• 한국양식학회지
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• 제19권1호
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• pp.33-39
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• 2006

Anticoagulant activities of a fermented edible brown alga, Laminaria ochotensis was investigated. L. ochotensis was fermented with 15% sugar (w/v) at $25^{\circ}C$ for 10 weeks. Anticoagulant activity was measured from the supernatant of algal mixture at biweekly intervals up to $10^{th}$ week by activated partial thromboplastin (APTT), prothrombin time (PT) and thrombin time (TT) assay using citrated human plasma. Sample having high APTT activity $(6^{th}\;week)$ was filtered, ethanol precipitated and freeze-dried. The polysaccharide compound having anticoagulant activity was purified by DEAE ion exchange chromatography followed by Sepharose-4B gel filtration chromatography. Anticoagulant activity, polysaccharide concentration, and heparin like activity were determined for the collected fractions by APTT, $phenol-H_2SO_4$, and glycosaminoglycan assay, respectively. The anticoagulant activity assay showed that the activity was increased up to $6^{th}$ week, and decreased thereafter. The concentration of our purified compound was $31.0{\mu}g/ml$ and showed higher APTT activity than commercial heparin. At the same concentration of $31.0{\mu}g/ml$, the heparin showed 186.5 sec activity while our purified compound showed an activity of 386 sec. Single spot on agarose gel electrophoresis showed that the compound was purified and polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) results revealed that the molecular mass of the purified polysaccharide compound was between 60 and 500 kDa. Therapeutic interest of the algal polysaccharide as an anticoagulant has recently been in highlighted. This purified anticoagulant compound from fermented L. ochotensis can be used as a model for anticoagulant agent or could be developed as an anticoagulant agent. This study can be extended to identify the structure and chemical composition of the purified polysaccharide, and to establish a relationship between structure and the function of the identified anticoagulant compounds.

• Archives of Pharmacal Research
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• 제25권5호
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• pp.669-674
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• 2002

Glycosaminoglycans (GAGs) were isolated from the porcine testis, and their immuno-modulating and anticoagulant activity was investigated. From anion exchange chromatography (Dowex Macropolous Resin) used for further isolation of porcine testis GAGs (PT-GAGs), two fractions (PT-GAG-1.5 and PT-GAG-16) eluted by different salt concentration were obtained. In immunomodulating activity test, PT-GAG-1.5, but not PT-GAG-16, significantly enhanced the growth of murine peritoneal macrophages. In addition, treatment with PT-GAG-1.5 induced the production of cytokines, interleukin-1$\beta$ (IL-1$\beta$), interferon-${\gamma}$ (IFN-${\gamma}$) and tumor necrosis factor-$\alpha$ (TNF-$\alpha$), from murine microphages. Unexpectedly, both of PT-GAGs had no effect on the growth of murine splenocytes. The anticoagulant activity of PT-GAG-1.5 and PT-GAG-16 was examined by activated partial thromboplastin time (aPTT) assay and thrombin time (TT) assay. Both of PT-kGAGs significantly increased the clotting times of aPTT and TT in a dose-dependent manner. The anticoagulant activity of PT-GAG-16 was found to be higher than that of PT-GAG-1.5. These results suggest that PT-GAGs possess biological activities such as immunomodulating activity and anticoagulant activity.

• 한국식품과학회지
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• 제36권6호
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• pp.1008-1013
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• 2004

국내산 주요 갈조류 18종의 추출용매 및 온도에 따른 항혈액응고 활성을 측정한 결과 미역, 다시마, 감태, 대황, 곰피, 톳, 괭생이 모자반의 열수 추출물의 APTT가 190.0초 이상으로 활성이 높았으며, 이 때의 추출온도는 $90^{\circ}C$였다. 감태의 에탄올 불용성분의 항혈액응고 활성은 $500\;{\mu}g/mL$에서 에탄을 가용성 물질에 비하여 2배 이상 증가하였으며, 에탄을 불용성분의 분자량에 따른 항혈액응고 활성은 $100\;{\mu}g/mL$ 농도에서 EKJ-eim 1(100 kDa 이상)이 190초 이상으로 EKJ-eim 2(100-50 kDa) 및 EKJ-eim 3(50-10 kDa)에 비해 좋았으며, 이 분회의 화학적 조성성분은 fucose, xylose, mannose, galactose, glucose, sulfate로 구성되어 있으며, 몰비는 1 : 0.05 : 0.10 : 0.15 : 0.17 : 1.46으로 2 mole의 fucose에 3 mole의 황산기가 결합되어 있는 산성다당임을 확인하였다.

• 한국식품영양과학회지
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• 제29권2호
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• pp.335-341
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• 2000

허브를 비롯한 식용되는 채소류로부터 항응고 활성을 검색하기 위하여 93종을 대상으로 냉수(Fr. I), 메탄올(Fr. ll), 열수(Fr. lll)추출물을 각각 조제하였다. 내인성 경로에 작용하는 항응고 활성은 수용성 획분인 Fr. I과 Fr.lll를 대상으로 activated partial thromboplastin time(APTT)으로 검색한 결과 양파, 마늘, 정향, 쑥, 울금 등이 높은 활성을 보였으며, 외인성 경로와 공통경로에 작용하는 항응고 활성은 저분자임을 감안하여 Fr. I과 Fr. II를 대상으로 각각 prothrombin time(PT) 과 thrombin time(TT)으로 검색한 결과 민트, 이탈리안 시즈닝, 로즈메리, 타라곤, 울금, 백리향, 와사비는 공통경로에 항응고 활성을 나타내였으나 외인성 경로에 단독으로 항응고 활성을 나타내는 시료는 없었다. 1, 2차 검색 결과 가장 높은 항응고 활성을 보인 정향(Eugenia caryophyllate, clove)을 대상으로 산지를 달리하여 항응고 활성을 검색한 결과 홀랜드산 정향의 활성이 가장 높았다.

• 생약학회지
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• 제30권4호
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• pp.409-412
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• 1999

The in vitro anticoagulant and fibrinolytic activities of crude extract from insects which have been used as traditional medicines. The extracts of Formica, Huechys and Eupolyph-aga/Steleophaga prolonged activated partial thromboplastin time and thrombin time compared to the value of the control. The fibrinolytic activity of insect extracts was also tested by fibrin plate method. We found that the extracts of Cicadae Periostracum, Eupolyphaga/Steleophdga, Mantidis $O{\ddot{o}}otheca$ and Huechys directly could hydrolyze the fibrin clot without the activation of plasminogen by plasminogen activators.

• 한국식품영양과학회지
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• 제31권5호
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• pp.917-923
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• 2002

청각에서 분리된 항응고 다당류의 혈액응고 저해기작을 검토하였다. 항응고성 다당 획분(CF-30 IV-ii, CF-30-IV)은 내인성 경로와 공통 경로에서 농도 의존적으로 작용한다. 항응고획분(CF -30-IV-ii)은 내인성 경로의 factor asaay시 lupus an ticoagulant 항체의 활성 에 영 향을 주지 않았으나 응고과정 중 factor Ⅷ, Ⅸ, \ulcorner, \ulcorner의 활성을 저해하였다. CF-30-IV-4-ii는 농도의 존적으로 fibrine을 생성시키지 않음으로써 thrombin에 직접 작용하지 않는 antithrombin m의존적 항응고 활성 기작을 보였다. 청각의 항응고 활성은factor assay와thrum bin의 저해 양식을 고려해볼 때 antithrombin III의 활성을 증대시켜 혈액응고 인자 중 serine proteinase의 활성을 저해함으로써 항응고 활성을 나타내는 물질로 판명되었다. CF-30-IV획분의 in vivo 활성을 측정한 결과 꼬리정 맥주사에 의해 150 mg/kg의 농도로 마우스에 투여시 thrombin에 대한 100%의 항치사성 효과를 나타내었다 또한 CF-30-IV를 마우스의 꼬리 정맥에 주입하고 혈액을 채취 ex vivo상에서 항응고 활성을 측정한 결과, 생체내에서 100mg1kg의 농도까지도 시료량에 의존하는 항응고 활성을 보였다

• Journal of Applied Biological Chemistry
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• 제63권4호
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• pp.439-442
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• 2020

강화 사자발약쑥(Artemisia princeps Pampanini)으로부터 얻어진 50% 에탄올 추출물의 항산화 및 혈장 항응고 활성을 확인하였다. 약쑥 추출물의 폴리페놀과 플라보노이드 함량은 각각 106.9±3.3 및 34.1±0.4 mg/g-추출물로 나타났다. 약쑥 추출물은 농도 의존적으로 유리라디칼, 양이온라디칼 및 아질산염을 소거하였고, 우수한 환원력 및 지질과산화 억제효과를 나타내었다. 또한 약쑥 추출물은 농도 의존적으로 혈액응고의 공통경로를 저해하는 혈장 항응고 활성을 나타내었다.

• Journal of Applied Biological Chemistry
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• 제64권2호
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• pp.121-125
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• 2021

연잎(Nelumbo nucifera)의 60% (v/v) 에탄올 수용액 추출물의 항산화, 혈장 항응고 및 α-glucosidase 저해 효과를 in vitro에서 확인하였다. 연잎 추출물의 수율은 35.3±1.1%이었고, 폴리페놀 화합물 함량은 186.2±5.2 ㎍ gallic acid equivalents/mg으로 나타났다. 연잎 추출물은 농도에 비례하여 유리라디칼, 양이온라디칼 및 아질산염을 효과적으로 소거하였고 뛰어난 환원력을 보유하고 있었다. 또한 연잎 추출물은 농도 의존적으로 우수한 혈장 항응고 및 α-glucosidase 저해 활성을 나타내었다.

• 약학회지
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• 제33권5호
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• pp.273-279
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• 1989

2,3-Dichloro-1,4-naphthoquinone was reacted with o-fluoroaniline, p-sulfadiazine, p-acetoanline, N,N-dimethyl-1,4-phenylenediamine as a nucleophilic substitution to form 2-chloro-3-(N-arylamino)-1,4-naphthoquinones (1.-6.) in good yield. 2,3-Dibromo-1,4-naphthoquinone was also reacted with o-fluoroaniline, m-aminobenzoic acid, m-chloroaniline, morpholine, p-acetoaniline, N,N-dimethyl-1,4-phenylenediamine as a nucleophilic substitution to give 2-bromo-3-(N-arylamino)-1,4-naphthoquinones (7.-12.). These new compounds are expected to have a biological activities such as anticoagulant, cytotoxic.

• 대한약학회:학술대회논문집
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• 대한약학회 2003년도 Proceedings of the Convention of the Pharmaceutical Society of Korea Vol.2-2
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• pp.98.2-99
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• 2003

Introduction: We previously reported that a new glycosaminoglycan, acharan sulfate (AS) from the African giant snail Achatina fulica showed anticoagulation activity in vitro, but it was much less than that of heparin. In the present study, the anticoagulant activity of AS was investigated in vivo. Methods: AS and heparin were administered to rats in various concentrations and anticoagulant activities were measured. Both were also compared in thrombin-induced Results: Intravenous administration of acharan sulfate prolonged the coltting time (APTT) in mice and rats in a dose-dependent manner. (omitted)