Journal of the Society of Cosmetic Scientists of Korea
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v.30
no.1
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pp.123-128
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2004
Numerous novel ingredients have been introduced for the higher functionality of whitening cosmetics. Through the preliminary research, we have found Trichosanthes kirilowii root, Prunella vulgaris leaf and Clematis chinensis root have high whitening efficacy. But they are insoluble. Moreover the discoloration of and decrease in content take place when they are exposed to light, heat or oxygen. From Trichosanthes kirilowii root, Prunella vulgaris leaf and Clematis chinensis root, efficacious ingredients were ethanol-extracted by heating to 75∼85$^{\circ}C$ for 6∼8 h. These extracts have the inhibitory activity of tyrosinase and B16 melanin formation, thus enhancing whitening effect. We made liposomes using propylene glycol (PG)/hydrogenated lecithin/middle chain triglycerides (MCT)/glycerin/water and microfuidizer to stabilize extracts. The stability against heat and light was enhanced by 3∼5 times compared with untreated extracts. Particle size analyzer, freeze fracture transmission electron microscopy (FF-TEM), chromameter and HPLC are used for the analysis.
Transformed hairy roots were induced from in vitro grown plantlets of Trichosanthes kirilowii by infection with Agrobacterium rhizogenes strain ATCC15834. Transformed hairy roots exhibited active growth with high branching of roots on plant growth regulators-free medium. Cloned line (TR-03) of hairy root was tested for its growth and extracellular protein accumulation in medium under various culture conditions. Among the culture media tested, a full-strength MS medium had a pronounced effect on root biomass and extracelluar protein accumulation in medium. The maximum root biomass (2.4 g DRW/flask) and extracellular total protein contents $(28.3ug/m\ell)$ in medium was obtained at inoculum size of 2 g (FRW) and in MS medium supplemented with 4% sucrose. In addition, the optimal shaking speed for root growth and extracellular protein accumulation in medium were 100 rpm. The total extracellualr protein concentration reached a maximum of $28.3ug/m\ell$ at 4 weeks and decreased thereafter. Protein translation inhibitory activity was observed in culture broths and reached levels of 21.3 unit. These studies demonstrate that the transformed hairy roots can be utilized for the in vitro production of ribosome-inactivating proteins.
This study was conducted to investigate the antitoxic components in the water extract of the roots of Trichosanthes kirilowii (Cucurbitaceae). The results were as follows: Generally, detoxication effects by the water extract of T. kirilowii increased in proportion to the concentrations. Experimental animals were treated with cadmium and T. kirilowii water extract by oral administration. When 40 mg/kg dosage of T. kirilowii extract was administrated it showed the highest antitoxic effects in metallothionein induction. After the water extract treatment, body weights did not increase in proportion to the extract concentrations. These results suggest that T. kirilowii extract increased metallothionein concentration and decreased the toxicity of cadmium in rats. In vitro the antitoxic activity of water extract of T. kirilowii on NIH 3T3 fibroblasts was evaluated by the MTT (3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide) and SRB (sulforhodamine B protein) assays. The light microscopic study was carried out to observe morphological changes of the treated cells. These results were obtained as follows; The concentration of $10^{-2}\;mg/ml$ of T. kirilowii extract was shown significant antitoxic activity. The number of NIH 3T3 fibroblasts were increased and tend to regenerate. These results suggest that T. kirilowii extract retains a potential antitoxic activity.
The activity fractionation upon the MeOH extract of the root of trichosanthes kirilowii led to the isolation of eight cucurbitane tritepense namely cucurbitacin .betha. (I), isocucurbitacin .betha.(II), cucurbitacin D(III), isocucurbitacin D(IV), 3-epi-isocucurbitacin .betha(V), dihydrocucurbitain .betha. (VI), dihydroisocucurgbitachin .betha. (VII) and dihydrocucurbitacin E (VIII), as active principles. All isolates were shown to exhibit significant cytotoxicity against cultured human tumor cells, including A-549, Sk-OV-3, Sk-MEL-2, XF-498 and HCT 15, with an exceptionally high potency.
Although each part of Trichosanthes kirilowii is frequently used as medicinal herbs, study on the chemical composition is not sufficient. It was found that sarcocarp consists of 70% of carbohydrate, 13% of crude protein, 5% of crude fat, 6% of crude fiber and 6% of crude ash; seed consists of 62.59% of carbohydrate, 12.75% of crude protein, 14.80% of crude fat, 6.50% of crude fiber and 3.36% of crude ash; and root consists of 89.40% of carbohydrate, 4.10% of crude protein, 0.50% of crude fat, 3.50% of crude fiber and 2.50% of crude ash. Sarcocarp and seed contain fifteen kinds of amino acids such as Asp, Ser, Glu, Gly, His, Arg, Thr, Ala, Pro, Try, Cys, Met, Val, Leu, and Phe. Sarcocarp contain large quantities of phenylalanine and glycine and seed does not contain leucine but lysine. The mineral contents in Trichoxanthes kirilowii are 0.55% Ca, 0.91% Mg, 10.29% Na, and 0.17% K.
The ami of our study was on the anti-obesity effect of ethanol extract from Trichosanthes kirilowii Maxim root (TKM) in murine adipocytes, 3T3-L1 cells. This study focused on anti-adipogenic activity through inhibition of cell differentiation in 3T3-L1 cells treated TKM. 100 ug/ml of non-cytotoxic TEM remarkablely inhibited content of triglycerol and suppressed expressions of $C/EBP{\alpha}$, $PPAR{\gamma}a$ and SREBP-1c related with lipogenic transcription factors in theres 3T3-L1 cells compared to (-)control cells. As phosphorylations of AMPK and ACC were incerased, HSL and CPT-1 mRNA expression increased upon TKM treatment, which involved in inhibition of fatty acid synthase expression. In conclusion, these results indicate that TKM can inhibit mRNA and protein expression of lipogenic genes in 3T3-L1 adipocytes. Our study suggests that TKM has potential anti-obesity effects and is a convergence therapeutic functional agent with anti-adipogenic activity via hypolipogenesis.
In this study, antioxidant and anti-inflammatory activities of the extract of different organs such as seed, fruit and root from Trichosanthes kirilowii Maxim. (TKM) were investigated in vitro. Among organs of TKM, the methanol extract of seed showed weak 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) radical scavenging activities with $10.4{\pm}0.1%$ and $25.5{\pm}1.1%$ at $50{\mu}g/mL$ and $100{\mu}g/mL$, respectively, and strong 2,2-azino-bis-(3-ethylbenzothiazoline-6-sulphonicacid) (ABTS) radical scavenging activities with $72.4{\pm}6.3%$ and $96.4{\pm}2.3%$ at $50{\mu}g/mL$ and $100{\mu}g/mL$, respectively. Anti-inflammatory effects of the extracts were investigated by measuring nitric oxide (NO) production, mRNA expression of inducible nitric oxide synthase (iNOS) and cyclooxygenase-2 (COX-2) in LPS-induced Raw 264.7 macrophage cells. The methanol extracts of seed and fruit at $50{\mu}g/mL$ potently suppressed LPS-stimulated production of NO and reduced the expression of iNOS mRNA. The methanol extracts of seed and fruit also reduced the expression of COX-2 mRNA remarkably. Therefore, seed and fruit of TKM may be utilized for a wide range of health benefits associated with antioxidant and anti-inflammatory activities.
Physicochemical properties of Trichosanthes kirilowii Max. root and starch were investigated. Trichosanthes kirilowii root is made up of 69% of moisture, 2.7% of protein, 0.3% of crude fat, 2.0% ash and 3.4% of crude fiber. Starch granules were in the range of 4.1-22.0 microns in size, the average being 11.0 microns. The starch had raising power of 87.5, amylose content of 26.7% alkali number of 34.3 and blue value of 0.42. The initial and final gelatinization temperature were $60^{\circ}C$ and $67-68^{\circ}C$ respectively.
A new lectin, named TRA, was purified from Trichosanthes kirilowii root by acid-treated Sepharose 6B, Mono-Q, and TSK-gel 3000SW column sequential chromatography. The lectin appeared homogeneous by native gel electrophoresis at pH 4.3 and gave two protein bands of Mr=31 and 28 kDa by SDS-PAGE. The N-terminal amino acid sequences of the polypeptides of TRA have not been reported in amino acid sequences of the lectins. TRA lectin formed a precipitate with asialofetuin, neuraminidase-treated fetuin. A sugar inhibition assay indicated that N-acetyl-D-galactosamine, among the monosaccharides tested, was the most potent inhibitor of TRA-induced hemagglutination. Asialofetuin showed a 260-times stronger inhibitory activity than N-acetyl-D-galactosamine. TRA lectin also showed agglutination with normal leukocytes and lymphoma cells, but not with premature hemopoietic cells. These results suggest that TRA is a novel plant lectin.
Recently, there is a growing interest about unsaturated lecithin having excellent characteristics of skin affinity and absorbency. Accordingly, this study intended to develop a natural sulfuration material in order to enhance the stability of oxidation of unsaturated lecithin and substitute existing sulfuration materials which indicate variability and toxicity. As sulfuration components, plenol acid family, 3,5-dihydroxybenzoic acid, and flavanone were analyzed. Total polyphenol content was higher in the root extracts (133.85 mg/g) than in the fruit extracts (53.5 mg/g). Above 100 ppm polyphenol content, the free radical removal efficiency and lipid oxidation prevention of the root extracts were 20.1 and 19.2% superior compared with BHT respectively. Also, the extracts indicated high survival rate of more than 95% below 1250 ppm, showing the stability. For the stability of liposome made from an unsaturated lecithin, the root extracts were superior to the fruit extracts. Especially, 15.1 and 13.9% of sulfuration effect and zeta potential were improved with 9.3% reduced particle size compared with BHT as the control group, respectively.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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