This experiment was carried out to detect the residues of sulfonamides in raw milk. Raw milks which does not contain sulfonamides was collected from one of the farm and fortified with 5 sulfonamides (sulfamerazine, sulfamethazine, sulfamonomethoxine, sulfadimethoxine, sulfaqinoxaline). The sulfonamides in the fortified sample were extracted and detected by High Performance Liquid Chromatography. UV /vis detector was used in this experiment. The results obtained were summarized as follows : 1. Chloroform was good as a extracting solution. 2. 15.5% methanol in PDP as a mobile phase solution was best detective condition for SMR, SMT, SMM. But for SDM and SQN the best condition was 23% methanol. 3. The detectable limits of SMR, SMT, SMM were 2ppb. but SDM and SQN were 20ppb because of delayed retention time and relatively low recovery rate. 4. The peaks of SMR, SMT, SMM and SDM were erected at baseline and the apexes were sharp but SQN was round shape.
This study was conducted to develop more convenient simultaneous determination method by matrix solid phase dispersion (MSPD) and HPLC for sulfonamides such as sulfamerazine (SMR), sulfamethazine (SMT), sulfamonomethoxine (SMM), sulfadimethoxine (SDM), sulfaquinoxaline (SQX), and tetracyclines including oxytetracycline (OTC), tetracycline (TC) chlortetracycline (CTC) in prok and flatfish. The limits of detection were 0.047 $mg{\cdot}kg^{-1}$ for OTC, TC, SMR, SMT and SMM, and 0.033 $mg{\cdot}kg^{-1}$ for CTC, SDM, and SQX, respectively. So it is sufficiently possible to detect the eight tetracyclines and sulfonamides under their MRLs ($0.1{\sim}0.2mg{\cdot}kg^{-1}$). The average percentage recoveries of sulfonamides and tetracyclines from pig muscle and flatfish spiked standard solution were approximately $80.25{\sim}101.25%$ and $85.77{\sim}121.42%$, respectively. Therefore this method was efficient for simultaneous analysis of eight tetracyclines and sulfonamides.
These experiments were carried out to develop a novel, simple, and rapid method to determine urinary sulfonamides using fluorescamine by spectrofluorometry. To get optimal conditions for the sulfonamide-fluorescamine reaction, sulfonamides such as sulfamethazine, sulfamerazine, sulfadimethoxine and sulfamonomethoxine, dissolved in buffers with various pH ranges were reacted with various concentrations of fluorescamine. and then, the fluorescence intensity and stability of the fluorophore were measured. To eliminate the interfering substances in urine, the fluorophore in buffers and urine with a definite pH range was extracted with some organic solvents. After then the fluorescence intensity was measured in organic and aquous phases. The results obtained were summarized as follows: 1. The maximal fluorescence of sulfonamides was presented in acidic state, pH 4.5~5.0, at 30 minutes after reaction. 2. The optimal concentration ratio of sulfamethazine and ffuorescamine was more than 1 : 40 in mole. 3. In pH 4.0, the intensity was maximal but was time-dependent, whereas in pH 8.0, the intensity was time-independent. 4. Sulfamethazine-fluorescamine conjugate could be dissolved in some of organic solvents in acidic state such as chloroform, n-butanol, and ethylacetate. 5. Sulfamethazine-flnorescamine conjugate in swine urine coule be extracted with ethylacetate in acidic state, pH 4.0~5.0.
A simple, rapid and simultaneous analytical method is described for the detection of Sulfonamide and Tetracycline residues, i.e., Sulfamerazine (SMR), Sulfamethazine (SMT), Sulfamonomethoxine (SMM), Sulfadimethoxine (SDM), Sulfaquinoxaline (SQN), Oxytetracycline (OXY), Tetracycline (TC), Chlortetracycline (CTC). Blank control and sulfonamide and tetracycline fortified fish muscle samples (0.5 f) were blended with octadecylsilyl (C18, 40 ${\mu}{\textrm}{m}$, 21% load, 60$\AA$) derivatized silica packing material (2 g). Blended fish samples were washed with hexane, then, benzene and dichloromethace were used for the elution of tetracycline and sulfonamide were analyzed by HPLC. Correlation coefficients of standard curves for individual sulfonamide and tetracycline isolated from fortified samples were linear (0.9993$\pm$0.0003~0.9997$\pm$0.0003, 0.9493$\pm$0.078~0.9753$\pm$0.036), respectively. The average percentage recoveries of sulfonamide and tetracycline ranged as 80.86~96.52% to 85.88~92.23%, and 30.01~37.12% to 65.89~73.40%, for the concentration range (0.1~1.0 ppm) examined, respectively. Limit of detection for sulfonamide was 0.0012 ppm for SMR in Paralichthys Olivacleus and 0.0020 ppm for SMR, 0.015 ppm for SMM in Cyprinus Carpio. The applicability of this procedure is demonstrated by separation and detection of incurred tetracycline and sulfonamide residues in fish muscle tissue.
Seo Hee-Jin;Lee Yeong-Mi;Do Jae-Cheul;Park No-Chan;Lee Yang-Soo
Korean Journal of Veterinary Service
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v.29
no.3
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pp.331-338
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2006
This survey was carried out to detect the residual antibiotics in beef (n = 1,071), pork (n=7,837) and chicken (n=1,536) from slaughter houses in Gyeongbuk province by EEC-4 plate method, Charm II and HPLC during 2005. Residues of antibiotic were detected from 9 beef (0.8%) and 119pork (1.52%) by EEC-4 plate method, and total positive rates were 1.23% (128). 126 samples of the 128 positive samples by the EEC-4 plate method were detected by charm II test. 128 samples were classified as tetracyclines 110 (95.5%), ${\beta}$-lactam 2 (1.6%), sulfonamide 22 (17.2%), quinolone 1 (0.8%). The highest residual concentration of oxytetracycline, tetracycline, chlor-tetracycline, penicillin, sulfamethazine, sulfadimethoxine, sulfaquinoxaline, sulfamerazine, sulfamonomethoxine and enrofloxacin were 7.57, 0.27, 0.40, 0.24, 14.24, 4.33, 8.59, 0.12, 0.09 and 1.98 ppm, respectively and 49 samples were exceeded legal admitted levels.
Kim Doo-Hwan;Lee Jae-Shin;Ham Hee-Jin;Ki No-Joon;Lee Jung-Hark
Korean Journal of Veterinary Service
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v.27
no.3
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pp.265-272
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2004
It was carried out to compare the residual materials by EEC 4-plate, Charm II and HPLC method in the muscles of cattle and pigs from slaughter-houses in Seoul from 2000 to 2003. Residual materials were detected from $1.10\%$(73/6,623) samples by EEC 4-plate method, and $10.93\%$(55/503) samples by Charm II method. The highest residual concentration(ppm) of oxytetracycline, tetracycline, chloramphenicol, chlortetracycline, sulfamethazine, sulfamerazine, sulfadimethoxine, penicillin and sulfamonomethoxine were 25.5, 3.46, 3.26, 1.5, 0.3, 0.2, 0.2, 0.14, and 0.07, respectively. Eighty nine samples were classified as 58($65.17\%$) only tetracyclines, 20($22.47\%$) only sulfonamides, 3($3.37\%$) only ${\beta}$-lactams, 2($2.25\%$) only chloramphenicol, 4($4.49\%$) tetracyclines and sulfonamides simultaneously, 1($1.12\%$) chloramphenicol and sulfonamides simultaneously, and 1($1.12\%$) chloramphenicol, sulfonamides and tetracyclines simultaneously.
This survey was carried out to determine 5 residual sulfonamides(sulfamerazine : SMR, sulfamethazine : SMT, sulfamonomethoxine : SMM:, sulfadimethoxine : SDM, sulfaquinoxaline : SQX) in muscle of mouse. For this investigation, pertaining detection wavelength, residual levels and residual times in muscle of mouse were summarized as follows ; 1. Pertaining detection wavelength of 5 residual sulfonamides(SMR, SMT, SMM, SDM, SQX) was 270nm by HPLC/UV detection. 2. After 1 day put a stop to sulfonamides administration, residual levels was 1∼l.5ppm, but were not detected at day 7 3. Withdrawal time of 5 sulfonamides were about 7 days suspectly.
This study is conducted to deyelop more conyenient simultaneous determination method by HPLC for mixed antimicrobial agents (sulfamerazine; SMR, sulfamethazine; SMT, sulfamonomethoxine; SMMX, sulfadimethoxine; SDMX, sulfaquinoxaline; SQX, furazolidone; FZ, zolene; ZOL and ethopabate; EPB in muscles of boline, pork and chicken. The drugs were extracted by dichloromethane and water. The extract, after solyent eyaporation, was partitioned in hexane/water and water/dichloromethane. The dichloromethane layer was filtrated with anhydrous $Na_5S0_4\;in\;_3G_3$ glass filter and was eyaporated to dryness. The residue was dissoIYed in mobile phase. The test solution analyzed by HPLC. The chromatograpic conditions were as follows; Column-Spheri 5 RP-8($4.6{\times}220,\;5\;{\mu}$), Wayelength-270 nm, Mobile phase-acetonitrile: 0.005 M oxalic acid (22 : 78). The ayerage recoyeries of drugs from muscles of boline, pork and chicken spiked standard solution were approximately 74~99%, 73~99% and 75~96%, respectiyely. The limits of detection were 5 ppb for SMR, SMT, SMMX, SDMX and EPB, and 8 ppb for SQX, FZ and ZOL.
Objective: Glucose transporter 9 (GLUT9) is a uric acid transporter that is associated with uric absorption in mice and humans; but it is unknown whether GLUT9 involves in chicken uric acid regulation. This experiment aimed to investigate the chicken GLUT9 expression and serum uric acid (SUA) level. Methods: Sixty chickens were divided into 4 groups (n = 15): a control group (NC); a sulfonamide-treated group (SD) supplemented with sulfamonomethoxine sodium via drinking water (8 mg/L); a fishmeal group (FM) supplemented with 16% fishmeal in diet; and a uric acid-injection group (IU), where uric acid (250 mg/kg) was intraperitoneally injected once a day. The serum was collected weekly to detect the SUA level. Liver, kidney, jejunum, and ileum tissues were collected to detect the GLUT9 mRNA and protein expression. Results: The results showed in the SD and IU groups, the SUA level increased and GLUT9 expression increased in the liver, but decreased in the kidney, jejunum, and ileum. In the FM group, the SUA level decreased slightly and GLUT9 expression increased in the kidney, but decreased in the liver, jejunum, and ileum. Correlation analysis revealed that liver GLUT9 expression correlated positively, and renal GLUT9 expression correlated negatively with the SUA level. Conclusion: These results demonstrate that there may be a feedback regulation of GLUT9 in the chicken liver and kidney to maintain the SUA balance; however, the underlying mechanism needs to be investigated in future studies.
The possibility of identification of families of antibacterial agent residues in fish tissue was studied by disk assay using three test organisms, Bacillus subtilis BGA, Micrococcus luteus ATCC 9341, and Bacillus cereus var. mycoides ATCC 11778. In the present method, a simple clean-up procedure was performed to obtain the aqueous solution from homogenized flounder muscle sample(10g) in Mcilvaine buffer. Then, aqueous solution was fractionated into A and B to be used in disk assay by choloroform and Sep-Pak $C_{18}$ cartridge column after being defatted in hexane. The chloroform layer of fraction A was used for the analysis of macrolide antibiotics(ML), sulfa drugs(SA), chloramphenicol(CP), and quinolone antibiotics(QN). Adsorbed materials to Sep-Pak $C_{18}$ of fraction B were also employed for the analysis of penicillins(PC), tetracyclines(TC), and nitrofuran derivatives(NF) Minimun-detectable concentrations by the present method were, $0.1{\mu}g$/g for oxytetracycline, tetracycline, doxycycline, spiramycin and ciprofloxacin, $0.025{\mu}g$/g for erythromycin and ampicillin, $1.0{\mu}g$/g for sodium nifurstyrenate and florfenical, $0.25{\mu}g$/g for sulfamonomethoxie and sulfadimethoxine, $2.5{\mu}g$/g for oxolinic acid and flumequine, and $15{\mu}g$/g for piromidic acid, respectively. Three test organisms showed different sensitivity patterns for each family of antibacterial agent. Sensitivity patterns were B. cereus > B. subtilis > M. luteus for TC and NF, M. luteus > B, subtilis > B. cereus for ML and PC, B. cereus = B. subtilis > M. luteus for CP and QN, and B. subtilis > B. cereus=M. luteus for SA. The present method utilizing these characteristics could be useful as a routine screening test for the determination of family of antibacterial agent residues in fish tissue.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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