Tapetum is the tissue in which nutrients are supplied to the developing microspore in angiosperm anther. At tetrad stage of microspore, the tapetal cells show maximum development, but they began to be degenerated by apoptotic programmed cell death (PCD) after sporopollenin accumulation in the pollen wall. The initial step of PCD was observed as vacuolar fusion. After that, cytoplasmic condensation and nuclear fragmentation followed. Lipid droplets are degenerated at a relatively late stage of PCD, and orbicular bodies are the last remains in tapetal cells. The cell wall was relatively resistant against vacuolar enzymes in tapetal cells; it was considered the last structure remaining during programmed cell death of tapetum in ginseng anther.
This experiment was carrid out to investigate the effect of organic fertilizer and plant growth regulators application on the growth and quality of tomato. The results are summarized as follows. 1. Plant height of tomato was recorded highest when chemical fertilizer plus organic fertilizer was applied, and did not have significant effects in number of leaf. But stem diameter was positively effected by chemical plus organic fertilizer application than chemical fertilizer alone. 2. Flower formation, flower weight, anther weight and ovary weight were generally increased by organic fertilizer application. 3. Fruit-set and number of flower were significantly increased by organic fertilizer application. 4. Deformity fruit was the lowest rate at chemical plus organic fertilizer application when it was 14.7 percent, and it was increased by chemical fertilizer application. 5. Days of ripening was slightly delayed by organic fertilizer application and also flowering date shortened by chemical fertilizer application. 6. Plant growth regulators had positive effects on number of flower, flower weight, anther weight, and ovary weight, and variations of their effect by cluster were apparent. 7. Fruit-set was increased by 2,4-D 10ppm and BA 20ppm treatments but was decreased by treatments of Ethephon 10ppm and control. 8. By the BA 20ppm and 2,4-D 10ppm treatments, the rate of deformity fruit was decreased and fruit ripening date was also shortened.
In order to induce immature pollen derived plants, anthers of Ranunculus japonicus Thunb. were cultured on Murashige and Skoog's medium supplemented with various combinations of auxins and cytokinins. The combinations of NAA and BA were more effective than those of 2,4-D and kinetin in the formation of calli and embryos. Up to 5t5% of the anthers cultured on medium containing 0.5 mg/L NAA and 1.0 mg/L BA gave rise to plantlets. The most suitable stage for anther culture in the induction of calli and/or embryos from immature pollens was at the uninucleate and early binucleate stage (3 days before anthesis). Immature pollens developed into embryos by repeated division of the vegetative nucleate after 60days of culture.
When haploid plant would be appeared by the anther culture, the large quantity of young plant multiplied maternal inheritance and the same pure line rapidly in the short length of time, which will be effected to cut down much expences efforts and time for the production of seeds or seedlings. Therefore, the development of the technique for this would be much profited in the country industry. In the late of a few years studies were early attempted in this field, but up this time there were a few success of plants only and none of perennial plant. In this status of the country condition required earnestly for the development of the green industry, this researcher attempted to culture the anther of late uninucleate microspore or early binucleate microspore of the Prunus mume and other three psecies, economic trees estimated specially economic, on the place of Modified Murashige and Skoog's medium supliment with Kinetine, 2.4-D, and N.A.A for inducing haploid plants. The obtained results were as follows: 1. 2,000 anthers were cultured and there were shown that 2N callus in Prunus mume had 82 as 4.1%, 2N callus in Prunus tomentosa 15 as 0.8%, 2 N callus in Prunus salisina 75 as 4% 2. N callus had shown 40 as 2% from Prunus armeniaca var. ansu only, and the other trees showed all 2N callus. 3. Callus had appeared in every tree but 2N callus appeared was all filaments and there showed from only connective tissue N callus appeared was all from anther locule inside. 4. Then Prunus armeniaca var. ansu only was not callus of somatic anther tissue origin, but as there was callus origined from microspore which was changed in to swollen microspores or polynucleate microspores, it was certained to need haploid plant.
In order to contribute to the Korean tea-plant culture and tea industry by means of increasing the production of tea-plants, I have performed the tissue culture of the organs of the anther, leaf and stem. As for the culture-material, I have used the anther of tea (Thea sinensis) at the tetrad uninucleate microspore stage and used medium of modified Murashige and Skoog as the basal medium supplemented with the growth regulators of NAA and 2, 4-D, yeast, kinetin and others at various concentrations. As for the handling of material, I have followed the common methods of sterilization and microtoming and paraffine imbedding method and observed systematically periodic changes of the microspores in culture. I have divided the leaf, stem and root into segments and sterilized them and used the modified Murashige and Skoog as the basal medium and observed the differentiation of roots and callus and the results are as follows. 1. In case of anther, I have found 2n callus was found in 30 out of 100 segments in M2 medium. 2. The differentiation of roots appeared in 24.5% of total leaf segments cultured and in 50.5% of stem and in 43.9% of root. 3. When the differentiation of stem in different parts was observed, the most frequent differentiation was found in the second part of all the 4 parts. 4. The most frequent formation of callus was noticed from the anther-walls in case of anther culture and from the veins in case of leaf culture. It is concluded that the seedlings of tea-plant could be multiplied most by means of tissue culture of the second part of the tea-plant stem and reduction in the expenditures of tea-plant propagation was possible through tissue culture.
In order to substract the time and cost of propagation for inducing the haploid plants per each species. 500 anthers of late uninucleate microspore on early binucleate microspore stage of Robinia pseudoacacia (Fuel tree) Punius granatum (Ornamental tree). Aleurites fordii (Faty tree) and Styrax japonica (Silvicultural tree) were cultured on the modified Murashige and Skoog's medium supplemented with Kinetin, 2.4-D and NAA as growth regulators. And I observed the samples of cultured anthers under the microscope which were made by Microtoming method and Paraffin method. The results were summarized as follows: 1) Among 500 cultured anthers per each species, anther numbers inducing the diploid callus were as follow: Styrax japonica 20 (4% for the species total); Aleurites fordii 10 (2% for the species, total) and Punica granatum 45 (9% for the species total) were showed. 2) 2n Callus were induced from anther wall. but haploid callus were induced from anther locule. 3) Haploid callus were induced only in 25 anthers (5% for the species total) of Robinia pseudoacacia. 4) These haploid callus were not originated from body cell of anther wall tissue, but from reduced microspores, 5) Since already reported many herbaceous haploid plants were induced from the callus which were originated from reduced microspores, I conclude that the anther of woody plant which induced the haploid callus also will be cultured haploid plant.
In order to investigate the effects of low temperature pretreatment of floral bud and plant growth regulators on anther-derived callus and shoot differentiation, anthers were cultured on 1/2 MS medium supplemented with 2,4-D, NAA, BA and TDZ. This plant depends on the plant growth regulators, for these anthers couldn't respond on 1/2 MS medium without plant growth regulators. 2,4-D was a prerequisite substance in this experiment, especially 52.6% of callus formation on MS medium with 2.0mg/L 2,4-D alone. However, the optimum medium was on 1/2 MS medium with 0.1 mg/L 2,4-D and 1.0mg/L BA for continuous growth and shoot differentiation from the anther. Calli derived from on MS medium with 2.0mg/L 2,4-D transferred to the 1/2MS medium with TDZ and BA. TDZ were less superior to BA, only one anther could produce shoot on MS media with 1.0mg/L TDZ. On the other hand, when the calli transferred to the medium with 3.0mg/L BA, adventitious shoots were proliferated, subsequently, regenerated shoots elongated from the embryogenic calli. After floral buds of one week before anthesis were incubated at $5^{\circ}C$ refrigerator for eight or fifteen days, anthers seperated from floral buds were cultured on 1/2MS medium supplemented with 0.1mg/L 2,4-D and 1.0mg/L BA. Callusing and shoot differentiation on anthers from treated at $5^{\circ}C$ for eight days were more effective than those of fifteen days or control.
Park, Tae Il;Kim, Young Jin;Jeoung, Sun Ok;Kim, Hyun Soon;Seo, Jae Hwan;Yun, Song Joong
Korean Journal of Breeding Science
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v.40
no.1
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pp.31-38
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2008
This experiment was carried out to improve the anther culture efficiency of barley (Hordeum vulgare L.). Callus induction rates from anther cultures of the five domestic naked barley and four unhulled varieties ranged from 0 to 5.6%, and plant regeneration rate to callus was 30.4% in the donor plants grown in a greenhouse during winter, among which the green plant regeneration rates ranged from 0 to 4.4%. Plant regeneration rate was 30.4% in the donor plants grown in a greenhouse during winter, whereas 21.3% in the normal field condition in spring. In addition, callus induction rates were 19.2% in plants grown in a normal field and 7.2% in drought-stressed condition, respectively. Being Considered the anther culture efficiency affected by the sampling time, the optimum sampling stage of anthers was 3~4 days before heading when the length between the 1st and 2nd auricles reaches 5 to 10 cm and at the uninucleate of pollen which the tip of the 2nd auricle aligns with the middle of panicle in the leaf sheath. Best callus induction rates came from the anthers stored at $4^{\circ}C$ for 3 weeks in a 10 to 15 cm diameter polyethylene bag with 5 to 10 panicles and Duwonchapssalbori and Saessalbori showed the higher induction rate of 4.8% and 1.7%, respectively.
Suh, Young Ki;Youn, Goang Hyeon;Cho, Young Hwan;Paek, Kee Yoeop
Horticultural Science & Technology
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v.17
no.4
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pp.470-472
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1999
When the type and ratio of male-sterile plants in $F_1$ hybrids collected from several seed companies were investigated, there were differences in the male-sterile type depending upon region, seed company and variety group. The differences were inferred due to the easiness in breeding of maintainer line among the variety groups. American seed companies mainly used petaloid type male sterility with Imperater group varieties. European companies used brown anther type male sterility mainly with Nantes group but some companies used petaloid type also in varieties that were different from Nantes group. Asian companies (Japan, Korea) used both types with Chantaney and Kuroda group varieties, but one type was mainly used depending on individual seed company. Only one type of male-sterility in one variety was observed and the results were agreed well with other's results that male-sterility type was determined by cytoplasm factor. Some breeding lines were backcrossed to both types of cytoplasm (Sa, Sp) for maintainer line selection. We could select 15 maintainer lines from 20 lines in petaloid cytoplasm (Sp) and 3 from 4 lines in brown cytoplasm (Sa). In petaloid cytoplasm, maintainer lines can be selected at considerably high frequency. But in brown anther cytoplasm, the used materials are too restricted to tell general frequency maintainer lines.
The effects of media, growth regulators, low-temperature treatments, culture temperature and light were investigated to improve the callus induction and growth in the anther culture of Comus officinalis Sieb. et Zucco. The frequency of callus induction was more effective on WPM medium than MS medium, and it was highest as 54% in WPM medium supplemented with Img/L NAA. Callus growth was stimulated on MS medium supplemented with 2mg/L NAA. Effect of temperature and light on the callus induction and growth was highest as 62% in the treatment for 16/8 hrs. (light/dark) at $25^{\circ}C$ Effect of low - temperature treatment on callus induction was highest as 19. 5% in the treatment for 36 hrs. at $4^{\circ}C$. For organization, green cells and rootings were promoted on MS medium supplemented with O. 5mg/L 2,4-D and 1 mg/L kinetin. The prevention of callus browning was effective on the medium containing $3{\sim}5mg/L$ ABA or 5mg/L $AgNO_3$. The supplement of ABA or $AgNO_3$,were maintained callus activity for 4-5 weeks and they were promoted the development of green cells.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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