Shanmugam, Srinivasan;Im, Ho Taek;Sohn, Young Taek;Kim, Kyung Soo;Kim, Yong-Il;Yong, Chul Soon;Kim, Jong Oh;Choi, Han-Gon;Woo, Jong Soo
Biomolecules & Therapeutics
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제21권2호
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pp.161-169
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2013
The objective of this study was to enhance the oral bioavailability (BA) of zanamivir (ZMR) by increasing its intestinal permeability using permeation enhancers (PE). Four different classes of PEs (Labrasol$^{(R)}$, sodium cholate, sodium caprate, hydroxypropyl ${\beta}$-cyclodextrin) were investigated for their ability to enhance the permeation of ZMR across Caco-2 cell monolayers. The flux and $P_{app}$ of ZMR in the presence of sodium caprate (SC) was significantly higher than other PEs in comparison to control, and was selected for further investigation. All concentrations of SC (10-200 mM) demonstrated enhanced flux of ZMR in comparison to control. The highest flux (13 folds higher than control) was achieved for the formulation with highest SC concentration (200 mM). The relative BA of ZMR formulation containing SC (PO-SC) in plasma at a dose of 10 mg/kg following oral administration in rats was 317.65% in comparison to control formulation (PO-C). Besides, the $AUC_{0-24\;h}$ of ZMR in the lungs following oral administration of PO-SC was $125.22{\pm}27.25$ ng hr $ml^{-1}$ with a $C_{max}$ of $156.00{\pm}24.00$ ng/ml reached at $0.50{\pm}0.00$ h. But, there was no ZMR detected in the lungs following administration of control formulation (PO-C). The findings of this study indicated that the oral formulation PO-SC containing ZMR and SC was able to enhance the BA of ZMR in plasma to an appropriate amount that would make ZMR available in lungs at a concentration higher (>10 ng/ml) than the $IC_{50}$ concentration of influenza virus (0.64-7.9 ng/ml) to exert its therapeutic effect.
국내에서 채집한 5종의 토마토황화잎말림바이러스(Tomato yellow leaf curl virus, TYLCV) 분리주들에 대하여 PCR법을 이용하여 염기서열을 결정하였다. 전체 유전체의 1.9배 복제수를 가지는 감염성 클론을 제작하기 위하여, PCR로 증폭된 TYLCV DNA를 식물형질전환용 벡터에 각각 도입시켰다. TYLCV 저항성 평가를 위하여 저항성 토마토 시판 품종과 육성 계통을 각각 TYLCV 분리주를 가지고 있는 Agrobacterium tumefaciens로 접종하였다. 감수성 품종인 'Super-sunroad' 품종은 접종 30일 후에 상엽에 황화, 위축 증상을 나타낸 반면, TYLCV에 대한 저항성유전자들로 알려진 Ty-1 또는 Ty-3 유전자를 포함하고 있는 TY12, GC9, GC171, GC173 등의 토마토 육성 계통은 전신 잎에 TYLCV 병징 발현이 없었으므로 이들 계통은 TYLCV 저항성으로 판별되었다. Agroinfiltration을 통한 접종 30일에 감수성 품종과 저항성 품종 간에 TYLCV 병징 차이가 뚜렷하였다. 특이적 프라이머들을 이용한 실시간 PCR법에 의해 TY12, GC9, GC171, GC173 육성 계통에서 TYLCV DNA가 검출되었지만, 저항성 계통에서 TYLCV DNA 축적 수준은 감수성 토마토 품종에서의 TYLCV DNA 축적 수준보다 매우 낮았다. 유사한 병징 세기 및 TYLCV DNA 축적 수준이 담배가루이를 통하여 감수성과 저항성 토마토 품종 및 육성 계통에 TYLCV를 감염시켰을 때에도 관찰되었다. Agroinfiltration 시 아그로박테리움의 농도는 토마토 품종의 TYLCV 저항성 반응에 영향을 미치지 않았다. 따라서 본 연구결과들은 agroinfiltration을 통한 TYLCV 접종이 담배가루이를 통한 TYLCV 감염처럼 효과적이며 TYLCV 저항성 토마토 육성 프로그램에 활용 가능하다는 것으로 보여주었다.
새우양식은 90년대 서해안을 중심으로 빠르게 발달하여 2001년에는 2,605ha의 면적에서 3,268톤이 생산되었으나 2004년에는 2,368톤으로 해마다 감소되고 있다. 이러한 원인 중의 하나는 흰반점바이러스(WSSV)에 의한 대량폐사에 기인하는 것으로 알려져 있다. 흰반점바이러스는 현재 세계적으로 새우양식산업에 심각한 피해를 입히는 바이러스로 우리나라에는 1993년 처음 보고된 후 해마다 새우양식장에 반복적인 대량폐사를 유발시킨다. 축제식 새우양식장의 질병 피해를 감소시키기 위한 방법의 하나로서 새우와 어류, 패류, 해조류를 함께 복합양식하는 방법이 많은 연구되어 있으며 또한 육식성 어류와의 복합양식은 질병새우를 선택적으로 포식함으로써 새우의 바이러스 발병을 지연 혹은 억제시키는 것으로 알려져 있다. 새우양식장에 육식성 어류인 황복 Takifugu obscurus을 복합적으로 사육함으로써 바이러스 억제 효과를 조사하기 위하여 수면적 $1,616{\sim}1,848\;m^2$의 4개 축제식 양식장에 각각 흰다리새우($46.9/m^2$), 흰다리새우($43.4/m^2$)+황복($0.22/m^2$), 대하($24.6/m^2$), 대하($30.3/m^2$)+황복($0.25/m^2$)의 밀도로 입식하고 95일간 사육하였다. 대하 단독구와 복합구는 각각 51일, 57일째 WSSV 발병으로 전량 폐사하였다. 흰다리새우 단독구의 생존율은 18.2%인 반면 복합구의 생존율은 32.4%이며 단위생산량은 단독구에 비해 69.2%가 높아 흰다리새우는 황복과 복합양식이 단독양식에 비해 훨씬 유리한 것으로 나타났다. 사육수의 영양염(TAN, $NO_2-N,\;NO_3-N$) 농도는 복합구가 단독구에 비해 2배 이상 높았으나 전체적으로 새우의 성장에 적정범위를 유지하였다. 대하는 흰다리새우에 비해 WSSV에 대한 감수성이 높은 것으로 나타났으며 따라서 대하와의 복합양식은 이러한 점이 충분히 고려되어야 할 것이다.
본 연구에서는 LP-BM5 murine AIDS virus에 감염된 면역 결핍동물 모델을 이용하여 실험기간 10주 동안 ${\beta}$-1,3/1,6-glucan, 유산균 및 ${\beta}$-1,3/1,6-glucan+유산균의 식이가 면역활성에 미치는 영향을 조사하였다. 그 결과 LP-BM5 murine AIDS virus에 감염으로 면역능이 떨어진 T세포 증식능은 홍삼대조군과 비교하여도 유의적으로 감소된 T 세포증식능을 증가시키는 것으로 나타났고, B 세포 증식능은 감염 대조군에 비하여 유의적으로 증가된 B 세포 증식능을 감소되었다. cytokine 생성능에서는 Th1 type cytokine중에서 IL-2, IL-12, IL-15는 감염대조군에 비하여 분비량을 증가시키는 것을 확인할 수 있었고, IFN-${\gamma}$는 유산균과 ${\beta}$-1,3/1,6-glucan을 각각 처리군이 혼합처리군보다 증식능이 증가하였다. TNF-${\alpha}$는 감염대조군에 비하여 유의적으로 감소하였다. Th2 cytokine 들의 분비량 측정에서 IL-4, IL-6, IL-10 측정 결과 감염대조군에서 유의적으로 억제되어 Th1/Th2 type cytokine 발현을 조절하여 면역항상성을 유지하는 것으로 보였다. 면역글로블린 분비량측정에서 IgE, IgA, IgG 모두 감염대조군에 비하여 유의적으로 떨어지는 것으로 나타났다. 이로서LP-BM5 murine AIDS virus에 감염된 면역 결핍동물 모델에 ${\beta}$-1,3/1,6-glucan+유산균군을 혼합처리로 면역조절의 효능이 있음을 확인할 수 있었다.
Entecavir is a potent and selective guanosine analogue that has demonstrated a significant antiviral efficacy against hepatitis B virus (HBV). The aim of this study was to evaluate the safety and pharmacokinetic profile after a single dose of entecavir 1 mg administration in Korean healthy male subjects. Eight volunteers were enrolled. After a single dose of 1 mg entecavir was orally administered, blood samples were collected at specific time intervals from 0-168 hours. The plasma concentrations of entecavir were determined by LC-MS/MS. The pharmacokinetic parameters were determined from the plasma concentration-time profiles. The mean values for $AUC_{last}$ and $AUC_{inf}$ were $14.84{\pm}7.81ng{\cdot}hr/mL$ and $20.71{\pm}8.80ng{\cdot}hr/mL$, respectively. The mean value for $C_{max}$ was $9.19{\pm}4.91ng/ml$ and median value for $t_{max}$ was 0.58 hr. No adverse events were reported by subjects or found on analysis of vital signs or laboratory tests. The results are suggested to be useful in clinical trials of entecavir in Korean subject including bioequivalence study.
Mycoplasma Pneumonia of swine (MPS) decreases the daily growth of pigs, and, co-infection with a virus sometimes causes severe pneumonia. Genetic selection of pigs resistant to the pulmonary MPS lesion might solve the economic loss due to MPS in animal production. Here, we examined the immunophenotype of Landrace line (Miyagino L2), genetically selected to reduce the incidence of pulmonary MPS lesion for 5 generations in Miyagi Prefecture Animal Industry Experiment Station. Although this line is expected to be resistant to the pulmonary MPS lesion, the biological characteristics of its immune function are not clear. We investigated details of the immunorelated phenotype of Miyagino L2 at the hematological and molecular biological level, including cytokine expression, and compared the results with that of non-genetically selected Landrace. Miyagino L2 showed decreased antigen-specific IgG and IgM production and increased CD8-positive T-cell population, and high levels of cortisol concentration, suggesting that the MPS-resistant phenotype is associated these immunological differences. Additionally, T-cell CD4 expression was highly correlated with the MPS expected breeding value. Although the detailed mechanisms underlying this high correlation remain unknown, our result suggested that the genetic selection of the expression level of CD4 might be useful to improve MPS resistance in pig production.
For the purpose of developing new anti-HIV agents from natural sources, the extracts of Kalopanax pictus were tested for their inhibitory effects on HIV-1 replication and its essential enzymes as the reverse transcriptase (RT). protease and α-glucosidase. In the assay of HIV-1-infected human T-cell line, water extracts of stem and leafstalk inhibited the HIV-1-induced cytopathic effects with Ie (inhibitory concentration) of 25 and 50㎍/㎖, respectively. Moreover water extracts (100㎍/㎖) of stem and leafstalk showed strong activity of 80% and 90% on anti-HIV-1 RT using Enzyme Linked Oligonucleotide Sorbent Assay (ELOSA) method. In the HIV-1 protease inhibition assay, aqueous stem extract inhibited the activity of the enzyme to cleave an oligopeptide, resembling one of the cleavage sites in the viral polyprotein which can only be processed by HIV-1 protease with 58%, but no glucosidase inhibitory activities. We found out this result, for these samples it is possible that the inhibition of the viral replication in vitro is due to the inhibition at least one of RT and protease. It would be of great interest to identify the compounds which are responsible for this inhibition, since all therapeutically useful agent up to date are RT, PR and α-glucosidase inhibitors.
Genus Nicotiana has 76 species including N. tabacum. These plants are used not only as a material for cigarette manufacturing but also as ornamental plant, medicinal plant, poisonous substance plant, and bug repellent plant. N. tabacum is used as a main material for cigarette manufacturing with N. rustica. N. sylvestris and N. alata is used as ornamental plants because of their beautiful flowers and N. rustica is used for bug repellent or pesticide because of its high concentration of nicotine. N. glauca, a tree tobacco, is used for bio-fuel production. N. tabacum is used as a popular model plant system for degeneration, regeneration, and transformation. N. benthamiana is also used as a model system for foreign gene expression by agroinfiltration. The transformation ability of tobacco plant is a good target for molecular farming. Hepatitis B virus envelop protein, E. coli heat-labile enterotoxin, diabetes autoantigen, and cholera toxin B subunit were produced using tobacco plants. Secondary metabolites of tobacco include nicotine, anabasine, nornicotine, anatabine, cembranoid, solanesol, linoleic acid, rutin, lignin and sistosterol, and they are used for various medicine productions which cannot be produced by organic synthesis for their complicated structures. In conclusion, we have to understand the applicability of tobacco plant in detail and study to enlarge the usage of the plants.
뿌리에 의한 영양번식으로 증식하는 지황은 바이러스에 심하게 삼염되어있어 종자를 이용한 우량종근을 생산할 목적으로 종자특성과 발아에 미치는 요인과 알진산으로 인공피막한 처리를 검토한 결과는 다음과 같다. 지황종자의 특성으로 협당종자수는 서천재래 61개에 비하여 지황1호가 207개로 많았고 1,000립중도 서천재래 70mg에 비하여 지황1호가 130mg으로 무거웠다. 지황종자는 당년채종('98)한 종자보다 전년도 채종 후 상온 저장한 종자에서 높은 발아율을 보여 미세립 종자지만 휴면현상이 있었고 온도 차이에 따른 발아는 차이를 보여 $15^{\circ}C$에서는 9일까지 발아하지 않았으나, $30^{\circ}C$에서는 2일후 28.5%, 6일후 41.6%로 높았다. 종자파종의 생력화를 목적으로 지황종자를 알진산 피막처리 하였을 때 파종후 20일에 발아율이 83.2% 정도였다. 알진산 처리농도는 2%의 저농도에서 발아율이 높았고 인공피막내 함유 종자수는 3개이상까지 많을수록 양호하였으며 저온처리는 초기발아가 지연되었다.
이 실험에서 우리는 얌의 기내 비대근 유도와 순화에 영향을 미치는 탄소급원의 효과를 연구하였다. 첫 번째로 기내 비대근 유도를 위한 탄소원의 종류와 농도의 효과를 실험하였다. 7% sucrose처리에서 기내 비대근 유도 효율이 가장 높았으며, glucose처리에서는 기내비대근이 형성되지 않았다. 두 번째로 기내식물체의 순화 후 생존율과 비대근 형성율을 실험하였다. 순화 후 형성된 비대근의 직경(6.1 mm)과 생중량(0.5 g)은 7% sucrose에서 생육한 기내식물체에서 가장 높았다. 저농도(3%)의 sucrose처리에서 생육한 기내식물체의 순화 후 생존율은 100%였으나 식물체의 생육과 발달이 억제되었다. 이러한 결과는 얌의 기내 비대근 형성과 순화를 위해 7% sucrose처리가 적정하며 이러한 기술은 얌의 바이러스 및 병 저항성 클론과 우수 개체의 번식을 위해 적용이 가능하다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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