• 한국잠사곤충학회지
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• 제49권2호
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• pp.37-42
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• 2007

락토페린 cDNA 유전자를 도입시킨 누에 형질전환 실험을 수행한 결과, 다음과 같은 결과를 얻을 수 있었다. 1. 사람 GI-101 세포주의 mRNA로부터 클로닝 된 락토페린 cDNA 유전자의 개시코돈 ATG와 종결코돈 TAA를 포함하는 open reading frame(2,136 bp) 영역을 확인하였다. 2. Sf9 배양세포의 조추출물 시료에 의한 Western blot 분석 결과, 락토페린으로 추정되는 약 80kDa의 단백질 발현을 확인하였다. 3. 누에 형질전환에 높은 전이효율과 활성을 나타내는 트랜스포존을 이용한 전이벡터 pPIGA3GFP를 개조하여 락토페린 cDNA를 삽입시킨 전이벡터 pPT-HLf를 구축하였다. 4. DNA 미량 주사법에 의한 누에 형질전환 개체의 발현 비율은 약 6.7% 정도를 나타냈다. 5. 형질전환 누에(G0) 동일한 세대간 교배 및 처리하지 않은 성충간의 역교배에 의한 차세대(G1) 개체로부터 락토페린 유전자와 동일한 크기의 2.1 kb DNA 단편을 확인 할 수 있었으며, 형질전환 G1 세대의 조추출물 시료에 의한 Western blot 분석 결과, 표준 락토페린 항체와 반응하는 약 80 kDa의 단백질 발현을 확인할 수 있었다.

• 한방안이비인후피부과학회지
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• 제36권1호
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• pp.21-39
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• 2023

Objectives : The purpose of this study was to investigate the anti-inflammatory effect of Goihwa-san water extract(GHS) in vitro & in vivo. Methods : In vitro, we evaluated the anti-inflammatory effect of GHS by comparing the Raw 264.7 cells with 10, 30, 100, 300㎍/㎖ of GHS for 1 hour before Lipopolysaccharide(LPS) to the single LPS treated group. We examined the relative cell viability by MTT assay and the relative level of LPS, Loxoribine(LOX), Peptidoglycan(PGN), Flagellin(FLA)-induced NO production by using Griess reagent and measured relative iNOS protein level and COX-2 protein level by using western blot and Image analyzing system. We measured the production of TNF-α, IL-1β, and IL-6 by each ELISA kits and then measured the relative levels of IκBα, p-IκBα in whole-cell lysate fraction and NF-κB in nuclear fraction by using western blot and Image analyzing system. In vivo, we induced the paw edema by subcutaneous injection of 100㎕/rat CA and measured the swelling volume of paw by using a plethysmometer and then measured the relative iNOS protein level by using western blot. Results : As a result, in vitro, LPS, PGN-induced NO production was significantly inhibited by pretreatment with GHS. GHS reduced LPS, PGN-induced iNOS expression, PGN-induced COX-2 expression and LPS-induced production of cytokine(TNF-α, IL-1β, IL-6). Expression of IκBα was increased by pretreatment with GHS 100㎍/㎖. And the expression of p-IκBα and NF-κB were decreased by pretreatment with GHS 100㎍/㎖. In vivo, CA-induced inflammation rat model was used for the evaluation of the anti-inflammatory effect of GHS. 0.3 or 1.0g/kg of GHS significantly reduced the increases of paw swelling and iNOS expression in paw tissues. Conclusions : These results show that GHS can decrease inflammatory response via inhibition of the NF-κB pathway in vitro. And in vivo, the anti-inflammatory effect suggest the clinical basis of GHS for the treatment of inflammatory diseases.

• 대한본초학회지
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• 제35권1호
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• pp.35-44
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• 2020

Objectives : The objective of this study was to investigate the therapeutic effect of Corni Fructus 30% ethanol extract (CFE) on the monosodium iodoacetate (MIA)-induced osteoarthritis rats. Methods : The subjects were divided into 4 groups ; Normal group (N, n=10), MIA-induced osteoarthritis control group (Con, n=10), indomethacin 5 mg/kg treated group (INDO, n=10), CFE 200 mg/kg treated group (CFE, n=10). Blood and articulation tissues were collected after two weeks of drug administration. Oxidative stress was analyzed with reactive oxygen species (ROS), peroxynitrite (ONOO-). And the Nuclear factor erythroid-2 (Nrf2), heme oxygenase-1 (HO-1), superoxide dismutase (SOD), catalase, glutathione peroxidase-1/2 (GPx-1/2), Nuclear Factor Kappa B p65 (NF-κBp65), cyclooxygenase-2 (COX-2), inducible nitric oxide synthase (iNOS), tumor necrosis factor-alpha (TNFα), interleukin-6 (IL-6), Interleukin 1β (IL-1β), matrix metalloproteinase-1 (MMP-1), and tissue inhibitor of metalloproteinases-1 (TIMP-1) were investigated by western blot. Results : The administration of CFE showed a significant reduction of changes in relative hind paw weight distribution. Reactive oxygen species (ROS) and peroxy nitrite (ONOO-) levels of articulation tissues were significantly decreased in CFE compared to the control group. Western blot measurements of Nrf2, HO-1, SOD, catalase, GPx-1/2 showed that the CFE group was increased compared to the Con group. And western blot measurements of NF-κBp65, COX-2, iNOS, TNFα, IL-6, IL-1β showed that the CFE group was reduced compared to the Con group. Also CFE group decreased MMP-1 and increased TIMP-1. Conclusion : Based on the above results, it can be seen that osteoarthritis is improved when Corni Fructus 30% ethanol extract treated.

• 미생물학회지
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• 제40권2호
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• pp.147-153
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• 2004

단백질의 serine이나 threonine의 수산기에 N-acetyl-${\beta}$-D-glucosamine (O-GlcNAc)으로 변형되는 당쇄는 대부분의 진핵세포에서 광범위하게 일어나는 번역 후 수식의 일종으로 여러 세포 내 현상에 관여하고 있다. O-GlcNAc의 변형정도는 O-GlcNAc transfearse (OGT)와 O-linked N-acetyl-${\beta}$-D-glucosaminidase (O-GlcNAcase)에 의해 조절된다. O-GlcNAcase의 효소활성 조절물질을 탐색하기 위한 시험관 내 검정계를 확립하기 위해 재조합 O-GlcNAcase의 생산을 시도하였다. O-GlcNAcase 발현을 최적화하기 위한 배양조건을 검토한 결과 유도 배양온도 $30^{\circ}C$, 유도제인 L-arabinose 0.02%, 유도 배양시간 5시간 등으로 나타났다. 위의 조건에서 대장균 형질전환체를 배양하면서 한 시간 간격으로 배양액을 채취하여 세포를 파괴하고 얻은 효소용액의 활성은 배양 후 3시간에서 5시간까지는 급격히 증가하였으나 그 이후는 거의 증가하지 않았다. Western blot으로 발현된 단백질 양을 조사한 결과는 활성 그래프와 비슷한 양상을 보였다. 이렇게 생산한 O-GlcNAcase의 최적 반응조건은 pH 6.5, 반응온도 $45^{\circ}C$, 기질의 농도 2 mM, pH 6.5로 나타났다.

• 식물조직배양학회지
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• 제24권1호
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• pp.63-69
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• 1997

Erythropoietin(EPO)은 적혈구 모세포의 분화와 성장을 중재하는 당단백질이며 담배 식물체에서 재조합 사람 EPO를 생산하기 위해 CaMV 35S promoter를 갖는 발현 vector인 pBI$\Delta$GUS121, pBD$\Delta$ GUS121, pPEV-1을 이용하여 5.4kb의 EPO genomic DNA를 cloning 하였고 Agrobacterium tumefaciens에 의한 형질전환에 의해 Nicotiana tabacum (var. Xanthi)으로 도입되었다. Kanamycin을 포함하는 MS 배지에서 각각의 construct에 대하여 10 km 저항성 식물체들이 얻어졌다. 형질전환된 식물체의 게놈에 EPO genomic DNA의 정확한 결합은 polymerase chain reaction에 의해 332bP의 DNA 조각에 의해 확인되었으며 Northern blot 결과 1.8 kb의 전사체들이 식물체 잎에서 발현 축적되는 것이 확인되었다. Promoter의 수나 5'-UTS 서열에 의한 mRNA 양에는 변화가 없었지만 식물체 게놈에 결합된 위치 및 copy number에 의해 mRNA 수준에 영향을 주는 것으로 밝혀졌다. EPO 항체를 이용한 Western blot 결과 식물체에서 발현된 EPO 단백질의 크기는 동물세포에서 발현된 37kDa 보다 작은 30 kDa 이었다. 이는 식물체에서 modification(glycosylation) system은 동물세포에서와는 다르다는 것을 보여준다.

• Bulletin of the Korean Chemical Society
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• 제31권7호
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• pp.2091-2093
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• 2010

• Journal of Microbiology
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• 제34권4호
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• pp.379-383
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• 1996

Cryptosporidium parvum causes a life-threatening diarrhea in acquired immunodeficiency syndrome (AIDS) patients. THe sporozoite stage of C. parvum has been known to be a target in treating cryptosporidiosis in AIDS patients as it is an extracellular stage. A sporozoite was ultrastructurally observed. It has a creascent shape with a rounded posterior end and a tapering body. The compact nucleus was located at the posterior end. A monoclonal antibody was produced, which recognized a 43 kDa of sporozoite antigens in a western blot analysis and showed the surface labeling in immunofluorescence.

• 한국생명과학회:학술대회논문집
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• 한국생명과학회 2008년도 제49회 학술심포지움 및 국제학술대회
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• pp.69.2-69.2
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• 2008

• 미생물학회지
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• 제27권2호
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• pp.162-167
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• 1989

Western blot analysis of lysates of Streptococcus pneumoniae revealed a single polypeptide species that cross-reacted with E. coli RecA antiserum. The apparent molecular weight of this putative RecA protein analog (RecAsp) was 24, 000 smaller than any other known RecA analogue. The RecAsp protein was present at the same level in competent and non-competent cells.

• 한국수정란이식학회:학술대회논문집
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• 한국수정란이식학회 2004년도 제4회 발생공학 국제심포지움 및 학술대회
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• pp.62-62
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• 2004