• Toxicological Research
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• 제12권1호
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• pp.17-20
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• 1996

The effect of Fumonisin B1, a mycotoxin produced by Fusarium moniliforme on bacterial viruses P1 and Lambda, was investigated by the virus plaque assay. Fumonisin B1 inhibited the P1 viral multiplication in the concentration range from $100{\mu}g$/ml to $400{\mu}g$/ml. The inhibition was Fumonisin B1 concentration-dependent. Another bacterial virus Lambda multiplication was also inhibited by lower concentration of Fumonisin B1 ($10{\mu}g$/ml~$50{\mu}g$/ml). This inhibition was dependent on Fumonisin B1 and on virus-Fumonisin B1 reaction time. Sensitivity of bacteriophage Lambda to Fumonisin B1 was higher than that of P1 virus. Lambda vital DNA was treated in vitro with Fumonisin B1 at various concentration. Significant DNA fragmentation by Fumonisin 191 was observed in the agarose gel electrophoresis. Lambda viral DNA was partially digested even in the Fumonisin B1 $10{\mu}g$ and the level of its fragmentation was dependent on Fumonisin B1 amount up to $30{\mu}g$ per assay.

• 한국가축번식학회지
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• 제25권2호
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• pp.171-180
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• 2001

형질전환 가금의 생산에 있어서 retrovirus vector를 이용하는 방법은 다양한 종류의 표적세포에 대하여 retrovirus 고유의 감염성에 의한 외래 유전자의 전이가 용이하고, 전이된 유전자가 진정염색질 영역 내로 선택적으로 도입될 수 있으며 유전적으로 안정성을 나타내므로 매우 효과적인 방법이다. 그러나 가금에서는 초기 배발달에 의한 급격한 세포의 수적 증가로 인해 고감염성의 virus의 획득이 요구되므로, 이를 위하여 virus stock의 농축에 있어 보다 안정적이고 pantropic인 vesicular stomatitis virus (VSV G) glycoprotein를 envelope로 가지는 pseudotyped retrovirus vector system을 이용하였으며, marker gene으로 eGFP gene이 발현되는 retrovirus를 생산하였다. 이 virus를 이용하여 여러 가지 표적세포와 primary culture한 CEF세포를 감염시켜 GFP의 발현을 확인하였으며, 농축한 virus stock은 stage X의 계란을 선택하여 windowed egg를 제작한 후 배하층에 주입하였다. 형질전환 닭은 정상 발생한 닭에 비하여 저조한 발생율을 보였으나 PCR을 이용하여 외래 유전자의 도입을 확인한 결과 100%인 것으로 나타났다. 또한 한 개체 내에서 유전자의 도입이 폐, 간, 정소, 소장 등의 여러 장기에서 확인되었다.

• 한국잠사곤충학회지
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• 제17권2호
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• pp.101-118
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• 1975

가잠에 있어서 세포질 다각체 바이러스의 병원성 및 이형 바이러스 접종에 의한 유발 간섭현상을 구명하기 위하여 현장여품종인 잠103$\times$잠104의 원종과 교잡종에 있어서 육각형 및 사각형 세포질다각체 바이러스의 병원성 이형 세포질다각체 바이러스 접종에 의한 잠재성 바이러스의 활성화 및 활성화된 세포질다각체 바이러스와 접종한 세포질다각체 바이러스 사이의 간섭현상을 조사한 결과는 다음과 같다. 1. 세포질다각체 바이러스의 병원성 1) 가잠의 원종 (잠103, 잠104) 및 교잡종(잠103$\times$잠104)에 있어서 육각형 세포질다각체 바이러스의 병원성은 상호간에 고도의 유의성이 있어 교잡종이 가장 낮은 발병률을 보였고 일본종이 중간을 나타냈으며 중국종이 가장 높은 발병률을 보였다. 사각형 세포질다각체 바이러스에서도 유의성을 나타내어 있었으나 교잡종과 일본종이 같은 수준이고, 일본종과 중국종이 같은 수준이었으며, 교잡종과 중국종 사이에는 유의성이 있었다. 2) 접종령기에 따르는 병원성은 육각형 및 사각형 세포질다각체 바이러스가 다같이 고도의 유의성이 있었으며 2령기잠의 접종이 4령기잠이 접종보다 발병률이 높았다. 3) 접종된 병원체의 농도에 있어서 육각형 및 사각형 세포질다각체 바이러스의 병원성은 다같이 고도의 유의성이 있었으며, 농도가 높을수록 병원성이 높았다. 2. 이형 바이러스 접종에 의한 유발 및 간섭현상 1) 원종 및 교잡종에 있어서는 교잡종보다 원종에서 유발률이 높았으며 원종에서는 일본종보다 중국종에서 유발률이 높았다. 2) 접종 령기에 있어서는 2령기잠 접종이 4령기잠 접종보다 유발률이 높았다. 3) 사각형 세포질다각체 바이러스의 경구접종에 의한 육각형 세포질다각체 바이러스이 활성화 정도는 저농도에서 높았으며 고농도에서는 매우 낮았다. 4)육각형 세포질다각체 바이러스의 경구접종에 의한 사각형 세포질다각체 바이러스의 활성화 정도는 저농도에서는 매우 낮았으며 고농도에서는 전혀 나타나지 않았다. 5) 혼합감염은 2령기잠의 접종이 4령기잠의 접종보다 높았으며 4.2$\times$$10^{6}$/ml 농도에서 가장 높았다. 6)2령기잠에 사각형 세포질다각체 바이러스를 접종할 경우 저농도에서는 활성화한 육각형 세포질다각체 바이러스가 접종한 사각형 세포질다각체 바이러스가 활성화한 육각형 세포질다각체 바이러스를 간섭하는 것으로 생각된다. 또한 4.2$\times$$10^{6}$/ml 농도를 중심으로 개체 안에서의 육각형과 사각형 세포질다각체 바이러스 사이의 간섭현상이 평형상태를 이루는 것으로 생각된다.

• Journal of Microbiology
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• 제45권1호
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• pp.48-52
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• 2007

A new procedure for the concentration of nonoviruses from water samples has been developed. This procedure (calcium flocculation-citrate dissolution method) uses the following steps: virus flocculation formed by treatment with 1 M $CaCl_2$ and 1 M $Na_2HPO_4$, virus release by sodium citrate dissolution (0.3 M Na citrate, pH 3.5), and virus re-concentration by ultrafiltration. When reverse transcription (RT)-PCR was performed after the procedure, the overall detection sensitivity for seeded noroviruses in a one liter drinking water sample was as low as 1 RT-PCR unit, which is equal to a $10^{-6}$ dilution of the virus sample. This approach showed at least a 5-fold-higher sensitivity than the current method with its three steps of adsorption-elution-concentration. The newly developed procedure was used to test different brands of bottled drinking water from China for putative contamination with noroviruses. A total of 144 samples were analyzed; all of the samples were negative for norovirus specific nucleic acids.

• 한국가축번식학회지
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• 제21권4호
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• pp.397-403
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• 1997

Retrovirus vector를 이용한 형질전환 동물의 생산에 있어서 시급히 선행되어야 할 가장 중요한 요소는 표적세포에 대해 높은 감염도를 가진 virus를 생산하는 system의 개발이다. 이러한 문제를 해결하기 위한 일환으로 본 연구에서는 세 가지 방법을 사용하여 세포 배양액 속의 virus의 농도를 높여줌으로써 retrovirus vector system에서 생산되는 virus의 낮은 감염도를 극복하고자 하였다. 이 실험에서 얻어진 결과는 다음과 같다. 1) Virus를 생산하는 세포(pG13-LN$\beta$Z retrovirus producing cell)를 5mM의 Na-butyrate로 처리했을 때 virus titer는 소의 embryonic trachea 표적세포에서 약 3배의 증가를 나타냈다. 2) Virus가 들어있는 세포 배양액을 ultrafiltration을 통해 농축한 결과, 농축액 속의 virus titer는 대조구에 비해 약 3.6배 증가하였다. 3) 초원심분리를 통해 농축된 virus stock의 titer는 소의 embryonic trachea 표적세포에서 약 1.0$\times$105LacZ+TU/ml였는데 이 방법은 대조구에 비해 약 12.5배 만큼의 titer의 향상을 가져왔다. 따라서, 이와같이 농축된 virus stock을 이용할 경우 retrovirus vector system을 이용한 소의 수정란에의 유전자 전이율을 현저히 향상시킬 수 있으리라 사료된다.

• Food Science and Biotechnology
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• 제18권5호
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• pp.1150-1154
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• 2009

Low levels of virus contamination and naturally occurring reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) inhibitors restrain virus detection in oysters. A rapid and efficient oyster-processing procedure that can be used for sensitive virus detection in oysters was developed. Poliovirus type 1 Sabin strain was used to evaluate the efficacy of virus recovery. The procedure included (a) acid-adsorption and elution with buffers (0.25M glycine-0.14 M NaCl, pH 7.5; 0.25M threonine-0.14M NaCl, pH 7.5); (b) polyethylene glycol (PEG) precipitation; (c) resuspension in Tween 80/Tris solution and chloroform extraction; (d) the second PEG precipitation; (e) viral RNA extraction with TRIzol and isopropanol precipitation; and (f) RT-PCR combined with semi-nested PCR. The overall recovery of elution/concentration was 19.5% with poliovirus. The whole procedure usually takes 19 hr. The overall detection sensitivity was 4 RT-PCR units of genogroup I norovirus (NoV) and 6.4 RT-PCR units of genogroup II Nov/25 g of oysters initially seeded. The virus-detecting method developed in this study should facilitate the detection of low levels of NoV in oysters.

• KSBB Journal
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• 제26권2호
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• pp.107-111
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• 2011

The essential operating parameters in virus vaccine production are multiplicity of infection (MOI), harvest time, and infection time. Stimulating agents also can be applied in order to improve vaccine productivity further. We investigated the optimum operating conditions in porcine transmissible gastroenteritis virus (TGEV) vaccine production and the applicability of sodium butyrate (NaBu) as a stimulating agents for the improvement of vaccine productivity. The optimum MOI, infection time, and harvest time for high production of TGEV by swine testicle (ST) cells were found to be 0.0001 pfu/cell, 3 day after cell inoculation, and 24 hpi, respectively. NaBu is known as a histone deacetylase inhibitor that has been widely used for the high expression of recombinant protein using mammalian cells and for the enhancement of virus propagation. So we tried to examine the potential of NaBu as a stimulating agent and to determine the optimum concentration by comparing TGEV titers with different range of NaBu concentration. TGEV titer with 5 mM NaBu was 1.5 times higher than control. Therefore, we concluded that NaBu can be a promising agent for stimulating various vaccine production including TGEV and the optimum NaBu concentration for TGEV production was determined to be 5 mM.

• 대한한방종양학회지
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• 제4권1호
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• pp.199-209
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• 1998

In order to find antiviral effect against Human immunodeficiency virus(HIV), Herpes simplex virus type I(HSV-1) and II(HSV-2) from herb medicines, publicated 29 paters on anti-viral effect of herbal medicines and a convenient virus-induced cytopathic effect (CEP) inhibition assay was introduced. The major virus on experiment are HIV, Hepatitis B virus and HSV-1,2. Those of other studies showed inhibition of infected virus DNA replication and screening test of herbal medicines. More than 15 extractions were prepared by pure water boiling from herbal medicines, and their toxicity of infected cell and anti-viral activities were evaluated. Among them, the major part of herbal medicines showed cell stability compared with the contrast. Cytotoxic concentration (CC) of the $H_2O$ extracts of Padoo against HIV was <4.0, Hyungbangpaedoksan against HIV was 9.3, Whangyonhaedoktang against HIV-1 and HSV-2 was 15.3. These are high level cytotoxic concentration compared with the contrast. But antiviral effect was unable to figure out for selective $index(SI)=CC_{50}/EC_{50}$. The other herbal medicines were unable to showed potent anti-HIV and anti-HSV activity. The antiviral activation using herbs in this thesis have unlimited objects, to select research object will help to show the direction of antiviral drug development that have less side effect and more excellent efficiency.

• KSBB Journal
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• 제9권3호
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• pp.272-278
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• 1994

약독화된 수두 바이러스(Varicella-zoster virus: VZV)를 샤람 폐세포(human embryonic lung c cells)에서 배양하였으며, 수두 바이러스의 생산에 미치는 혈청의 종류와 농도의 효과를 조샤하였다. 수두 바이러스는 바이러스 감염 비율이 높을수록 높 은 역가를 보였으며, 배양시간이 경과함에 따라 바 이러스 감염된 세포의 파괴로 인하여 세포수가 감소 되었다 .. Newborn calf serum(NCS), calf serum (CS), horse serum(HS) 등의 혈청을 샤용한 배양에서의 수두 바이러스의 역가는 CSis와 FBS를 사 용한 배양에서보다 낮아서 수두 바이러스 생산을 증 가하기 위해 이들 혈청의 사용은 적합하지 못하였 다. 그러나, calf serum iron supplemented(CSis) 혈청을 첨가한 배지에서의 세포 친화 바이러스(cell­a associated virus)와 세포 유리 바이러스( cell-free v virus)수율은 fetal bovine serum(FBS)을 첨가한 배지에서의 수율과 비슷하였으며, 고농도의 혈청사 용은 고려되어져야 할 요소이었다. 또한, 수두 바이 러스의 증식 벚 감염력 유지가 혈청성분과 농도에 의해서 영향을 받고 있음을 보였다.

• 한국생물공학회:학술대회논문집
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• 한국생물공학회 2002년도 생물공학의 동향 (X)
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• pp.271-272
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• 2002

Newcastle disease virus (NDV) vaccines were produced from Vero cells by using lively attenuated virus strain. The MOI of 0.1.' serum concentration of 2%. initial pH of 8.0. and infection time of 3 days were found to be optimum conditions for vaccine production. The treatment of polycation enhanced the virus production. When ascorbic acid was added as an antioxidant, NDV production was also enhanced. Utilization of $CaCl_2$ showed an inhibitory effect on the propagation of NDV. It was also found the ammonium ion concentration higher than 4mM inhibited virus production. Thus ammonium ion removal system was tried for the efficient production of NDV vaccine.