Brevibacterium ammoniagenes ATCC 6872를 변이하여 얻은 adenine-guanine 및 $\beta$-alanine 영양요구성(營養要求性)이고 5'-XMP를 다량 생산하는 변이주 D-1550-40을 사용하여 발효배지성분(醱酵培地成分)의 최고농도(最高濃度)와 각 성분간의 상호작용효과(相互作用效果)를 검토하였다. 5'-XMP 축적(蓄積)에 필요한 adenine 및 guanine의 최적(最適) 농도(濃度)는 각각 75mg/l이었으나 생육(生育)에 대한 최적농도(最適濃度)는 이 보다 높은 100mg/ml이었고 그 이상의-농도에서는 5'-XMP 축적에 심한 저해를 초래하였다. 이러한 현상은 biotin을 $100{\mu}g/l$ 이상 첨가하거나 casamino acid를 0.3% 이상 첨가함으로서 배제할 수 있었다. 5'-lMP 발효의 경우와 마찬가지로 무기인산염(無機燐酸鹽)과 마그네슘은 5'-XMP 축적에도 $1.0{\sim}1.5%$1.5%가 적당(適當)하였다. $MnSO_4$의 농도가 $0{\sim}5mg/l$의 범위안에서 증가함에 따라 균증식과 5'-XMP의 축적은 촉진되었으나 그 이상의 농도에서는 변화가 없었고 정상상태를 나타내었다. Adenine과 guanine 각 100 mg/l, $MnSO_4\{cdot}7H_2O5mg/l 및 biotin $100{\mu}g/lg$가 함유된 발효배지에서 배양한 결과 4일후 60.5mg/ml의 5'-XMP가 측적되었으며, 5'-XMP의 생성활성(生成活性)은 균체량(菌體量)에 비례하여 배양 2일 내지 3일에서 가장 높았다.
바이오틴을 피부에 전달하기 위해 고압균질기를 사용하여 바이오틴과 세라마이드를 모두 함유하는 에토좀에 대하여 연구하였다. 바이오틴이 주된 성분으로 사용되었으며, 세라마이드 NP는 인지질 이중층의 지지체로 활용되었다. 바이오틴은 수용성 내부에 포획되었고, 세라마이드 NP는 에토좀의 이중층에 흡착되었다. 세라마이드 NP를 함유한 에토좀의 물성을 살펴보면 소포체의 크기는 80~130 nm, 다분산지수는 0.09~0.16, 제타 전위는 -40~-49 mV로 측정되었다. 세라마이드 NP가 없는 소포체의 크기는 124.80±1.46 nm, 다분산지수와 제타전위는 각각 0.088±0.018과 -45.48±1.27 mV이었다. 따라서 세라마이드 NP가 함유된 에토좀은 세라마이드 NP가 없는 에토좀에 비해 소포체의 물리적 특성이 개선됨을 알 수 있었다. 세라마이드 NP를 함유한 에토좀의 피부흡수율은 12시간 후 6.13~14.98%이었으며, 반면에 세라마이드 NP가 없는 에토좀의 피부흡수율은 7.08%이었다. 결론적으로 세라마이드 NP를 함유한 에토좀은 피부흡수 효율을 향상시킬뿐만 아니라 소포체의 안정성에도 긍정적인 영향을 미쳤다.
Saccharomyces rouxii T9의 생육에 있어서 vitamin및 amino acid의 영향에 대하여 실험한 결과는 다음과 같다. (1) inositol, pyridoxine, riboflavin, niacin, para amino benzoic acid등은 생육인자로서 요구되지 않았다. (2) biotin, thiamin, Ca-pantothenate 등은 적응적으로 요구되었으며 이들 vitamin중 절대적으로 요구되는것은 없었다. (3) biotin, thiamin, pyridoxine, riboflavin, Ca-phantothenate등의 결핍배지에서는 배양초기 에는 식 염 26%배지에서 무염배지에 비하여 생육율이 다소 낮았으나 배양 16일 후에는 반대로 무염배지에 비하여 생육율이 높았다. (4) 유안을 질소원으로 하는 합성배지에 첨가효과가 인정되는 amino acid로서는 대략 methionine, tryptophan, serine, threonine, cystine, glycine, leucine, alanine, valine등의 순이였다. (5) histidine, lysine, arginine, aspartic acid, proline, tyrosine등은 배양초기에는 무첨가구에 비하여 생육도가 다소 저하되었으나 배양 16일경에는 무첨가구와 거의 비슷하거나 다소 상승되는 경향을 보였다.
식물 유래 naphthoquinone계 juglone의 신규 제초제 작용점 KAPAS에 대한 in vitro 및 in vivo에서의 활성 평가를 통해 천연물 유래 제초제로서의 가능을 검토하였다. Juglone은 농도의존적인 반응으로 KAPAS를 효과적으로 저해하였으며, 50% 저해농도는 $9.5{\mu}M$이었다. 바랭이(Digitaria sanquinalis)에 대한 경엽처리에서 juglone 125, 250, 500 및 $1000{\mu}g\;mL^{-1}$ 농도에서의 활성정도는 각각 70, 95, 100 및 100%이었다. 또한, 8종의 화본과 및 광엽잡초에 대한 juglone 2,000 및 $1000{\mu}g\;mL^{-1}$ 농도에서의 살초력은 완전하였으며(100%), $500{\mu}g\;mL^{-1}$에서도 90~100%이었다. Juglone을 처리했을 때 나타나는 주요 증상은 고사(desiccation) 또는화염상(burndown)이었다. Juglone 처리에 의한 전해물질 누출은 광조건에 관계없이 농도의존적으로 일어났으나, 엽록소 함량 감소 정도는 광조건에서도 경미한 수준이었으며, 암 조건에서는 전혀 일어나지 않았다. Juglone에 의해 억제되었던 애기장대 종자의 발아율은 biotin 공급에 의해 뚜렷하게 회복되었다. 이상의 실험에 결과에 의하면 천연 naphthoquinone계 juglone은 신규 제초제 작용점 KAPAS를 효과적으로 저해하는 친환경적인 천연물 유래 제초제로서의 가능성을 확인하였다.
Purpose: Porphyromonas gingivalis and Tannerella forsythia have been implicated as the major etiologic agents of periodontal disease. These two bacteria are frequently isolated together from the periodontal lesion, and it has been suggested that their interaction may increase each one's virulence potential. The purpose of this study was to identify proteins on the surface of these organisms that are involved in interbacterial binding. Methods: Biotin labeling of surface proteins of P. gingivalis and T. forsythia and liquid chromatography-tandem mass spectrometry (LC-MS/MS) analysis was performed to identify surface proteins involved in the coaggregating activity between P. gingivalis and T. forsythia. Results: It was found that three major T. forsythia proteins sized 161, 100, and 62 kDa were involved in binding to P. gingivalis, and P. gingivalis proteins sized 35, 32, and 26 kDa were involved in binding to T. forsythia cells. Conclusions: LC-MS/MS analysis identified one T. forsythia surface protein (TonB-linked outer membrane protein) involved in interbacterial binding to P. gingivalis. However, the nature of other T. forsythia and P. gingivalis surface proteins identified by biotin labeling could not be determined. Further analysis of these proteins will help elucidate the molecular mechanisms that mediate coaggregation between P. gingivalis and T. forsythia.
Bioconversion of fumarate to succinate by Enterococcus sp. RKY1 was enhanced when Tween surfactant, organic solvent, and vegetable oil were added to the fermentation medium. The maximum amount of succinate produced was 80.4 g/l after a 24 h incubation when Tween 80 was added to the culture to a final concentration of 0.1 g/l. Triton X-l00 was observed to damage the enzymes and inhibit the formation of succinate. The addition of 10 ml/l acetone increased the production of succinate by 110%. Vegetable oils used were found to be effective for succinate production as well as for the cell growth. Similar productivity increases were obtained with corn oil and Tween 80 plus biotin with the total productivity being 3.6 g/l/h, and 3.5 g/l/h, respectively, which was approximately 25% greater than that of the control. Therefore, these results indicate that com oil can be considered the most appropriate agent for the production of succinate where succinic acid was primarily used in the production of food, medicine, and cosmetics.
We constructed a biospecific affinity surface using hyper-branched dendrimers on gold for biospecific recognition, and characterized the resulting surfaces by using confocal fluorescence microscopy. The dendrimer monolayer was firstly constructed on the mercaptoundecanoic acid SAM/Au with pentafluorophenyl ester activation and further functionalized with sulfo-NHS-biotin, an activated ester of biotin. To confirm the formation of biospecific affinity surface, FITC(fluorescein isothiocyanate)-labeled avidin was loaded onto the biotinylated dendrimer monolayer, and fluorescence images of the bound avidins were investigated with a confocal microscope. The constructed biospecific affinity surface showed a much more dense and uniform fluorescence compared to those from poly-L-lysine- and cystamine SAM-based affinity surfaces. For the dependency on the concentration of added FITC-labeled avidin on the affinity surface, derived fluorescence could be detectable from as low as $1{\mu}g/ml$, and intensified up to $50{\mu}g/ml$. Further reaction of FITC-labeled avidin layer with TMR(tetramethylrhodamine)-biocytins resulted in the efficient FRET(fluorescence resonance energy transfer) phenomenon. As an extension of the study, we attempted a patterning of the affinity surfaces on gold by microcontact printing. Fluorescence of the patterned surface demonstrated that FITC-labeled avidin molecules were specifically bound to the biotinylated patches.
MEMS 공정을 이용하여 $SiN_x$를 지지층으로 한 $SiO_2$/Ta/PZT/Pt 의 박막 구조를 가지는 마이크로 켄틸레버를 제작하였다. 켄틸레버의 전기기계적 특성을 LDV (레이저 미소 변위 측정기)를 이용하여 측정하였으며, 이를 통해 전기기계적 거동을 분석하였다. 또한 무게 감지소자로서의 응용을 위해 Au의 증착을 통한 감도를 측정하였으며, streptavidin의 무게를 감지하기 위해 immobilization 공정을 거쳐 thiol 그룹 및 biotin을 표면에 고정화 시킨후 biotin-streptavidin 결합에 의한 전기기계적 신호 분석을 통해 생체 물질의 무게 감지 소자로의 응용을 평가하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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