• KSBB Journal
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• 제15권4호
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• pp.398-401
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• 2000

Taxus chinensis 식물세포 배양에 의한 paclitaxel대량 생산의 경우 biomass내 paclitaxel이외에 다른 많은 유도체들이 확 인 되었다. 이를 목표 물질로 선정하여 Prep-LC를 이용하여 분리/정제하고 NMR, MS 등으로 화학구조분석을 하여 이들 물질들에 대한 동정을 하였다. 또한 Taxus chinensis 식물세포 배양에 의한 paclitaxel 대량 생산의 경우 paclitaxel 생산량에 따른 여러가지 유도체들의 생산 경향을 조사하였으며, paclitaxel의 생산량이 증가할 수록 유도체들의 생산량은 상대 적으로 감소함을 알 수 있었다. 이러한 연구는 결국 paclitaxel 이외의 새로운 유용성분 및 전구체 확인, 분리/정제 방법의 개발, paclitaxel 생산에서의 품질관리에 유용하게 사용되어 질 수 있다.

• KSBB Journal
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• 제15권6호
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• pp.560-565
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• 2000

13-Deacetyl-taxchinin I, a taxoid having a rearranged 11(15\longrightarrow1)-abeo-taxane skeleton, has been isolated and identified from plant cell cultures of Taxus chinensis. The compound has not previously been encountered in nature. Its structure was elucidated by 1-and 2D NMR techniques including H-H COSY, HMQC, and HMBC experiments. This taxoid also provides information for better understanding of structure-activity relationships and biosynthesis, as well as improving the quality control of paclitaxel production.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제11권3호
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• pp.458-462
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• 2001

The localization of paclitaxel was investigated in suspension culture cells of Taxus chinensis. Over 93% of the cell-associated paclitaxel were detected throughout the entire culture period. Intracellular localization of paclitaxel over the culture time was analyzed further by cell fractionation for days 21 and 42. Paclitaxel contents in intracellular organelles were decreased at day 42, while the content in the cell wall fraction was increased at day 42 compared to the value for day 21. The localization of paclitaxel in the cell wall was confirmed by using the immunocytochemical method with the aid of a confocal laser scanning microscope.

• KSBB Journal
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• 제15권5호
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• pp.525-528
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• 2000

Taxus chinensis 세포배양 중의 FCW/DCW ratio, 세포내, 외 단백질 생산 및 peroxidase 활성의 변화를 배양시기별로 조사하였다. 조사 결과, 배지내 잔류당이 고갈되기 직전인 배양 14일째에 FCW/DCW ratio 는 12로 가장 낮은 수치를 나타내었고 DCW를 기준으로 한 세포 외에서의 protein 생산도 14일째 가장 낮은 수치인 4.3 mgfg DCW 였다. 배양시기별 P POD 활성도는 단백질 생산 pattern과 유사하였다. 이 결과들 은 flask에서 활발하게 증식 중인 세포들을 이용하여 측정한 것으로 대량배양시, 공정제어를 위한 자료 및 세포가 받는 stress 정도를 나타내는 지표로 활용할 수 있다

• Korean Chemical Engineering Research
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• 제60권4호
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• pp.544-549
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• 2022

본 연구에서는 음압 캐비테이션 아세톤-펜테인 분별침전으로 Taxus chinensis로부터 파클리탁셀의 침전 효율을 획기적으로 개선하였다. 음압 -200 mmHg에서 침전할 경우 짧은 조업 시간(5분)에 대부분의 파클리탁셀을 회수(>99.9%) 할 수 있었다. 침전 속도 상수는 대조군 대비 1.512~5.073배(-50~-200 mmHg) 증가하였다. 음압으로 활성화에너지는 -3737~-6536 J/mol 감소하였으며, 이로 인해 침전 속도가 증가하였다. 또한 음압 도입으로 침전물 크기는 5.3배 감소하였으며, 파클리탁셀의 확산 계수는 7.0배 증가하였다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제41권3호
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• pp.272-277
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• 2013

본 연구에서는 gas chromatography/mass spectrometry (GC/MS)와 gas chromatography (GC)를 이용하여 주목 식물세포 Taxus chinensis 유래 타르 성분을 최초로 동정/정량하였다. 또한 식물세포배양으로부터 항암물질 paclitaxel 정제를 위한 전처리 과정에서 이들 타르 성분들의 제거 양상을 확인하였다. GC/MS 분석을 통하여 체류시간을 비교한 결과, 5종류의 타르성분이 체류시간 6.374, 8.208, 15.209, 20.045, 24.474분에서 각각 2-picoline, o-xylene, 2,5-xylenol, 1-methylnaphthalene, acenaphthene이 동정되었다. 또한 표준물질을 이용한 spike testing을 수행한 결과 동일 물질임을 재확인 하였다. GC 분석을 통하여 동정된 5종류 타르성분을 정량한 결과, 메탄올 추출물에 총 0.6805 wt% (2-picoline: 0.2512 wt%, 2,5-xylenol: 0.1586 wt%, acenaphthene: 0.1240 wt%, 1-methylnaphthalene: 0.0942 wt%, o-xylene: 0.0525 wt%) 타르 성분이 존재하였다. 액-액 추출을 수행한 결과, 메탄올 추출물 시료 내 총 타르 성분의 양 대비 42%의 타르 성분이 제거됨을 확인할 수 있었다. 1-Methylnaphthalene, acenaphthene, 2,5-xylenol, 2-picoline의 경우에는 각각 75.90, 59.92, 35.94, 29.74%로 높은 제거율을 보인 반면 oxylene의 경우에는 10.86%의 제거율로 상대적으로 적게 제거됨을 알 수 있었다. 흡착제 처리 후 2-picoline과 o-xylene의 양도 상당히 줄었지만 이들 2 종류의 타르 성분을 제외한 나머지 세 종류의 타르 성분(2,5-xylenol, 1-methylnaphthalene, acenaphthene)은 완전히 제거됨을 확인할 수 있었다. 흡착제 처리 공정에서 제거되지 않은 두 종류의 타르 성분(2-picoline, o-xylene)은 헥산 침전 공정에 의해 완전히 제거 가능하였다.

• Korean Chemical Engineering Research
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• 제59권1호
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• pp.106-111
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• 2021

본 연구에서는 식물세포 Taxus chinensis로부터 항암물질 파클리탁셀을 효율적으로 정제하기 위하여, 초음파 기반 마이셀 추출 공정을 개발하였다. 전통적 마이셀 공정(대조군)에서의 많은 추출 단계 및 긴 상 분리 시간 문제를 획기적으로 개선하였다. 초음파 파워 180 W, 초음파 조사 1.5 시간에서 가장 높은 파클리탁셀 수율(~96%, 2회 추출)을 얻었으며, 이는 대조군의 수율에 비해 24.7% 증가하였다. 또한 분배 계수(K)는 초음파 파워 180 W, 초음파 조사 1.5 시간에서 최대치(24.0)를 보였다. 파클리탁셀 순도에는 큰 차이가 없었으며, 초기 파클리탁셀의 순도(6.81%)가 정제 후 22%까지 증가하였다. 역 추출(back extraction)의 상 분리 시간은 대조군 대비 각각 40.7-56.2%(초음파 파워 80 W), 46.3-67.6%( 초음파 파워 180 W), 51.9-67.6%(초음파 파워 250 W) 감소하였다. 초음파 파워(80-250 W)와 초음파 조사 시간(0.5-2.5 시간)이 증가할수록 상 분리 시간이 감소하였다.

• Journal of Applied Biological Chemistry
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• 제43권3호
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• pp.176-179
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• 2000

Nonpolar taxoides extracted from a large-scale cell culture of Taxus chinensis were isolated through the normal and reverse phase column chromatographies, and their compounds were identified via NMR spectroscopy. The complete separation method was systematically established and described. In dichloromethane, dissolved paclitaxel and other taxoids with hexane were precipitated during the purification of paclitaxel from the plant cell culture of T. chinensis through a large-scale process while the relatively nonpolar taxane derivatives remained dissolved in the hexane phase. 13-Deoxy baccatin III (I), baccatin VI (II), taxchinin I (III), $2{\alpha}$, $5{\alpha}$, $10{\beta}$, $14{\beta}$-tetraacetoxy-4(20), 11-taxadiene(IV), 1-deoxy baccatinVI(V), and taxayuntin C (VI) were isolated through column chromatography and identified via NMR spectroscopy. Compounds I and IV were found to the major components, aside from paclitaxel, in the plant cell culture of T. chinensis. The concentrations of I and IV were compared with the that concentration of the paclitaxel in each of plant cell culture. The possible applications of compounds I, II, IV, and V were discussed.

• 공업화학
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• 제31권2호
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• pp.208-214
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• 2020

본 연구에서는 식물세포 Taxus chinensis로부터 수분 제거를 통한 바이오매스 보관 및 추출 효율 향상을 위하여, 마이크로웨이브를 이용한 건조의 특성 및 메커니즘을 조사하였다. 마이크로웨이브 파워가 100, 200, 300 W로 증가함에 따라 수분의 제거 효율은 증가하였다. 실험 데이터를 대표적 동역학적 건조 모델에 적용할 때, Page 모델과 modified Page 모델이 가장 적합한 것으로 결정되었다. 열역학적 파라미터는 마이크로웨이브를 이용한 건조의 자발적 및 흡열특성을 나타내었으며, 건조 과정에서 무질서도는 증가함을 알 수 있었다. 마이크로웨이브 파워(100~300 W)가 증가함에 따라 수분의 유효확산계수(3.445 × 10^-9~7.163 × 10^-7 ㎡/s) 및 대류물질전달계수(3.1529 × 10^-5~1.2895 × 10^-2 m/s)가 증가하였다. 작은 비오트 수(0.3890~0.7198)를 고려할 때, Taxus chinensis의 건조 진행은 외부 확산에 의해 조절됨을 알 수 있었다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제11권2호
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• pp.204-210
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• 2001

Paclitaxel can be produced in high yield and with a high degree of purify from plant cell cultures of Taxus chinensis. The complete purification method was systematically established and described. This method was an efficient procedure for the purification of paclitaxel from crude paclitaxel, consisting or reverse-phase chromatography, followed by a normal-phase chromatography. The two-stage HPLC purification scheme serves as an effective and economical approach for resolving paclitaxel from complex mixtures of taxoids, with high purify (>99%) and low impurities (<0.1%). The process is readily scalable to a pilot plant and eventually to a production environment where multikilogram quantities of material are expected to be produced. The process has been optimized to minimize solvent usage, complexity, and operating costs.