'nd order Polynomial)의 적합성이 높다.
1. S. choleraesuis, S. typhimurium, S. dublin에서 순수 분리한 flagella protein의 분자량은 각각 53.4 kDa, 51 kDa, 54.6 kDa으로 나타났다. 2. 산란계의 혈청 중 항체역가 수준은 면역 후 2주경 부터 급격히 증가하기 시작하였고 난황 중 항체역가의 수준은4 주경 부터 급격히 증가하기 시작하였다. 6주와 8주경 이 후 부터는 난황항체역가가 혈청 항체역가보다 높은 수준을 유지하거나 계속 증가하였다. 3. Salmonella flagella protein을 면역원으로 산란계에 면역하여 생산된 난황항체는 150,000배 희석 시 각각의 Salmonella 균주에서 특이적으로 각각의 항원에 반응하였다. 4. 난황 1 ml당 IgY의 함량은 약 31 mg∼33 mg이었으며, IgY의 함량은 단백질 함량의 약27%를 차지하는 것으로 나타났다. 5. 실험실조건하에서 난황항체의 항원결합능력을 조사한 결과 동결건조한 WSF을 2∼4 mg/ml첨가 시 균체의 농도가 $10^{9}$ CFU/ml에서 $10^{5}$∼$10^{6}$ CFU/ml로 급격하게 감소하였다.다.
Oroxylum indicum has long been used in Asian traditional medicine to prevent and treat respiratory diseases, diabetes, diarrhea and other conditions. Oroxylin A is a flavone that is present in Oroxylum indicum and in Scutellaria baicalensis. Because the root extracts of both plants have been shown to have anti-allergic effects, the authors investigated whether oroxylin A is likely to have beneficial effects on allergic asthma using female Balb/c mice and rat RBL-2H3 mast cells. Antigen-induced degranulation was measured in vitro by measuring b-hexosaminidase activity. A murine ovalbumin-induced allergic asthma model was used to test the in vivo efficacy of oroxylin A. Sensitization and challenge of ovalbumin induced allergic asthma responses, the accumulations of eosinophils and Th2 cytokine levels in bronchoalveolar lavage fluid and lung tissues. Oroxylin A administration decreased numbers of inflammatory cells, especially eosinophils, and reduced the expression and secretion of Th2 cytokines, including IL-4 and IL-13, in lung tissues and bronchoalveolar lavage fluid. Histologic studies showed oroxylin A reduced inflammatory signs and mucin production in lungs. These findings provide evidence that oroxylin A has potential use as an anti-allergic therapeutic.
This study was directed at inducing the production of antibodies by immunizing heifers with bovine sperm antigen and on measuring the serum antibodies using indirect immunofluorescence assay(IFA) and agglutination test. The effect of antisperm antibodies on fertilizing capacity of bovine spermatozoa was evaluated. 1. Three heifers between 12- and 15- month old were immunized with bovine spermatozoa or phosphate-buffered saline. In heifers immunized with bovine spermatozoa serum IgG level was highest between 3 weeks and 5 weeks postimmunization detected by IFA. The antibody levels persisted through week 7 and slowly declined until week 20 and then antisperm antibodies were localized on spermatozoa. The fluorescent antisperm antibodies were detected at 2~20 weeks and at 6~9 weeks postinoculation on acrosome and tail, respectively. Among 21 sera from repeat breeder cows, only one cow has shown positive antisperm antibody response detected by IFA. 2. In spite of vital rate of bovine sperm after swim-up was not significantly affected by different concentration of antisperm antibodies in sera, the numbers of bovine sperm after swim-up were significantly reduced in proportion to the increased concentration of antibodies. Above 1/512 dilution of antibody neither influence on vital rate and numbers of bovine sperm nor sperm agglutination after swim-up. The study has also shown that the vital rate and number of sperm after swim-up and capacitation were also significantly reduced by the addition of antisperm antibodies. Although antisperm antibodies did not influence on the acrosome reaction rate of sperm during swim-up, did significantly reduce the sperm acrosome reaction rate after capacitation. The studies have resulted that the bovine antisperm antibodies can prevent the sperm motility by agglutination and block the capacitation and acrosome reaction of bovine sperm.
The circulation and infection of avian influenza virus (AIV) in zoos and backyard flocks has not been systematically investigated. In the present study, we surveyed the birds including those in live bird markets (LBMs) and evaluated co-circulation of AIVs among them. Overall, 26 H9N2 AIVs and one H6N2 AIV were isolated from backyard flocks and LBMs, but no AIVs were isolated from zoo birds. Genetic analysis of the HA and NA genes indicated that most of the H9N2 AIVs showed higher similarities to AIVs circulating in domestic poultry than to those in wild birds, while the H6N2 AIV isolate from an LBM did to AIVs circulating in migratory wild birds. In serological tests, 15% (391/2619) of the collected sera tested positive for AIVs by competitive-ELISA. Among them, 34% (131/391) of the sera tested positive for AIV H9 antigen by HI test, but only one zoo sample was H9 positive. Although AIVs were not isolated from zoo birds, the serological results indicated that infection of AIVs might occur in zoos. It was also confirmed that H9N2 AIVs continue to circulate and evolve between backyard flocks and LBMs. Therefore, continuous surveillance and monitoring of these flocks should be conducted to control further epidemics.
Mohd Lila Mohd Azmi;Field, Hugh-John;Frazer Rixon;Lauchlan, John-Mc
Journal of Microbiology
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제40권1호
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pp.11-19
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2002
Mice immunized with equine herpesvirus type-1(EHV-1) L-particles skewed a significant increase (p<7.75) in serum antibody titers. Upon a booster dose four weeks lateral antibody titers increased significantly. Interestingly, immunization via intravenous or intramuscular route induced significantly higher (p<0.75) antibody titers. However, mice iummunized with UV-treated L-particles, visions or immunization via intranasal route induced lower antibody titers. Upon challenge inoculation with wildtype EHV-1, our data showed there was a poor correlation between antibody titers and protection against virus replication. Therefore, the role of cell-mediated immunity Inwards protection was investigated. As predicted, the strongest cell-mediated immunity, as measured by delayed-hypersensitivity test, was detected in mice immunized with live virus particles. The magnitude of cell-mediated immune response correlated with the efficacy of L-particles as immunizing agent. The highest efficacy, as indicated in mice immunized via intranasal routed was highly correlated with cell-mediated immunity. A similar phenomenon was also demonstrated in mice immunized intranasally with UV-treated L-particles. However, the degree of protection was reduced when mice immunized intravenously or intramuscularly with UV-treated L-particles. In conclusion, protection conferred in these animals was highly implicated by immune cells and the least by antibodies. The route of immunization and the nature of the antigen also contributed to the efficacy of L-particles as immunizing agent. In contrast to that of herpes simplex virus type 1, our data showed EHV-1 non-infectious L-particles are highly suitable for immunization of the host against EHV-1 disease.
Early diagnoses of pregnancy for animal such as swine and bovine is extremely important to increase income of a farmhouse and for the management of farm. For the development of immunoasaay system of pregnancy in swine, we report a competitive heterologous enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) for the direct measurement of oestrone sulfate (E1S) in diluted urine using anti-E1G (glucuronide) monoclonal antibody which cross react with ElS. The principle of assay was based on the typical solid-phase competitive ELISA methods using E1G-HRP (horseradish peroxidase) as a tracer and E1S for standard. The method had a reasonable sensitivity for the detection of E1S with 0.15 ng/ml as a detection limit. The intra-assay and inter-assay precisions were raging coefficient of from 8.50~9.67% and 8.50~9.87%, respectively, which were quite acceptable. In a field trial with a group 37 sows (18 non-pregnancy and 19 pregnancy sows) after day 29~30 post service, the concentration of E1S were determined to be below 30 ng/ml in all non-pregnancy group and over 48 ng/ml in pregnancy group except one sample. The method described here, heterologous ELISA for the measurement of E1S in urine is good enough for monitoring the early pregnancy test of swine.
Serum hepatitis is still recognized as a major public health problem in many countries. The most common etiologies are acute viral hepatitis A and B, and hepatitis B virus (HBV) was known as the pathogen of serum hepatitis. since the HBV causes chronic hepatitis. HBV infection is hyperendemic in Korea. It is known that 8% and 1% of the Korean population is chronic carriers of HBV. The total number of 487 serum specimen (old people's home 190, causal ward-Daegu hope village 297) were collected at the laboratory of Department of Clinical Pathology of Daegu medical center. The laboratory tested the specimen to detect for hepatitis B surface antigen (HBsAg) and anti-HBs using reverse passive hemag-glutination (RPHA) and passive hemagglutination (PHA) method between April, 2011 and June, 2011. In one-step test, HBsAg and anti-HBs of Humasis were used. The positive rate for HBsAg was 6.80% (33/487), and the rate in male was 6.93% (19/274) higher than that of female 6.57% (14/213). In the positive rate of HBsAg by age group, the highest positive rate group was in the group of 40-49 years in male (12.0%), and 50-59 years in female (17.65 %). The overall positive rate for anti-HBs was 42.70% (208/487), showing the higher positive rate of 43.80% in male (120/274) than that of 41.30% (88/213) in female. The highest positive rate of anti-HBs in age group was the 40-49 years group in male (52.00%) and the group of under 29 in female (66.67%).
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[게시일 2004년 10월 1일]
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