방향족 화합물은 독성 환경오염물질로 생태계와 인간의 건강에 해로운 영향을 미친다. 그중 chlorotoluene과 nitrotoluene 화합물은 수생생물에 독성을 나타내며 인간의 피부, 눈, 호흡기를 자극한다. 본 연구에서는 폐수의 chlorotoluene과 nitrotoluene 화합물을 저렴하고 간단하게 검출하고자 재조합 미생물 바이오센서를 개발하였다. BTEX (benzene, toluene, ethylbenzene, xylene) 분해 조절 유전자 xylR를 Po' (upstream activating sequences를 제거한 DmpR 조절단백질 promoter Po) 또는 Pu (XylR 고유의 프로모터)::lacZ 유전자(${\beta}$-galactosidase 유전자)의 upstream에 연결한 플라스미드를 제작한 후, E. coli $DH5{\alpha}$에 형질 전환하였다. 유도 화합물 존재 하에서, 아가로스에 고정된 이 재조합 바이오센서 세포는 유도 화합물에 의해 ${\beta}$-galactosidase를 발현하고 기질인 chlorophenol red ${\beta}$-D-galactopyranoside (CPRG)를 분해하여 1~2시간에 붉은색을 나타내었다. BTEX 화합물 중, 특이적으로 o-, m-, p-chlorotoluene ($0.1{\mu}M-100 mM$) 그리고 o-, m-, p-nitrotoluene (0.1 mM-100 mM)에서 높은 반응을 나타내었으며 Po'가 Pu보다 높은 반응성을 보여주었다. 아가로스에 고정된 바이오센서는 $4^{\circ}C$에서 21일간 보존 후에도 활성의 큰 변화 없이 안정하였으며, chlorotoluene과 nitrotoluene 화합물들로 spike된 전처리 하지 않은 폐수 시료 중에서도 좋은 반응을 보여 주어 폐수 중 chlorotoluene과 nitrotoluene 화합물의 간단한 초기 검출에 활용될 수 있음을 제시하였다.
본 연구는 김치로부터 비만 억제능력이 있는 젖산균을 분리 및 동정하고, 이 균주의 생리적 특성을 규명하여 상업적으로의 이용가능성을 검토하고자 실시하였다. 이를 위해 Modified MRS 분별배지를 사용하여 노란색 집락을 형성하는 균주를 대상으로 각각 ${\alpha}-amylase$ inhibitory activity, ${\alpha}-glucosidase$ inhibitory activity와 lipase inhibitory activity가 우수한 균주를 선발한 결과 K6 균주가 최종 선발되었다. K6 균주는 ${\alpha}-amylase$ 억제활성 $96.78{\pm}3.29%$, ${\alpha}-glucosidase$ 억제활성 $92.55{\pm}9.62%$, lipase 억제활성 $85.17{\pm}0.79%$, 지방분화 억제활성 $27.4{\pm}1.4%$로 나타났으며, 동정결과 Lactobacillus plantarum으로 판명되었고, Lactobacillus plantarum K6으로 명명하였다. L. plantarum K6은 답즙산과 산성의 pH에서 모두 우수한 생존력을 나타내었고, 효소활성은 전반적으로 낮았으나 arylamidase와 ${\beta}-galactosidase$에 대해 비교적 높은 효소 활성을 나타내었다. 항생제 내성 실험 결과 vancomycin, ampicillin, polymyxin B에 내성이 있는 반면 erythromycin에 감수성을 나타냈으며, Escherichia coli, Salmonella Typhimurium, Listeria monocytogenes와 Staphyloccous aureus에 대해 각각 51.8%, 42.4%, 61.6%와 54.9%의 억제 효과를 지니고 있는 것으로 나타났다. 또한, 아민을 생성하지 않으며, 장부착성은 대조구인 L. rhamnosus GG보다 우수하였다.
Vita, Carolina Elena;Esquivel, Juan Carlos Contreras;Voget, Claudio Enrique
Food Science and Biotechnology
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제18권6호
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pp.1365-1370
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2009
Aspergillus kawachii extracellular pectinases were screened in liquid cultures with different carbon sources. The fungus grown on citrus pectin or lemon pomace produced at least one of these inducible pectinases: acidic polygalacturonase, pectin lyase, pectin methylesterase, $\alpha$-L-arabinofuranosidase, $\alpha$-1,5-endoarabinase, $\beta$-D-galactosidase/exogalactanase, and $\beta$-1,4-endogalactanase. The lemon-pomace filtrates also contained significant $\alpha$-L-rhamnosidase and $\beta$-D-fucosidase activities. Most of the screened pectinases were active at pH 2.0-2.5, indicating that the A. kawachii enzymes were acidophilic. Under the culture conditions employed we could not detect enzymatic degradation of soybean rhamnogalacturonan. The A. kawachii pectinase-production-related regulatory phenomena of induction-repression resemble those described for other Aspergillus sp.
Effects of alpha-galactosidase (GAL) on broiler corn-soybean meal diet was investigated. In experiment 1, sixty cockerels were allocated to five groups, including three enzyme treatments (GAL added at 0, 500, and 1,000 mg/kg diet), a nitrogen-free diet group and a fast group. The true nitrogen-corrected ME (TME$_n$) and true amino acid availability were determined. In experiment 2, 324 day-old chicks were used in a 2${\times}$3 factorial design consisting of two energy contents (high and low) and three GAL levels (0, 250, and 500 mg/kg). Three feeding phases, comprising 0-21 d, 22-35 d and 36-48 d, were involved. GAL addition improved TME$_n$ and the availability of methionine and cystine (p<0.05). The apparent ME (AME) or nitrogen-corrected AME (AME$_n$) and digestibility of dry matter, organic matter, calcium, and phosphorus were improved significantly on d 21, so was crude protein and an interaction of energy and GAL on AME$_n$ (p<0.05) was found on d 35. However, daily intake and daily gain were significantly improved with GAL addition (p<0.05) during 21 d. The small intestine relative weight decreased at 250 mg/kg GAL (p<0.05) on d 35, whereas presented an interaction between GAL and energy on d 21 (p<0.05). Likewise, this treatment increased breast muscle ratio (p<0.05). On d 21, triglycerides level of broilers showed interaction between energy and enzyme levels (p<0.05). Uric acid level in 500 mg/kg GAL declined linearly (p<0.05). On d 35, quadratic effects (p<0.05) were observed in total protein, albumin, globulin and cholesterol content for enzyme supplementation. And the interactive effects of energy and GAL on serum values showed more obviously. The study implies that GAL improved energy and nutrient availability of corn-soybean meal diet in broiler. The GAL supplementation to corn-soybean meal based diet can improve performance of broilers in early stages of growth.
본 연구는 대두단백질의 풍미와 기능성의 향상을 목적으로 효소처리한 분리대두단백에 fructooligosaccaride, galactooligosaccaride , isomaltooligosaccaride를 첨가하여 3종류의 비피더스균으로 각기 배양시킨 soy yogurts의 pH, 산도, 생균수, $\alpha$-galactosidase의 활성 , 유기산과 n-hexanal 및 acetaldehyde의 함량을 연구하였다. pH에 있어서 올리고당의 종류에 따라서는 유의차가 없었으나 균주의 종류에 따라서는 유의차가 있었다. 따라서 B. bifidum 배양군의 pH가 5.26~5.30로 가장 높았고 B. breve 배양군은 4.76~4.86이었으며, B. infantis 배양군은 4.38~4.40로서 가장 낮았다. 적정산도는 pH와 유사한 경향을 나타내어 올리고당의 종류에 따라서는 유의차가 없었으나 균주의 종류에 따라서는 유의차가 있었다. 따라서 B. bifidum 배양군의 산도가 0.81~0.84%로 가장 낮았고 B. breve 배양군은 0.97-1.04% 였으며, B. infantis 배양군은 1.39~1.41%로 가장 높았다. 생균수는 올리고당의 종류에 따라서는 대체로 근사한 수치를 나타내었으나 균주의 종류에 따라서는 경시적인 차이가 있었으며 모든 시료들이 $10^{9}$ CFU/ml 이상의 생균수를 포함하는 것으로 나타났다. 한편 B. infantis로 배양한 soy yogurts를 4$^{\circ}C$에서 7일간 저장한 후 생균수를 측정한 결과 $10^{9}$ CFU/ml를 나타내어 초기생균수를 거의 유지하였다. $\alpha$-Galactosidase 활성은 B. infantis, B. bifidum, B. breve 순으로 높았으며 활성이 가장 높았던 B. infantis의 활성을 100%로 하였을 경우 B. bifidum B. breve의 활성은 각각 32.7, 26.0% 이었다. 유기산 중에서 lactic acid와 acetic acid은 적정산도의 결과와 유사한 경향을 나타내어 B. infantis 배양군, B. breve 배양군, B. bifidum 배양군 순으로 높았으며 propionic acid는 반대경향을 나타내었고 올리고당 종류에 따라서는 모든 시료에서 유의차가 없었다. 휘발성 향기성분 중에서 콩비린내를 발생시키는 성분인 n-hexanal은 B. breve배양군이 B. bifidum과 B. infantis 배양군 보다 농도가 높았으며 acetaldehyde는 0.02~0.52 ppm으로 극미량이 검출되었고 올리고당 종류에 따라서는 모든 시료에서 유의차가 없었다.
The CMV promoter driven lacZ reporter gene (pcDNA-lacZ) was constructed and used for DNA immunization study. The expression of the lacZ gene was confirmed in vitro using RTG-2 cell line before using for in vivo study in olive flounder (Paralichthys olivaceus). In the dose response study, the maximum expression of the lacZ gene was found in the group injected with 5 ${\mu} g$ of the plasmid DNA. Kinetic study showed a significantly increased expression of $\beta-galactosidase$ gene at 7 days after injection. Effects of DNA vaccine on specific and nonspecific immune responses such as antibody and NO production were studied and the significant effect was found in olive flounder injected with 10 and 15 ${\mu} g$ DNA (sub optimal dose for lacZ gene expression). Two pro inflammatory cytokine genes, $IL-l\beta$ and $TNF-\alpha$, were also found to be up regulated in the muscle injected with the plasmid, suggesting an induction of local inflammatory response.
${\alpha}-galactosidase$ 및 protease활 을 가지는 효소제 제를 두유(豆乳) 제조시에 처리하여 장내(腸內) 가스발생인자(flatulence factor)를 제거 하는 동시에 두유의 수율(收率)과 소화율(消化率)을 향상시키고자 실험한 결과는 다음과 같다. 두유의 생산량 및 단백질 수율은 효소제(酵素劑) 처리에 의하여 증가하지 않았다. 두유 중 고형분의 양은 pH 6에서 pH10으로 높아질수록, 효소제 처리온도가 $30^{\circ}C$에서 $60^{\circ}C$로 높아질수록 증가하였다. 두유중 TCA가용성 질소화합물의 비율은 효소제의 농도가 높을 수록, pH 4에서 pH10으로 증가 할수록, 처리시간이 길어질수록 증가하였고 처리온도 $50^{\circ}C$까지 증가하는 경향을 보였다. 장내 가스 발생인자로 알려진 raffinose와 stachyose의 함량도 효소제의 농도가 증가할수록, 처리 온도가 $30^{\circ}C$에서 $60^{\circ}C$로 증가함에 따라 많이 감소하였으며 최적 pH는 4-5사이였다.
Kim, Bong-Gwan;Lee, Kyung-Ju;Han, Nam-Soo;Park, Kwan-Hwa;Lee, Soo-Bok
Food Science and Biotechnology
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제16권1호
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pp.127-132
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2007
[ ${\alpha},\;{\alpha}$ ]-Trehalose was efficiently modified by a transgalactosylation reaction of Escherichia coli ${\beta}-galactosidase$ using lactose as a donor to yield two galactosyl trehalose trisaccharides. The reaction products of trehalose by the enzyme were observed by thin layer chromatography (TLC) and high performance anion exchange chromatography (HPAEC) and were purified by BioGel P2 gel permeation chromatography and recycling preparative HPLC. Liquid chromatography-mass spectrometry (LC-MS) and ^{13}C$ nuclear magnetic resonance (NMR) analyses revealed that the structures of the main products were $6^2-{\beta}-D-galactosyl$ trehalose (1) and $4^2-{\beta}-D-galactosyl$ trehalose (2). A reaction of 30%(w/v) trehalose and 15%(w/v) lactose at pH 7.5 and $45^{\circ}C$ resulted in a total yield of approximately 27-30% based on the amount of trehalose used. The galactosyl trehalose products were not hydrolyzed by trehalose. In addition the mixture of transfer products (9:1 ratio of 1 to 2) showed higher thermal stability than glucose, lactose, and maltose, but less than trehalose, against heat treatment over $100^{\circ}C$ at pH 4 and 7. It also exhibited better thermal stability than sucrose at pH 4 alone.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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