Sclerotinia sp. (isolate BWC98-105) causes stem blight and root rot in Leghum sp., and is presently being evaluated as a potential mycoherbicide for the control of Trifoliorium repens. Bioassays have shown that Sclerotinia sp. produces phytotoxic substance which is biologically active against T. repens. Two biologically active compounds, designated as compoundsI and II, were produced in vitro from the culture filtrate of BWC98-105 isolate Sclerotium sp. Compounds I and II were purified by means of liquid-liquid extraction and $C_{18}$ open column chromatography (300 ${\times}$ 30 mm, i.d). To determine the purity, the purified compounds were analyzed by RP-HPLC. The analytical RP-HPLC column was a TOSOH ODS-120T (150 ${\times}$ 4.6 mm i.d, Japan), of which the flow rate was set at 0.7 mL/min using the linear gradient solvent system initiated with 15 % methanol to 85 % methanol for 50 min with monitoring at 254 nm. Under these RP-HPLC conditions, compounds I and II eluted at 3.49 and 4.13 min, respectively. Compound II was found to be most potent and host specific. However, compound I had a unique antibiotic activity against phytopathogenic bacteria like bacterial leaf blight (Xanthomonas oryzae) on rice, where it played a less important role in producing toxicity on T. repens. No toxin activity was detected in the water fraction after partitioning with several organic solvents. However, toxin activity was detected in the ethyl acetate and butanol fractions. In the leaf bioassay using compound II, the disease first appeared within 4-5 h as water soaked rot, which subsequently developed into well-defined blight affecting the whole plant.
This study was performed to investigate the current regulatory guidances of safety and efficacy evaluation for the approval of stereoisomeric drugs in Korea and US. According to the regulatory guidelines in major countries (EU, Canada, US), the important categories for the development of stereoisomeric drugs are classified as 1) development of a single enantiomer as a new active substances 2) development of a racemate as a new active substance 3) development of a new single enantiomer from an approved racemate. For this study, domestic regulatory documents for current guidelines of stereoisomeric drugs were investigated. Also four typical stereoisomeric drugs for three categories were chosen to investigate the new drug submission documents of KFDA and FDA for the safety and efficacy evaluation of stereoisomeric drugs. It is expected that these comparative results between KFDA and FDA will be useful for the safety and efficacy for the regulatory approval of stereoisomeric drugs in Korea.
본 연구자들은 동${\cdot}$서양에서 오랫동안 민간요법으로 사용되어져 왔고, 문헌에도 약리적인 작용이 기록되어 있는 Opuntia ficus-indica var. Saboten Makino (손바닥 선인장, 백년초) 줄기 분말을 사용하여 항균생리활성 물질을 규명하고자 하였다. 줄기 분말을 황산으로 가수분해 처리한 후 메탄올, 메틸클로라이드, 에탄올 등의 용매로 추출하였다. 용매추출물 가운데 methylene chloride 추출물의 경우 가장 탁월한 항균활성을 나타내었다. 항균활성을 나타내는 생리활성 물질을 분리 분석하기 위하여 조제용 TLC를 이용하여 산 가수분해 추출물로부터 7개의 분획물을 분리하였다. 7개 분획물 가운데 가장 광범위한 항균활성을 나타내는 유효 분획물로 분리된 것을 MBT-01108이라 명명하였다. 산가수분해로 추출된 분획물 MBT-01108을 구조 분석한 결과 항균 활성을 나타내는 화합물이 levulinic acid임을 밝혀냈다. Opuntia ficus-indica var. Saboten Makino로부터 분리된 levulinic acid는 식품 또는 화장품의 천연 보존제로써 사용가능하리라 판단되며, 또한, 세균성 질병예방, 여드름, 노화 예방, 미백 화장품 성분, 그리고 항생제로도 사용 가능한 물질임을 밝혀냈다.
고삼 75% 에탄올 추출물과 클로로포름 분획물을 첨가하여 몇가지 식중독 미생물의 증식억제 양상과 분리된 유효 물질의 구조를 확인하였다. 이 분획물의 항균 효과를 시험한 결과 Listeria monocytogenes (ATCC 19111, 19112, 19113, 19114 및 15313)에 대한 최소 증식억제 농도가 각각 $50{\sim}500\;ppm$과 50 ppm 이하로 확인되었다. 항균 활성을 보인 클로로포름 분획물을 silica gel column chromatography로 연속 2회 정제하여 얻은 황색 분말의 항균 활성 소획분 S-10-6은 L. monocytogenes 5 균주, Bacillus subtilis 및 Staphylococcus aureus에 대해서는 10 ppm 농도에서 뚜렷한 증식억제 효과를 보였으며 특히 L. monocytogenes 5균주에 대해서는 $30{\sim}50\;ppm$ 수준에서 살균 효과가 인정되었으나 E. coli 경우 100 ppm 농도에서도 증식억제 효과가 없었다. 항균 활성을 보인 소획분(S-10-6)을 IR, $^1H-NMR$ 및 $^{13}C-NMR$로 구조를 동정한 결과 flavanone 화합물의 하나인 kushenol F로 확인되었다.
양파를 80% ethanol로 추출하여 Sephadek LH-20 column chromatography로 fraction I, II 및 III의 생리활성물질을 분리하여 angiotensin converting enzyme(ACE), xanthine oxidase, tyrosinase의 저해작용 효과와 지질대사를 검토하였다 Fraction I과 II의 ACE 저해작용은 50 ppm 농도에서 80% 이상의 효소 저해효과를 나타내었고 fraction III에서는 500 ppm 농도에서 90% 효소저해작용을 보였다. 100 ppm 농도에서 fraction III의 xantine oxidase 효소저해 효과는 82.5%로 나타났으며 tyrosinase의 저해효과는 42.6%이었다. 효소저해작용이 가장 강한 fraction III를 2개월 동안 고지방식이에 첨가하여 혈장 및 간장에서 지질대사에 미치는 영향을 분석한 결과 혈장에서는 총지질, 중성지질이 대조군에 비하여 유의성 있게 감소하였다. 간의 콜레스테롤량도 약 50% 정도 감소하는 결과를 얻었다.
There are the Seven Effect of Drugs and unique processing methods in Chinese traditional medicine. The Seven Effects are single effrect(單行), additive effect(相加, 相須), synergic effect(上乘, 相使), antagonistic effect(相畏, 拮抗), inhibitory effect(相惡), neutralizing effect(相殺) and opposite effect(相反). We are interested in synergic effects of some drugs and components ; Addition of OLDENLANDIA DIFFUSA to Kilkyungtang combanation enhanced the cytotoxic activity of Kilkyungtang against A549 and B16-Fo eells by 20% and 50%, respectively. The Oldenlandia-added kilkyungtang also potentiated the cytotoxicities of mitomycine Cand 5-fluorouracil. ar-tunnerone. isolated from the root of Curcuma longa, potentiated the cytotoxic activity of sesquiphellandrene(isolated from the same root), aurapten(isolated from Aurantii semen)or cyclophosphamide by 10 times. The purpose of the processing(修治) of Chinese grugs is to remove unusable parts of plants and to eliminate toxicities as well as to produse new active components in drugs. On a occasion of study on the anthelmintic drugs against the chinese fluke(Clonorchis sinesis, (肝디스토마), we have observed that the processed mume fruit(鳥梅) possessed a very very potent clonorchicidal effect, while the methanol extract of the non-processed fruit inactive. The active component was isolated from the processed mume and identified as 5-hydroxymethylfurfuryl aldehyde. This substance dose not occur in the immature fruit and was found only in the processed one. Wehave heated the immature fruit in an oven at $90^{\circ}C$ for 52 hrs and found that the heated fruit eame clonorchidal. As demonstrated in these and other example cited in this presentation, the natural products chemistry is contributory to univeiling the drug effect ensued from the processing and the synergic effect of Oriental medical drug combinations, and to rationalization or modernization of the traditional medicine.
Strain BCNU 5011 was isolated from forest soil samples collected in the Taebaek mountain in the Gangwon province, Korea. The biochemical, physiological and 16S rRNA sequence analysis strongly indicated that this isolate was most closely related to Paenibacillus polymyxa. A maximum production level of antimicrobial substances of Paenibacillus sp. BCNU 5011 was achieved under aerobic incubation at $30^{\circ}C$ for 3 days in SST broth.Paenibacillus sp. BCNU 5011 showed a broad spectrum of activity against Gram positive and Gram negative bacteria, including methicllinresistant Staphylococcus aureus (MRSA). Paenibacillus sp. BCNU 5011 was also shown to inhibit the growth of different potential human pathogenic bacteria and fungi in vitro. Peptide extract showed better antimicrobial activity than solvent extracts. But active antimicrobial compounds might be included in both peptide extract and solvent extracts. Further separation, purification and identification of active principles leads project to develop antimicrobial agents and anti-MRSA agents.
밤나무 잎에 함유된 기능성 물질 검색의 일환으로 항미생물 효과를 검정하고 활성물질의 분석을 시도하였다. 예비실험을 통해 추출물의 활성을 확인한 후 시료를 n-hexane, EtOAc, MeOH로 순차 추출하여 정제한 다음 활성이 강한 MeOH 분획의 0.2 g, 0.5 g에 해당하는 추출물로 13종의 미생물에 대해 활성을 측정한 결과, Cram 양성 세균 중에서 S. aureus와 S. epidermidis는 대조구로 사용한 benzoic acid보다 강한 활성이 나타났고, M. luteus와 L. mesenteroides, B. subtilis에서도 활성이 인정되었으며, Gram 음성 세균인 E. coli, S. typhimurium, P. aeruginosa에서도 강한 활성이 나타나 밤나무 잎 추출물은 비교적 넓은 항균 spectra와 활성이 있음이 확인되었다. 이에 활성물질을 규명하고자 시료를 solvent fractionation, silica gel adsorption column chromatography, Sephadex LH-20 column chromatography, HPLC 등으로 정제하고 활성이 나타난 산성 획분과 페놀성 획분의 물질을 분리한 후 MS, $^1H-NMR,\;^{13}C-NMR$ 등으로 분석한 결과, 산성 획분에서는 stigmast- 5-en-3-ol($\beta$-sitosterol)이 활성을 갖는 물질로 나타났다.
Polygoni Radix (Polygonaceae) has been used as renal disoder hematopoietic, menstrual irregularity and antiaging in Korean folk medicine. Specially aerial parts has been used for insomnia and sedative agent. In order to investigate the efficacy of antioxidant activity on these aerial parts, the bio-activity guided fraction and isolation of physiologically active substance were performed. H$_2$O, 30%, 60%, 100% MeOH were examined antioxidant activity by DPPH method. It was revealed that 30%, 60% MeOH fractions have significantly antioxidant activity. From 60% MeOH fraction, six known flavonoid glycosides (quercetin, quercetin 3-O-${\beta}$-D-galactopyranosyl-4'-O-glucopyrano side-3'-methyl ether, quercetin 3-O-${\alpha}$-L-rhannopyranoside, quercetin 3-O- ${\alpha}$-L-rhamnopyranoside-4'-methylethor, quorcetin 3-O-${\beta}$-D-galactopyranoside, quercetin 3-O-${\beta}$-D-galactopyranoside) and 3,4-Oihydrocinnarnic acid were isolated. To investigate the antioxidant activities of each com-pounds, we measured radical scavening activity with DPPH method and anti-lipid peroxidative efficacy on low density lipo-protein (LDL) with TBARS assay and anti-acetylcholinestrase activity with Ellman's Test. Four compounds (ll, IV Vl, Vll) of quercetin glycosides showed significant activity.
효모추출물 중에 함유되어 있는 표고버섯 자실체 형성 촉진 물질을 검토한 결과, 그 자실체 형성 촉진 물질은 티아민이었으며, 티아민은 유리의 형태로만 존재하고, 티아민 일인산, 이인산 및 삼인산 에스테르는 존재하지 않았다. 한편, 효모추출물 1g중에 함유된 티아민의 량은 436$\mu\textrm{g}$이고, 그 전체량의 약 76%에 상당하는 332$\mu\textrm{g}$의 티아민이 Fraction II에, 약 20%에 해당하는 87$\mu\textrm{g}$이 Fraction I 에 존재하였으며, 이러한 티아민은 표고버섯의 영양생장에는 영향을 주지 않고, 생식생장에 관여하여 자실체의 형성을 촉진한다는 것을 밝혔다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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