The complete nucleotide sequences of a Korean isolate of Potato virus X(PVX-Kr) has been determined. Full-length cDNA of PVX-Kr has been directly amplified by long template reverse transcription and polymerase chain reaction(RT-PCR) using virus specific 5'-end primer and 3'-end primer, and then constructed in a plasmid vector. Consecutive subclones of a full-length cDNA clone were constructed to identify whole genome sequence of the virus. Total nucleotide sequences of genome of PVX-Kr were 6,435 excluding one adenine at poly A tail, and genome organization was identical with that of typical PVX species. Comparison of whole genome sequence of PVX-Kr with those of European and South American isolates showed 95.4-96.8% and 77.4-77.9%, in nucleotide similarity, respectively. Sequenced PVX-Kr in this study and twelve isolates already reported could be divided into two subgroups in phylogeny based on their complete nucleotide sequences. Phylogenetic tree analysis demonstrated that PVX-Kr was clustered with European and Asian isolates(Taiwan, os, bs, Kr, S, X3, UK3, ROTH1, Tula) in the same subgroup and South American isolates(CP, CP2, CP4, HB) were clustered in the other subgroup.
The prevalence of human papillomavirus genotypes differs in various target organs. HPV16 is the most prevalent genotype in the cervix while genotypes 6 and 11 are highly prevalent in skin and aero-digestive tract infections. In this study HPV11 positive specimens were selected from cervix, larynx and lung biopsy tissue to analyze the whole genome by PCR and direct sequencing. Five HPV11 whole genomes were characterized, consisting of two cervical specimens, two laryngeal specimens and one lung specimen. The results showed high homology of HPV11 in these organs. Phylogenetic analysis showed that all HPV11 derived from various organs belonged to the same lineage. Molecular characterization and functional studies can further our understanding of virulence, expression or transmission. Additional studies on functional protein expression at different organ sites will also contribute to our knowledge of HPV infection in various organs.
Lee, HyeJin;Kim, Jungeun;Weber, Jessica A.;Chung, Oksung;Cho, Yun Sung;Jho, Sungwoong;Jun, JeHoon;Kim, Hak-Min;Lim, Jeongheui;Choi, Jae-Pil;Jeon, Sungwon;Blazyte, Asta;Edwards, Jeremy S.;Paek, Woon Kee;Bhak, Jong
Molecules and Cells
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제43권1호
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pp.86-95
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2020
The red-crowned crane (Grus japonensis) is an endangered, large-bodied crane native to East Asia. It is a traditional symbol of longevity and its long lifespan has been confirmed both in captivity and in the wild. Lifespan in birds is known to be positively correlated with body size and negatively correlated with metabolic rate, though the genetic mechanisms for the red-crowned crane's long lifespan have not previously been investigated. Using whole genome sequencing and comparative evolutionary analyses against the grey-crowned crane and other avian genomes, including the long-lived common ostrich, we identified redcrowned crane candidate genes with known associations with longevity. Among these are positively selected genes in metabolism and immunity pathways (NDUFA5, NDUFA8, NUDT12, SOD3, CTH, RPA1, PHAX, HNMT, HS2ST1, PPCDC, PSTK CD8B, GP9, IL-9R, and PTPRC). Our analyses provide genetic evidence for low metabolic rate and longevity, accompanied by possible convergent adaptation signatures among distantly related large and long-lived birds. Finally, we identified low genetic diversity in the red-crowned crane, consistent with its listing as an endangered species, and this genome should provide a useful genetic resource for future conservation studies of this rare and iconic species.
Treponema phagedenis KS1, a fastidious anaerobe, was isolated from a bovine digital dermatitis (BDD)-infected dairy cattle in Chungnam, Korea. Initial data indicated that T. phagedenis KS1 exhibited putative virulent phenotypic characteristics. This study reports the whole genome assembly and annotation of T. phagedenis KS1 (KCTC14157BP) to assist in the identification of putative pathogenicity related factors. The whole genome of T. phagedenis KS1 was sequenced using PacBio RSII and Illumina HiSeqXTen platforms. The assembled T. phagedenis KS1 genome comprises 16 contigs with a total size of 3,769,422 bp and an overall guanine-cytosine (GC) content of 40.03%. Annotation revealed 3,460 protein-coding genes, as well as 49 transfer RNA- and 6 ribosomal RNA-coding genes. The results of this study provide insight into the pathogenicity of T. phagedenis KS1.
Objective: Muscle fiber types, numbers and area are crucial aspects associated with meat production and quality. However, there are few studies of pig muscle fibre traits in terms of the detection power, false discovery rate and confidence interval precision of whole-genome quantitative trait loci (QTL). We had previously performed genome scanning for muscle fibre traits using 183 microsatellites and detected 8 significant QTLs in a White Duroc×Erhualian F2 population. The confidence intervals of these QTLs ranged between 11 and 127 centimorgan (cM), which contained hundreds of genes and hampered the identification of QTLs. A whole-genome sequence imputation of the population was used for fine mapping in this study. Methods: A whole-genome sequences association study was performed in the F2 population. Genotyping was performed for 1,020 individuals (19 F0, 68 F1, and 933 F2). The whole-genome variants were imputed and 21,624,800 single nucleotide polymorphisms (SNPs) were identified and examined for associations to 11 longissimus dorsi muscle fiber traits. Results: A total of 3,201 significant SNPs comprising 7 novel QTLs showing associations with the relative area of fiber type I (I_RA), the fiber number per square centimeter (FN) and the total fiber number (TFN). Moreover, one QTL on pig chromosome 14 was found to affect both FN and TFN. Furthermore, four plausible candidate genes associated with FN (kinase non-catalytic C-lobe domain containing [KNDC1]), TFN (KNDC1), and I_RA (solute carrier family 36 member 4, contactin associated protein like 5, and glutamate metabotropic receptor 8) were identified. Conclusion: An efficient and powerful imputation-based association approach was utilized to identify genes potentially associated with muscle fiber traits. These identified genes and SNPs could be explored to improve meat production and quality via marker-assisted selection in pigs.
PEG를 이용하여 WGA 수행 시 DNA 증폭 효율을 높이고 이를 식중독 세균의 DNA 증폭 및 검출에 적용하고자 하였다. 등온 증폭 반응인 WGA에 여러 종류의 PEG를 첨가하여 증폭한 결과, 1.5% 농도의 PEG 4,000을 첨가하는 것이 가장 효율이 높음을 알 수 있었다. 증폭 정도를 정량적으로 파악하기 위하여 3종의 식중독 세균 DNA를 이용하여 WGA를 수행하였으며 real-time PCR로 정량분석하였다. S. Typhimurium, L. monocytogenes, V. parahaemolyticus의 경우에 WGA를 하지 않은 DNA에 비하여 각각 7,777.01배, 9,981.22배, 1,239.03배 정도로 DNA의 양이 증폭되는 것을 확인하였다. 또한 PEG를 첨가함으로써 18배에서 40배의 핵산 증폭 효과가 더 있음을 알 수 있었다. 따라서 식품에 미량의 농도로 존재하는 식중독 세균은 PEG가 첨가된 WGA 반응을 통하여 검출 가능성을 높일 수 있음을 알 수 있었다.
Plant breeders have focused on improving plant architecture as an effective means to increase crop yield. Here, we identify the main-effect quantitative trait loci (QTLs) for plant shape-related traits in rice (Oryza sativa) and find candidate genes by applying whole genome re-sequencing of two parental cultivars using next-generation sequencing. To identify QTLs influencing plant shape, we analyzed six traits: plant height, tiller number, panicle diameter, panicle length, flag leaf length, and flag leaf width. We performed QTL analysis with 178 $F_7$ recombinant inbred lines (RILs) from a cross of japonica rice line 'SNU-SG1' and indica rice line 'Milyang23'. Using 131 molecular markers, including 28 insertion/deletion markers, we identified 11 main- and 16 minor-effect QTLs for the six traits with a threshold LOD value > 2.8. Our sequence analysis identified fifty-four candidate genes for the main-effect QTLs. By further comparison of coding sequences and meta-expression profiles between japonica and indica rice varieties, we finally chose 15 strong candidate genes for the 11 main-effect QTLs. Our study shows that the whole-genome sequence data substantially enhanced the efficiency of polymorphic marker development for QTL fine-mapping and the identification of possible candidate genes. This yields useful genetic resources for breeding high-yielding rice cultivars with improved plant architecture.
We aimed to identify genomic variations as well as the marker genes related with chronic mitral valve disease (CMVD) in Canis lupus familiaris using whole genome resequencing, which provides valuable resources for further study. Two ten-year old female Canis lupus familiaris English cocker spaniels were used for this study, one control and one who had been diagnosed as CMVD. For the whole genome resequencing, muscles from the left ventricular wall were collected from each dog. With the HiSeq DNA Shotgun library and $HiSeq^{TM}$ 2000 platform, whole genome resequencing was performed. From the results, we identified 5 million and 6 million variants in gene expression in the control and CMVD-diagnosed subject, respectively. We then selected the top 1,000 genes from the SNP, INS, and DEL mutation and 675 genes among them were overlapped for every mutation between the control and CMVD-diagnosed patient. Interestingly, in both groups, the intron variant (91.16 and 91.18%) and upstream variant (3.10 and 3.08%) are most highly related. Among the overlapped 675 genes, gene ontology for intracellular signal transduction is highly counted in INS, and DEL, and SNPs (35, 33, 31, respectively). In this study, we found that the COL and CDH gene families could be key molecules in identifying the difference in gene expression between control and CMVD-diagnosed dogs. We believe further studies will prove the importance of variants in key molecule expression and that these data will serve as a valuable foundation stone the study of canine CMVD.
In the present study, fast and robust methods for the next generation sequencing (NGS) were developed for analysis of PRRSV full genome sequences, which is a positive sensed RNA virus with a high degree of genetic variability among isolates. Two strains of PRRSVs (VR2332 and VR2332-R) which have been maintained in our laboratory were used to validate our methods and to compare with the sequence registered in GenBank (GenBank accession no. EF536003). The results suggested that both of strains had 100% coverage with the reference; the VR2332 had the coverage depth from minimum 3 to maximum 23,012, for the VR2332-R from minimum 3 to maximum 41,348, and 22,712 as an average depth. Genomic data produced from the massive sequencing capacities of the NGS have enabled the study of PRRSV at an unprecedented rate and details. Unlike conventional sequence methods which require the knowledge of conserved regions, the NGS allows de novo assembly of the full viral genomes. Therefore, our results suggested that these methods using the NGS massively facilitate the generation of more full genome PRRSV sequences locally as well as nationally in regard of saving time and cost.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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