Experiments were carried out to investigate Cd accumulation, elimination and cell response in juvenile rockfish (Sebastes schlegeli) exposed to sub-chronic dietary Cd (0, 0.5, 5, 25 and 125 mg/kg) for 60 days and depuration periods of 30 days. Cd accumulation in the kidney of cock fish increased with exposure periods and concentrations for the 60 days of dietary Cd exposure. After the end of the dietary Cd exposure, Cd accumulation values in the kidney were $52.9{\pm}9.94\;{\mu}g/g$ and $90.6{\pm}15.7\;{\mu}g/g$ for those exposed to 25 mg/kg and 125 mg/kg Cd, respectively. The accumulation factors increased with the exposure period in the kidney. Cd elimination in the kidney of rockfish did not vary significantly and remained constant after the cessation of the dietary Cd exposure. In the primary exposure periods, the effect of kidney tissue in the rockfish exposed to dietary Cd was observed the swelling of capillary of the glomerulus. In addition, there was also hydropic swelling within the pyknotic nuclei, some of hyaline droplet accumulation and the microvilli showed a positive reaction to alcian blue in the tubular cells. While exposure time and concentrations were increased, there was a lot of hyaline droplet accumulation and the microvilli showed a positive reaction to alcian blue in the tubular cells. Fused renal tubule and its necrosis were observed after 60 days at l25 mg/kg.
The effect on kidney, gill, and hepatopancreas of juvenile olive flounder, Paralichthys olivaceus were investigated by histological method under limit concentration of effulent of PCBs for 60 days. The free surface of epithelial cell layer in the renal tubules of kidney showed a strong positive reaction in alcian blue during all exposure period. There were also observed swelling of hemocyte in glomerulus and macrophage. At 60 days after exposure, epithelium of the renal tubules was fused and some of organism $(20\%)$ showed damage of glomerulus and eosinophlic cell in epithelium of the renal tubules. The phenomena such as the activation and increase of the chloride cell, and swelling of hemocyte in the capillary of gill were observed during all exposure period. At 60 days after exposure, swelling of the gill filament and mucous cell appeared in gill and some of organism $(30\%)$ showed swelling of the gill lamellar. Swelling of hemocyte in the capillary of hepatopancreas was observed and the free surface of epithelial layer of the bile duct showed positive reaction in alcian blue during all exposure period. Degenerated zymogen in the pancreas and swelling of the hepatocyte were occurred at 60 days after exposure.
Background : Irregular meals and insufficient exercise are major modern lifestyle-related risk factors for constipation. This study aimed to examine the effects of the aqueous extract of Dendrobium speciosum var. (DM) on the improvement of intestinal function and prevention of constipation in rats. Methods and Results : Constipation in rat was induced by loperamide (4 mg/kg) injection for 5 days and rats were randomly assigned to the following groups: normal control rats (NOR), constipated rats (LOP induced) and constipated rats supplemented with dulcolax-S (POS), DMSG, 100 mg/kg (DMSG-100), 300 mg/kg (DMSG-300) and 500 mg/kg (DMSG-500). The DMSG groups showed increments in the frequency and amount of stools compared to the LOP group. Loperamide treatment markedly reduced the water content of feces, whereas DMSG administration significantly increased fecal water contents. Moreover, DMSG improved intestinal transit speed in constipated-rats. Alcian blue staining revealed increased mucus production by crypt cells and mucus contents in feces and the mucosal surface. Conclusions : In summary, DM extraction significantly improves intestinal function in rats, which indicates the effectiveness of this extract in the prevention and treatment of constipation.
Objective : The purpose of this study is To investigate the effects of acupuncture and moxibustion at Zusanli(ST36) and Weishu(BL21) Methods : serum gastrin level by radioimmunoassay was measured at 5 days after acupuncture and moxibustion of those acupoints. Gastric endocrine cell(G cell and Histamine immunoreactive density) by avidin-biotinylated complex(ABC) technique, histological examinations(Alcian Blue-PAS Stain; Alcian blue-Periodic Acid Schiff reagent) of the gastric mucosa were also performed. Acupuncture applied to the ST36 acupoint increased gastrin level of serum, but moxibustion did not produced significant effect. All of acupuncture and moxibustion at BL21 acupoint increased gastrin level of serum significantly. In moxibustion at ST36 and BL21, the number of gastrin secreting cells in gastric mucosa, the density of immunoreactive histamin secreting cells and the density of body mucosa stained by PAS were decreased compare to acupuncture at ST36 and BL21. In acupuncture and moxibustion at BL21, the density of pylorus mucosa stained by PAS were increased compare to the groups applied to ST36. In the density of body mucosa stained by AB, moxibustion at BL21 and ST36 were increased compare to the other groups. Results : These data suggest that acupuncture and moxibustion at BL21 increased gastrin level of serum and those effects were more potent than acupuncture at ST36.
This study was performed to identify the effect of Backchulsan and Backpeundu, on the muco-substances of the goblet cells in the small and large intestines of the mouse. After injected castor oil into oral cavity, the experimental animals were administrated with 5.952mg per 30g body weight of Backchulsan, with 0.519mg per 30g body weight of Backpeundu. The specimens used in this study were obtained from the small and large intestines of the mouse. All specimens were stained with periodic acid-Schiff reaction, alcian blue pH 2.5 and alcian blue pH 1.0 procedures. The results were as follows : 1. The most remarkable decrease of neutral and acid mucosubstance was observed in the control group 1 and 6 hours after castor oil administration. 2. Increase of neutral and mucosubstance was observed in Backchulsan administration group 3 hours in comparision with that of control group administrated of castor oil, especially of the upper and lower villi regions. 3. Increase of neutral and acid mucosubstance was observed in Backpeundu administration group 6 hours in comparision with that of control group administration of castor oil. 4. The most remarkable increase of neutral and acid mucosubstance was observed in Backchulsan administration group after 3 hours in comparision with that of Backpeundu administration group.
The synovial tissues are a valuable MSCs source for cartilage tissue engineering because these cells are easily obtainable by the intra-articular biopsy during diagnosis. In this study, we isolated and characterized the canine MSCs derived from synovial fluid of female and male donors. Synovial fluid was flushed with saline solution from pre and post-puberty male (cM1-sMSC and cM2-sMSC) and female (cF1-sMSC and cF2-sMSC) dogs, and cells were isolated and cultured in advanced-DMEM (A-DMEM) supplemented with 10% FBS in a humidified 5% $CO_2$ atmosphere at $38.5^{\circ}C$. The cells were evaluated for the expression of the early transcriptional factors, such as Oct3/4, Nanog and Sox2 by RT-PCR. The cells were induced under conditions conductive for adipogenic, osteogenic, and chondrogenic lineages, then evaluated by specific staining (Oil red O, von Kossa, and Alcian Blue staining, respectively) and analyzed for lineage specific markers by RT-PCR. All cell types were positive for alkaline phosphatase (AP) activity and early transcriptional factors (Oct3/4 and Sox2) were also positively detected. However, Nanog were not positively detected in all cells. Further, these MSCs were observed to differentiate into mesenchymal lineages, such as adipocytes (Oil red O staining), osteocytes (von Kossa staining), and chondrocytes (Alcian Blue staining) by cell specific staining. Lineage-specific genes (osteocyte; osteonectin and Runx2, adipocytes; PRAR-${\gamma}2$, FABP and LEP, and chondrocytes; collagen type-2 and Sox9) were also detected in all cells. In this study, we successfully established synovial fluid derived mesenchymal stem cells from female and male dogs, and determined their basic biological properties and differentiation ability. These results suggested that synovial fluid is a valuable stem cell source for cartilage regeneration therapy, and it is easily accessible from osteoarthritic knee.
본 연구에서는 장 기능 개선 및 변비질환의 예방 및 치료에 효과적인 식물성 복합추출물인 장기능개선제-신소재(KTG075)의 대장관 내 점액질의 분비에 미치는 영향, 특히 대장에 가장 많이 분비되는 mucin 2 분비에 미치는 영향을 알아보고자 하였다. Mucin(MUC)은 그 구조에 따라서 여러 아형이 있는데, 아형에 따라서 조직 분포가 다르며 대장에서 가장 많이 분비되는 mucin의 아형은 mucin 2로서 mucin 2에 대한 항체(Biogenex AM358)를 사용하여 면역조직화학법으로 mucin 2를 관찰 시, 변비유발군에서는 mucin 2(연갈색)로 염색된 세포가 현저히 감소되나 KTG075 투여 시 뚜렷하게 mucin 2의 염색이 증가되었다. 또한 alcian blue 염색으로 점액질층을 관찰 시 점액질 두께도 변비유발군에서는 현저히 감소되었고 KTG075투여군에서는 점액질층이 거의 정상 수준으로 증가되었다. 이러한 결과는 변비유발군에서의 mucin 2의 생성과 분비가 감소되나 KTG075 투여군에서는 장 기능을 활성화시킴으로써 mucin 2의 생성과 분비를 증가시켜 장관 내 윤활도가 유지되고 장관 운동을 증가시켜 배변을 용이하게 하여 변비 또는 스트레스 등에 의해 저하된 장 기능을 개선시킴을 확인할 수 있었다.
Objectives : The process through which mesenchymal cells condense and differentiate into chondrocytes to form new bone is known as endochondral bone formation. Chondrogenic differentiation and hypertrophy are essential steps in bone formation and are influenced by various factors. The stem bark and root bark of Eleutherococcus sessiliflorus (ES) have been widely used to treat growth retardation and arthritis in traditional Korean Medicine. In this study, we aimed to investigate the possible role of the stem bark of ES in the stimulation of chondrogenic differentiation in clonal murine chondrogenic ATDC5 cells. Methods : In ATDC5 cells treated with ES extract, cell viability and extracellular matrix production were determined using CCK-8 assay and Alcian blue staining, respectively, and alkaline phosphatase activity was measured. We also examined mRNA and protein expression levels of genes related to chondrogenic expression in ATDC5 cells using reverse transcription-polymerase chain reaction and western blot analyses. Results : ES extract increased the accumulation of Alcian blue-stained cartilage nodules and alkaline phosphatase activity in ATDC5 cells. It increased the mRNA expressions of chondrogenic markers including bone sialoprotein (BSP), cartilage collagens, Runt-related transcription factor-2 (RUNX-2), osteocalcin (OCN), β-catenin, and bone morphogenetic protein-2 (BMP-2), as well as the protein expressions of β-catenin, RUNX-2, BMP-2, and alkaline phosphatase (ALP). Conclusion : Taken together, these results suggest that ES extract exhibits a chondromodulating activity and therefore may be a possible agent for the treatment of bone growth disorders.
The olfactory organs of two African lungfishes, Protopterus amphibius and P. dolloi, were investigated using a stereo microscope and a compound light microscope and were described anatomically, histologically, and histochemically. Like other lungfishes, these species present the following general features: i) elongated olfactory chamber (OC), ii) anterior nostril at the ventral tip of the upper lip, iii) posterior nostril on the palate of the oral cavity, iv) lamellae with multiple cell types such as olfactory receptor neurons, supporting cells, basal cells, lymphatic cells, and mucous cells (MC), and vi) vomero-like epithelial crypt (VEC) made of glandular epithelium (GE) and crypt sensory epithelium. Some of these features exhibit differences between species: MCs are abundant in both the lamellar and inner walls of the OC in P. amphibius but occur only in lamellae in P. dolloi. On the other hand, some between feature differences are consistent across species: the GE of both P. amphibius and P. dolloi is strongly positive for Alcian blue (pH 2.5)-periodic acid Schiff (deep violet coloration), and positive with hematoxylin and eosin and with Masson's trichrome (reddish-brown staining), unlike the MCs of the two species which stain dark red with both Alcian blue (pH 2.5)-periodic acid Schiff and Masson's trichrome but respond faintly to hematoxylin and eosin. The differing abundance of MCs in the two lungfishes might reflect different degrees in aerial exposure of the olfactory organ, while the neutral and acid mucopolysaccharide-containing VEC, as indicated by staining properties of the MCs, is evolutionary evidence that P. amphibius and P. dolloi are the closest living relatives to tetrapods, at least in the order Dipnoi.
The species of the slug used in the experiment is Limax flavus L. For identifying the chemical characteristics of the epidermis, granules and mucus-producing cell of this animal is examined with methylene blue-basic fuchsin double stain and PAS-alcian blue reagent. For the ultrastructural research of the epidermal free surface, the epitheial cell and the parenchymal cell are used with scanning electron microscope and transmission elec-tron microscope respectively. I . Epidermal tissue The epidermal tissue of the slug is observed being divided into the dorsal and the ventral side(toot pad) respectively. 1) Dorsal epidermal tissue The dorsal epidermis of the slug is constituted with the simple columnar epithelium and the microvilli are compacted on the epidermal free surface. Two different types of the secretory granules of the neutral and the acid mucus are observed between the epithelial cells, and the neutral mucous granules are highest electron-dense but the acid mucous granules are observed to be electron-lucent. 2) Foot epidermal tissue The Foot epidermis is formed with the taller simple columnar epithelium than the dorsal epidermis and these cells have both a large number of the microvilli and a few number of the large villi. The secretory granules of three different types, which are acid, neutral and mixed mucous granule of two different types are observed between the epithelial cells. The neutral mucous granules are highest electron dense but the acid mucous granules are observed to be electron-lucent. II . Mucous granule-producing cell and mucus-producing cells Seven different types of the granules-producing cell and the mucus-producing cells are observed between the parenchyma. 1) A-type of acid mucous granule-producing cell The electron-lucent granules are largely occupied in the cytoplasm of these cells and then the granules are surrounded by irregular membrane. These electron-lucent granules exhibit alcianophilia with PAS-alcian blue reaction, so these granules are certified to be acid mucopolysaccharide. 2) B-type of acid mucus-producing cell The nucleus and the cytoplasm of these cells are pushed by the acid mucus of the electron-lucent toward the cell membrane. This mucus has been confirmed to be the acid mucopolysaccharide with PAS-alcian blue reagent. 3) A-type of neutral mucous granule-producing cell These cells contain the electron-dense round granules with approximately $1{\mu}m$ in diameter, which exhibit strongly PAS-positive reaction. These granules are confirmed to be the neutral mucoplysaccharide. 4) B-type of neutral mucous granule-producing cell These cells contain two different types of electron dense granules and electron-lucent granules; The former exhibits to be strongly PAS-positive and the latter to have alcianophilia reaction respectively. 5) C-type of neutral mucus-producing cell These cells are similar to the shape and the size of the B-type of mucus-producing cell but these two different types of cells are stained with reversing properties to each other. The mucus of the C-type cell that electron-lucent is largely occupied in the cytoplasm that exhibits strongly PAS-positive reaction. 6) D-type of neutral mucous granule-producing cell These cells contain round granules about $1{\mu}m$ in size which are observed to be medium electron-dense granules and those granules are stained brightly red with PAS-weak positive reaction. The granules are certified to be neutral mucopolysaccharide. 7) E-type of neutral mucous granule-producing cell These cells are similar to the shape and the size of the D-type of neutral mucous granule-producing cell. These cells contain a large number of granules with about $1{\mu}m$ in diameter showing electron-lucent and then granules are seen to be PAS-weak positive reaction. III. Parenchyma The clear cell and dark cell are found in the parenchyma of the Limax flavus L. 1) Clear cell These cells are round formed and the nucleus of the cells are larger than cytoplasm. These cells which have the electron-lucent cytosol possess poorly developed organelles. 2) Dark cell These cells are found to be dark cells due to high electron-density, which exhibit strongly methylene-blue reaction from double stain of methylene blue-basic fuchsin.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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