A lipid-enriched strain of Botryococcus braunii (UTEX 572) was cultivated in a semi-batch aeration tank to enhance biomass as well as to develop intracellular lipids and fatty acids. A 30 day period of incubation produced 1.39 g/L of biomass and 0.31 g/L of total lipids in the biomass. The grown biomass was pre-treated using several methods to extract the total lipid content efficiently: ultrasonication was found to yield the highest percentage of lipids-namely 19.8% per biomass. Direct heating of biomass in an autoclave also showed better performance than when using only conventional solvent extraction. To enhance the biomass harvest and lipid extraction efficiency, coagulation and flocculation steps were added to the extraction process. It is noteworthy that not only the solvent type but also the solvent/biomass ratio greatly affected efficiency. In addition, the moisture content of the harvested(wet) biomass affected the efficiency significantly. This study elucidated the need for future research on optimizing this extraction process.
The hepatoprotective effect of liposoluble portion of Pyropia yezoensis (PYLP) was investigated against alcohol-induced liver injury in mice. Fatty acids were predominant in PYLP obtained from hexane fraction of 70% EtOH extract after ultrasonication. In particular, polyunsaturated fatty acids such as eicosapentaenoic acid and linoleic acid accounted for 56.91% of the total lipids. PYLP significantly reduced liver damage induced by the alcohol treatment in mice. PYLP treatment increased the activity of antioxidant enzymes including superoxide dismutase, catalase, and glutathion peroxidase by reducing thiobarbituric acid reactive substances. Histological observations showed that PYLP minimizes damage to living tissue induced by alcohol treatment by modulating the expression level of proteins involved in the anti-apoptotic signaling pathway. Our results suggest that PYLP, rich in polyunsaturated fatty acids extracted from the red alga P. yezoensis, will be useful as a potential liver protectant in the hangover industry.
Heedong Woo;Gyeong A Jeong;Hyunwook Choi;Chang Joo Lee
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제33권5호
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pp.656-661
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2023
The aims of this study were to optimize the preparation of low-molecular-weight collagen using a proteolytic enzyme (alcalase) derived from the feet of Korean native chickens, and to characterize the process of collagen hydrolysis. Foreign bodies from chicken feet were removed using ultrasonication at 28 kHz with 1.36 kW for more than 25 min. The hydrolytic pattern and molecular weight distribution of enzyme-treated collagen from chicken feet were analyzed using sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis and high-performance liquid chromatography, respectively. Ideally, chicken feet should be treated at 100℃ for 8 h to obtain a high collagen content using hot water extraction. The collagen content of the chicken foot extract was 13.9 g/100 g, and the proportion of low-molecular-weight collagen increased with increasing proteolytic enzyme concentration and reaction time. When treated with 1% alcalase, the average molecular weight of collagen decreased rapidly to 4,929 Da within 5 h and thereafter decreased at a slower rate, reaching 4,916 Da after 7 h. Size exclusion chromatography revealed that low-molecular-weight collagen peptides of approximately 1,000-5,000 Da were obtained after hydrolysis with 1% alcalase for 1 h.
프로바이오틱스(probiotics)는 숙주에 이로운 작용을 하는 장내세균으로 주로 알려져 있으며 꾸준히 염증치료의 새로운 치료물질로 주목 받고 있다. 그러나 Lactobacillus나 Bifidobacterium과 같은 전형적인 프로바이오틱스는 장내에서 꾸준히 생존하기 어렵고 그로 인해 매개할 수 있는 다양한 효능이 줄어든다. 반면, Enterococcus는 다양한 물질을 분비하고 생물학적 활성을 지니고 있는 프로바이오틱스이긴 하나 동시에 기회감염균으로 항생제 내성능을 쉽게 획득할 수도 있어 사용을 자제할 것을 권고하고 있으며, Vancomycin 내성인자를 원래부터 가지고 있어서 이 인자의 발현과 함께 타 독성균주에 전달할 가능성이 있다. 그러나 본 연구에서는 이러한 Enterococcus의 추출물을 이용하여 항염증 물질을 확인해보고자 하였다. 특히, 호흡기계 질환인 천식의 치료효능을 보기 위해 human monocytic cell line인 THP-1 세포를 이용한 in vitro test와 천식 유발 BALB/c mice를 이용한 in vivo test를 시행하였다. 천식은 사이토카인과 IgE 등 세포 염증성 물질을 분비하고 호산구, 호중구, 호염기구, 비만세포, 단구, T 세포 등 다양한 염증 세포가 폐 부위로 침윤되는 복합적인 염증 질환으로 잘 알려져 있다. 본 연구에서는 우선 Enterococcus faecalis 에서 초음파 처리를 통해 균체성분을 분해한 다음 동결건조하여 추출물을 획득하였다. E. faecalis에서 추출한 추출물(Ef extract)을 PBS에 부유시킨 다음, 염증유발을 위해 ovalbumin (OVA)를 처리한 THP-1 세포에 처리한 결과, OVA에 의해 증가한 THP-1 세포의 생존율이 감소하였다. 또한 OVA에 의해 천식이 유발된 BALB/c mice에서 염증부위인 폐의 세척액을 채취하여 폐 조직 내 세포 변화를 관찰하였다. 그 결과, Ef extract에 의해 호산구와 호중구가 Ef extract 농도에 따라 점차 감소하였고 혈액 내에서도 Ef extract에 의해 호산구, 호중구, 호염기구가 감소하였다. 이는 Ef extract에 의해 염증세포로부터 IL-5의 분비를 억제하고 IgE의 양을 감소시켜 이와 관련된 염증세포의 침윤 및 증가를 억제한 것으로 사료된다. 이를 통해 Ef extract 가 천식 동물모델에서 항염증효과가 있음을 관찰하였지만 Ef extract의 구성 물질 분석 및 작용 메커니즘에 대한 추가연구를 통해 천식 치료물질로의 가능성을 규명할 것이다.
해조류에서 생합성되는 3급 함황화합물인 DMPT를 창자파래로부터 추출하기 위하여 시료의 상태, 용매 의 극성, 초음파 처리, boiling 및 autoclaving 처리에 의한 추출조건을 검토하였다. 용매추출, 초음파 처리후 용매추출, 열수추출 및 가압 열수추출법을 이용하여 창자파래로부터 DMPT를 추출한 결과, 초음파 처리후 가압 열수처리한 경우가 가장 효과적이었고, 다음으로는 초음파 처리후 열수 처리하는 방법이었다. 창자파래로부터 DMPT를 추출 해내는 최적조건으로 분말시료에 물과 acetone (2:1, v/v)의 혼합용매를 15배량 가하여 초음파 처리 후 121$^{\circ}C$에서 60분간 autoclaving하는 방법으로서, 이 때 추출된 DMPT 함량은 시료 g당 311.200ng이었다. 창자파래에서 추출한 DMPT 수용액을 조제하여 온도별로 저장시킬 때 DMPT 분해에 의한 DMS의 발생량은 저장온도에 비례하여 증가되었지만 저온에서는 매우 낮은 분해율을 나타내었다. DMPT 1mg을 저장하였을 때의 잔존율은 6$0^{\circ}C$ 저장의 경우78.5%로 고온에서는 다소 불안정하였으나 $0^{\circ}C$에서는 DMPT의 잔존율이 99.8%로 매우 높게 나타났다. 창자파래에서 추출한 DMPT 수용액을 3$0^{\circ}C$에서 방치하였을 때 pH가 5 이하의 산성영역에서는 DM-PT의 분해가 거의 일어나지 않았으나 pH가 올라감에 따라서 분해가 서서히 일어나기 시작하여 pH 9.5에 이르러서는 DMS의 양이 급속하게 증가하였다.
Background : A new extraction method-heated ultrasonic extraction was qualitatively and quantitatively analyzed for the extraction of major ginsenosides from ginseng extract; this new high-performance liquid chromatography (HPLC) method was compared with the official extraction method of Korean industrial standards and standard for health functional food. Methods and Results : Ginsenoside compounds were analyzed for 35 minutes by the new HPLC analysis method using a Halo$^{(R)}$ RP-Amide column. The new HPLC analysis method was validated by the measurement of intra-day and inter-day precision, accuracy, limit of detection (LOD), and limit of quantification (LOQ) of each ginsenoside. The correlation coefficients (r2) for the calibration curves of the ginsenoside compounds were over 0.9997 in terms of linearity. The heated ultrasonic extraction method using ultrasonication for 30 minutes at $50^{\circ}C$ yielded higher amount of ginsenosides than the extraction method of the Korean industrial standards owing to the enhancement of extraction efficiency. Conclusions : Compared to the other extraction methods, the heated ultrasonic extraction method yielded a higher amount of ginsenoside Rb1 than Rg1 index compounds for the quality evaluation of ginseng roots.
영유아식 중 나이아신의 기기분석법을 개발하고 영 유아식 중의 나이아신의 함량을 조사하였다. 니코틴산 및 니코틴 아미드에 대해 액체 추출 및 고체상 정제과정을 통해 전처리 한 후 HPLC로 분석할 경우 $83{\sim}104%$ 범위의 회수율과 $1.5{\sim}3.5%$ 범위의 재현성을 나타내었다. 또한 260 nm의 파장에서 분석할 경우 $0.02{\sim}10$ mg/L 범위에서 검량선의 직선성이 1.0000 수준으로 매우 높게 나타났으며 영유아식 중의 검출 한계는 0.2 mg/kg 수준으로 나타났다. 총 50건의 영 유아식에 대해 나이아신 함량을 모니터링한 결과 $53.5{\sim}140.3$ mg/kg 수준으로 나타났으며 3회 반복시험 시의 상대표준편차는 $0.6{\sim}5.5%$ 범위로 나타나 본 방법이 나이아신 분석에 유용한 방법임을 확인하였다.
본 연구는 양파껍질로부터 건강기능성식품 기능성원료로서의 양파껍질추출물의 표준화공정을 설정하고자 하였으며, 제조과정 중 지표물질의 추출효율 증대 및 잔류농약 안정성 확보를 위해 여러 세척공정을 통한 quercetin 함량 및 잔류농약 잔존율을 분석하였다. 양파껍질(A)을 1차 1종세척제(이하 세척제) 수세후 건조한 처리구(B), 2차 세척제 처리구(C), 초음파+세척제 처리구(D), 과산화수소+세척제 처리구(E) 및 데치기+세척제 처리구(F)로 처리한 다음 주정추출후 농축 및 진공동결건조하여 양파껍질추출분말을 제조하였다. 양파껍질추출물의 수율 및 지표물질인 quercetin의 수율을 고려하면 과산화수소처리+세척제 처리구(E)가 B처리구에 비해 각각 89.04% 및 96.84%로 추출효율이 가장 높게 나타났다. 모든 시료에서 총 177종의 농약성분 중 cyhalothirn, fluquinconazole 및 procymidone, 3종만이 검출되었는데, cyhalothirn (생양파 허용기준; 0.5 mg/kg), fluquinconazole (0.2 mg/kg)은 각각 0.37-0.68 mg/kg 및 0.35-3.28 mg/kg으로 농축도(27-60배)를 고려하면 허용기준에 안정하였으나 procymidone은 함량이 128.01~133.67 mg/kg으로 높았다. 따라서 양파껍질추출물의 표준화공정을 위해서는 추가적인 물리적 전처리 공정이 필요한 것으로 사료되었다.
추출조건(抽出條件)에 의(依)한 알로에 베라의 barbaloin 함량(含量)을 측정(測定) 비교(比較)하였다. 용매별(溶媒別) barbaloin 함량(含量)은 메탄올>에탄올>물의 순으로 증가(增加)하였다. 정치(定置) 추출(抽出)은 메탄올과 에탄올 추출의 경우 $60^{\circ}C$에서 4시간까지 가장 많은 함량(含量)이 추출(抽出)되었고, 그 이상은 감소(減少)하였다. 물추출의 경우 추출시간(抽出時間)과 온도(溫度)에 따라서 barbaloin 함량(含量)이 각각 다르게 나타났다. 물추출의 경우 온도(溫度)와 추출시간(抽出時間)이 증가(增加)할수록 추출량(抽出量)이 감소(減少)하는 것은 일반적으로 유기용매(有機溶媒)에서는 화합물(化合物)이 안정(安定)하지만, 물에서는 가수분해(加水分解) 등으로 분해(分解)된 것으로 판단(判斷)된다. 초음파(超音波) 추출(抽出)의 경우 메탄올에서 $60^{\circ}C$/40분이 가장 함량(含量)이 많았다. 진탕 추출(抽出)시 추출함량(抽出含量)은 물추출은 $40^{\circ}C$/8시간, 메탄올은 $60^{\circ}C$/4시간, 에탄올은 $60^{\circ}C$/2시간이 최대(最大) 함량(含量)을 나타냈고, 그 이상은 약간씩 감소(減少)하였으며, 특히 물추출은 $20^{\circ}C$ 및 $40^{\circ}C$에 비하여 $60^{\circ}C$에서 급격(急激)히 감소(減少)하였다. 환류추출(還流抽出)은 온도증가(溫度增加)에 따라 성분(成分) 함량(含量)도 증가(增加)하였다. 제반(諸般) 추출조건(抽出條件)을 비교한 결과(結果) 동시다수(同時多數)의 시료(試料)를 간편(簡便)하게 분석(分析)하기 위하여 메탄올 $60^{\circ}C$/40분간 초음파(超音波) 추출(抽出)하는 것이 양호(良好)하였고, 혼합용매(混合溶媒)의 경우 메탄올 : 에탄올(1 : 1) 혼합용액(混合溶液)을 사용하는 것이 능률적(能率的)이었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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