면역 작용에 중요한 역할을 하는 림프구의 일종인 T세포가 성장 및 증식하는 기관인 흉선의 흉선세포증식과 생존력에 미치는 인삼 saponin의 영향과, 흉선 세포의 증식에 관여하는 Interleukin2(IL2)에 미치는 인삼saponin의 영향과,IL2의 생성에 영향을 미치는 Adenosin Deaminase(ADA)에 대한 인삼 saponin의 영향 등을 알아보기 위하여 생쥐의 흉선세포를 사용하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 여러 농도의 인삼 saponin에서 배양한 전체 흉선세포수와 살아있는 흉선세포수의 변화는 $10^{-5}$%농도에서 대조군보다 증가하였으나 $10^{-1}$%농도군에서는 감소되었다. 여러 농도의 IL2에 인삼 saponin$10^{-5}$%농도를 첨가하여 배양한 전체 흉선세포수는 1.5%,3%및 6%농도군에서 9시간 또는 12시간배양시 증가하였으며,6% 실험군은 24시간과 48시간 배양시에도 유의성있게 증가하였다. 그러나 살아있는 흉선세포수는 대조군과 별차이가 없었다. 마지막으로 흉선세포의 ADA활성도에 미치는 인삼 saponin의 영향은 $10^{-5}$%농도에서 25%의 유의성있는 활성 증가가 일어났다.
Rhizopus japonicus의 한 균주가 생산하는 효소에 의해 인삼 사포닌의 ginsenoside 중 조성비율이 가장 큰 ginsenoside $Rb_1$을 약리 효능면에서 보다 우수한 ginseuoside $Rb_1$로 선택적으로 전환할 수 있음을 TLC 및 HPLC로 정량적으로 확인하였다. Total saponin을 기질로 사용하였을 경우 ginsenoside $Rb_1$은 그 함량의 82.5%까지 ginsenoside Rd로 전환되어 ginsenoside Rd의 함량을 원래 함량에 비해 4.75배까지 증가시킬 수 있었으며, ginsenoside-Rb group saponin 기질의 경우는 80.8%의 ginsenoside $Rb_1$이 ginsenoside Rd로 전환되어 ginsenoside Rd의 함량을 34.7배까지 처리효소의 농도에 비례해서 증가시킬 수 있었다. 한편 다른 ginsenoside 함량변화 없이 오직 ginsenoside $Rb_1$에서 ginsenoside Rd만으로 선택적 전환을 한다는 사실이 당이나 sapogenin의 검출로도 증명되었다.
We have examined the functional role of central dopaminergic processes on the behavioral pharmacological effects induced by psychotropics and red ginseng saponins of normal rats and compared with that of brain damaged rats. Desipramine and clomipramine produced, a significant depression of the locomotor activity in normal rats, but in brain damaged rats, they did not have any effect throughout the experimental period of 4 hours. Total saponin (50~200 mg/kg), PT (25~50 mg/kg), PD (25~50 mg/kg), $Rg_1$(12.5~25 mg/kg), $Rb_1$ (12.5~50 mg/kg) did not change, and high concentrations of PT (100 mg/kg), PD (100 mg/kg) and $Rg_1$ (50 mg/kg) showed a significant decrease in the locomotor activity of one hour after administration but total saponin (100 mg/kg), PD (25~50 mg/kg), Rgl (12.5 mg/kg), $Rb_1$ (12.5 mg/kg) markedly increased the locomotor activity of four hour after administration in normal rats. On the other hand, total saponin (50 mg/kg), PT (100 mg/kg) and PD (100 mg/kg) Produced a prominent stimulation of the locomotor activity in brain damaged rats. These results suggest that the inhibition of the locomotor activity induced by antidepressants was not affected by the sensitivity of cerebral DA system, whereas red ginseng saponin showed antifatigue effect and also the stimulation of the locomotor activity induced by red ginseng saponin was mediated by the inhibition of cerebral DA system. These psychotropic action of red ginseng saponins could be responsible for the beneficial effects on conditions of fatigue and decreased alertness.
This stuffy was carried to establish a new efficient method for the preparation of edible crude ginseng saponin. The conventional butanol extraction and resin adsorption methods were compared for the contents of total crude ginseng saponin and major ginsenosides. Seventy- percent methanol extract was applied to Diaion HP-20 column and the resin was washed with Hn and eluted with absolute methanol. The methanol elute was dried in vivo and analyzed for its ginsenosides. Use of ethanol instead of methanol to make edible crude ginseng saponin gave a similar result. Butanol extraction was performed by the conventional method. The final aqueous layer from butanol extraction was passed through Diaion HP-20 column followed by elution with methanol and Diaion HP-20 passed fraction was extracted with butanol to recover remaining components, respectively, in order to determine saponin loss. TLC and HPLC qualitatively and quantitatively monitored Ginsenosides, respectively. Loss of ginsenosides was higher in butanol extraction method than in Diction HP-20 adsorption method. In addition, saponin fractions prepared by Diction HP-20 adsorption method showed higher content of each ginsenoside, showing 8.2% higher purity than that of butanol extracted fraction. From these results, we propose the resin adsorption method as a new efficient measure for the preparation of crude ginseng saponin, which is edible by using spirit instead of methanol.
인삼으로부터 사포닌 화합물의 신속한 추출방법을 모색하기 위하여 waring blonder 와 유기용매를 이용한 새로운 추출방법을 개발하였다. 본 방법은 기존의 인삼 증류추출방법과 비교해볼 때 6개의 주종 사포닌($ginsenoside-Rb_2$, $ginsenoside-Rb_1$, ginsenoside-Rc, ginsenoside-Rd, ginsenoside-Re, $ginsenoside-Rg_1$) 함량이 유사하여 유의성이 있는 것으로 생각된다. 유기용매는 메탄올과 클로로포름을 7:3의 비율로 사용하였을 때 사포닌 화합물이 잘 추출되었다. 5개의 주종사포닌을 합한 전체 사포닌 함량은 본 방법에서는 2.41% 이었고 기존의 방법 에서는 2.54%이었다. 그러나 조사포닌의 함량은 본 방법이 기존의 방법보다 높은 것으로 나타났다.
Kim, Hack-Seang;Zhang, Yong-He;Fang, Lian-Hua;Lee, Myung-Koo
Archives of Pharmacal Research
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제21권6호
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pp.782-784
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1998
Ginseng total saponin (GTS) can modulate dopaminergic activity at both presynaptic and postsynaptic dopamine receptors (Kim et al, 1998). The present study investigated t he effect of GTS on the bovine adrenal tyrosine hydroxylase (TH), which catalyze L/tyrosine to DOP. GTS inhibited the bovine adrenal TH by 42.4, 51.5 and 55.3% at concentrations of 40, 80 and 100${\mu}g$/ml, respectively. The IC50 value of GTS was 77.5${\mu}g$/ml. GTS exhibited noncompetitive inhibition with a substrate L-tyrosine. The Ki value was 155${\mu}g$/ml.
Considering the stimulatory effects of ginsenosides from Panax ginseng C. A. Meyer on the release of nitric oxide from bovine aortic endothelial cells in vitro and vasodilatation of rabbit pulmonary artery in vivo, the present study is designed to investigate the mechanism of nitric oxide release by ginsenosides in calf pulmonary artery endothelial cells, Nitric oxide release was determined in endothelial cells treated with ginsenosides and compared with those of the receptor-dependent agonists, bradykinin and ADP and the receptor-independent calcium ionophore $A_{23187}$. The results showed that total saponin and ginsenoside $Rg_1$, not $Rb_1$, stimulated nitric oxide release measured as conversion to L-citrulline. The nitric oxide releasing properties of total saponin and ginsenoside $Rg_1$ were different; total saponin stimulated only conversion to L-citrulline, like $A_{23187}$, while ginsenoside $Rg_1$ stimulated both L-arginine transport and conversion to L-citrulline, as bradykinin or ADP did.
The present experiment was perf'3rmed to investigate the protective effects of ginseng total saponin (GTS) and possible mechanisms on the hepatocytotoxicity induced by tert-butylhydroperoxide (t-BuOOH), 4-Bromo-calciumu ionophore A23187 (Br-A23187) and KCN. Hepatocytes were isolated by collagenase perfusion of livers from fasted male Sprague Dawley rats and cultured overnight. After various treatments in Krebs-Ringer-HEPES buffer at pH 7.4, cell viability was determined by propidium iodide using fluorocytometry. GTS (5-20 ${\mu}$M) inhibited cell killing induced by t-BuOOH, and KCN, dose-dependently. However, GTS did not inhibit Br-A23187-induced cell killing. These findings support that GTS could protect the hepatocytoxicity induced by some toxic chemicals. The mechanisms of these protective effects by GTS seem to be associated with antioxidant activity and increase of cellular ATP.
In order to investigate the immunomodulatory mechanism of white ginseng, the effects of total saponin of Ginsenoside Rb$_2$component on the phagocytosis and reactive oxygen intermediate(ROI) production of mouse peritoneal macrophages were studied. Both phagocytosis assay nitrobluetetrazolium reduction test showed 20$\mu\textrm{g}$/ml concentration of total saponin significantly increased the activity of phagocytosis and production of ROI. Also cytokine gene expression of the macrophages was analyzed using reverse transcription polymerase chain reaction. In the RT-PCR assay, 20$\mu\textrm{g}$/ml concentration of either total saponin or Ginsenoside Rb$_2$increased IL-1 and TNF expression of the macrophages.
To investigate untoward effects which might be produced by local application of Ginseng saponin, sensitization test and eye irritation test were performed in guinea pigs and rabbits. Any reaction on the skin was not found at a dose of 0.1ml of 0.1% solution in sensitization test. Instillation of Ginseng saponin (0.1ml of 1.0% and 10% soultion) into the right eye of rabbits, did not produce any irritation. Median lethal dose of the total saponin in mouse was 695 mg/kg by i.p. and 1490mg/kg by s.c. injection.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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