어린돼지의 분변으로부터 Salmonella paratyphi에 강한 항균활성을 나타내는 균주를 분리하여, 이 균주를 Lactobacillus sp. KJ-5로 동정하였다. Lactoba C cillus sp. KJ-5 배양액의 항균활성은 균주의 성장에 비례하여 증가하여 정지기에서 최대를 나타냈으며, 최적 항균활성을 위한 배양온도는 $37^{\circ}C$로서 균주의 최적 성장온도와 통일하였다. Lactobacillus sp. KJ5 배양여액의 pH를 6.2로 조정한 경우 항균활성이 약간 감소하였으나, catalase 처리에 의해셔는 항균 활성에 아무런 영향이 없었으므로 배양중에 생성된 산이나 H101 이외의 물질이 항균활성에 관여함을 알 수 있었다. 배양여 액으로 부터 methanol과 acetone 추출에 의하여 S. paratyphi어l 항균활성을 냐타내는 항균물질을 부분정제하였다. 부분정제된 항균물질은 thin-layer chromatography에서 3개의 물질로 분리 되었으며, 이중에 하나가 항균활성을 나타내었다. 또 한 부분정제된 항균물질은 270nm에셔 최대 uv 흉 광도를 나타내였으며, 단백질 가수분해 효소의 처리 에 의하여 완전히 불활성화 되었다. 따라서 Lactob$\alpha$ C cillus sp. KJ-5가 생성하는 항균물질은 저분자량의 단백질일 것으로 추정된다.
For a microbial control of a plant pathogenic Pseudomonas syringae, Bacillus sp. strain BT182-3 was isolated. The strain BT182-3 had a growth inhibition against P. syringae not only on agar plate but also on cultured broth. After heat treatment at $40^{\cird}C$ and $80^{\cird}C$ for 30min, the lytic substance from the strain BT182-3 had about 52% remaining activity and 17% remaining activity, respectively. The optimal pH and temperature of the lytic substance was 6.0 and $28^{\cird}C$, respectively. Germination ratio of healthy radish seeds was 87% at $25^{\cird}C$ for 5 days in 0.8% saline, and that of the radish seeds infected with P. syringae was 67%, while that of the radish seeds treated with cultured broth of the strain BT182-3 was 90%. The 5-days healthy radish seedlings were 3.90cm at high and the seedlings infected with P. syringae were 3.06cm at high, while the seedlings treated with cultured broth of the strain BT182-3 were 4.30cm at high. The growth of the radish seedlings infected with P. syringae was inhibited after cultivation for 40days on pots, while the growth of the infected radish seedlings with P. syringae was recovered at stem length, root length and total weight at the same as the healthy seedlings after treatment of a lytic substance from the strain BT182-3.
Objectives: The aim of this study was to evaluate the effects of endodontic treatment on levels of substance P (SP) and calcitonin gene-related peptide (CGRP) in the saliva of patients with symptomatic apical periodontitis. Materials and Methods: Twelve patients with mandibular molars with symptomatic apical periodontitis were enrolled in this study. An initial saliva sample was collected just before administration of anesthesia for root canal treatment, which was performed at the first visit. A second saliva sample was collected at a control visit 1 week after treatment. Salivary SP and CGRP levels were evaluated quantitatively using biochemical assays. The data were analyzed using Pearson correlation analysis, the paired samples t-test, and the Mann-Whitney U test (p = 0.05). Results: The postoperative salivary level of SP was significantly lower than the preoperative level (p = 0.005). However, the postoperative salivary level of CGRP was similar to the preoperative level (p = 0.932). Visual analog scale (VAS) scores of patients' subjective pain were found to be positively correlated with salivary levels of SP (r = 0.421; p = 0.040). No statistically significant correlations were observed between salivary levels of CGRP and VAS scores for patients' subjective percussion tenderness (p = 0.533) or VAS scores for patients' subjective pain (p = 0.459). Conclusions: According to the results of the present study, salivary SP levels may be used as an objective indicator in the diagnosis and assessment of the degree of pain in endodontic diseases.
본 연구에서는 발거된 건전한 치아의 치수조직으로부터 배양된 치수조직을 SP 및 TNF (tumor necrosis factor)-${\alpha}$, 그리고 Spantide로 15분간 배양 후 SP로 36시간 자극하여 IL-8은 및 MCP-1의 분비량을 측정하였으며, 면역염색으로 IL-8의 분비를 관찰하여 다음과 같은 결론을 얻었다. 1. 치수 조직을 SP (10$^{-4}$M)로 36시간 자극 시 모의 자극에 비해 IL-8이 현저히 증가하였으며 (p < 0.05), 면역 염색 결과 모의 자극 시에는 치수조직의 변연부에만, SP(10$^{-4}$M)로 36시간 자극시에는 flbroblast 주위로 IL-8의 발현이 관찰되었다. 2. TNF-${\alpha}$ (40 ng/ml)로 치수조직을 36시간 자극시 모의 자극에 비해 MCP-1이 증가하였으며, SP에서는 증가 를 보이지 않았으며 (p < 0.05), 면역 염색 결과 IL-8의 발현이 관찰되지 않았으며, 치수 조직의 변연부를 따라서 약한 IL-8의 발현이 관찰되었다. 3. Spantide (10$^{-5}$ M)는 SP (10$^{-4}$ M)로 치수 조직을 36시간 자극 시 IL-8의 분비를 억제하였다.
An Actinomycetes producing an anti-VRSA (vancomycin-resistant Staphylococcus aureus) substance was isolated from soil. The cultural, morphological, physiological and phylogenetic analyses of an isolated strain were investigated for identification. Cultural characteristics based on ISP (International Streptomyces Project) were as follows: white aerial mycelium, yellow reverse side, and good growth on various medium. Also, the isolate did not produce the soluble pigment. Morphological characteristics were showed cylindrical spore chain and smooth spore surface by SEM (Scanning Electron Microscope). Physiological characteristics were showed LL-type by DAP isomer analysis and detected glycine, glutamic acid and alanine. A phylogenetic analysis of the 16S rDNA provided a clue that the isolated strain was actually a member of the genus Streptomyces, because the determined sequence exhibited a higher homology with Streptomyces echinatus. The isolate was identified to be a genus of Streptomyces sp.. The optimal culture conditions for the maximum production of anti-VRSA substance by Streptomyces sp. were attained in a culture medium composed of $2.0\%$ (w/v) glucose, and $0.4\%$ (w/v) yeast extract. The anti-VRSA substance was highly produced after 5 days of culture. Optimal pH and temperature conditions for the production of anti-VRSA substance were pH 7.0 and $28^{\circ}C$, respectively.
The peptide with structural similarity to mammalian substance P (M-SP) has been isolated from extract of the body of the African lungfish, Protopterus dolloi, using the rectum of the newt as the bioassay system. The primary structure of the SP-related peptide was identified as Lys-Pro-Arg-Pro-Asp-Gln-Phe-Tyr-Gly-Leu-Met-NH2 (L-SP) and contained four substitutions ($Lys^{1}\rightarrow $ Arg, $Arg^{3}\rightarrow$ Lys, $Asp^{5}\rightarrow$ Gln, and $Tyr^{8}\rightarrow$ Phe) compared with M-SP; this structure is identical to that of the peptide isolated from the gut of the Australian lungfish. Circular dichroism spectra showed that L-SP had an unordered structure in the buffer solution and phospholipid bilayers. This peptide was found to have an excitatory effect on rectal muscle tissues of newt, quail, and fish. L-SP also had a more potent vasodilatory effect on the guinea-pig aorta than that of M-SP. The identification of the peptide provides evidence that SP family, hitherto confined to mammals, have a widespread occurrence in lungfish.
본 연구에서는 Monascus sp. MK2가 생산하는 홍국색소의 안정성에 대하여 조사한 결과에서 광 안정성에서는 암 조건>자외선>실내(형광)>태양광 조건 순서로 안정하였으며, 온도에 대한 안정성은 온도가 증가하고 저장시간에 길어짐에 따라 홍국색소의 감소율 또한 비례적으로 증가하였고, pH에 대한 안정성은 전체적인 pH 영역에서 비교적 안정하였으며, 유기산 첨가에 대한 홍국색소의 안정성은 높은 것으로 생각되며, 합성 항산화제와 천연물 추출물 첨가시에는 안정성이 증대되는 것으로 조사되었다.
본 시험은 하여 산란계 사료내 누에고치 산가수분해물 첨가시 생산성, 계란 품질, 혈액 성상에 미치는 영향을 조사하기 위하여 수행하였다. 41주령 Hy-Line Brown 갈색계 240수를 공시하여, 4주간 사양 시험을 실시하였다. 일반 무첨가 사료를 대조구로 하여 SP1(일반 사료+누에고치 산가수분해물 0.05%), SP2(일반 사료+누에고치 산가수분해물 0.1%), SP3 (일반 사료+누에고치 산가수분해물 0.2%)으로 총 4개 처리구였으며, 처리 당 5반복, 반복 당 12수씩 완전 임의 배치하였다. 산란율과 난중에 있어서 전체 시험 기간 동안 누에고치 산가수분해물 첨가 수준에 따라 처리구간의 차이를 보이지 않았다. 난각 특성을 나타내는 난각 강도와 두께는 처리구간에 유의적인 차이를 보이지 않았으나, 난황고와 Haugh unit에 있어서는 누에고치 산가수분해물을 첨가 급여한 처리구가 유의적으로 높게 나타났다(P<0.05). 면역 물질인 IgG 함량과 WBC 함량은 누에고치산가수분해물을 첨가한 SP1, SP2, SP3 처리구가 대조구와 비교하여 유의적으로 높게 나타났다(P<0.05). 누에고치 산가수분해물 첨가 급여는 산란계에서 혈액 내 총 단백질, 알부민 함량에 영향을 미치지 않았다. 그러나 혈청 내 인지질, HDL-cholesterol, LDL-cholesterol, total cholesterol 함량을 높여주었다. 사료 내 누에고치 산가수분해물 0.05% 이상 첨가 급여 시 계란의 신선도를 증가시키고, 산란계의 면역과 지질 대사에도 영향을 미치는 것으로 사료된다.
The neuropeptide substance P(SP) has been implicated in the mediation of inflammation and immune-mediated disease such as arthritis. Recently, it was reported that SP was markedly increased around the blood vessels in inflamed gingiva as well as in close association with the inflammatory cell infiltrate. These results support that SP may contribute to the pathophysiology of neuronal inflammation in human periodontal tissues. SP may regulate inflammatory/immune responses by stimulating the proliferation of human T cells, differentiation and antibody-secreting potential of B cells, macrophage respiratory burst, connective tissue proliferation, and the secretion of cytokines from monocytes and T cells. Here, I studied potential role of SP as a costimulatory chemical signal in inflammatory/immune responses, by determining the released proinflammatory cytokines such as $MIP-1{\alpha}$, $IL-1{\beta}$, and IL-6 from culture supernatants of homogeneous immune cell lines. Serum free cell supernatants were concentrated with TCA precipitation, fractionated with SDS-PAGE, and subjected into western blot analysis. Among 15 cell lines tested, macrophage/monocyte cell line RAW264.7 and WRl9m.1 showed the highest level of induction of $MIP-1{\alpha}$ when stimulated with LPS. Discrete IL-6 bands with multiple forms of molecular mass were detected from supernatants of B cell lines A20(32kDa), Daudi(32, 35kDa), and SKW6.4(29kDa), which were expressed constitutively. $IL-1{\beta}$ could not be detected by the method of western blot analysis from supernatants of all cell lines tested except RAW264.7, WRl9m.1, and erythroid cell line K562 which showed the least amount of $IL-{\beta}$ secretion. SP $10^{-9}M$ with suboptimal dose of LPS treatment showed synergistic induction of $MIP-1{\alpha}$ release from RAW264.7 or WR19m.1, and also IL-6 release from A20, but this synergism is not the case in costimulation of RAW264.7 or WRl9m.1 with SP $10^{-9}M$ and TPA. Although treatment of T cell line CTLL-R8 with SP $10^{-7}M$ or PHA+TPA induced modest level of $MIP-1{\alpha}$ secretion, synergism was not observed when they are applied together. These findings all together suggest the possibility of a regulatory role of SP in inflammatory/immune reaction through differential modulation of bioactivities of other chemical cosignals.
Antinociceptive and desensitizing effects of systemically administered capsaicinoids (capsaicin and KR25018) were investigated in guinea pig. Nociceptive sensitivity to chemical stimulus was examined to test sensory function, and the content of substance P-like immunorractivity (SP-LI) in bronchi was determined as a peripheral marker of capsaicin-sensitive primary afferent neurons. Guinea pigs were pretreated s.c. with several doses of capsaicin (1,2.5,5, 10 mg/kg) or KR25018 (1, 2.5, 5, 10 mg/kg) one week prior to the experiments. Frequency of eye wiping was significantly decreased by capsaicin and KR25018 in a pretreatment dosedependent manner. In capsaicin- or KR25018-pretreated guinea pigs, there was a significant loss of SP-LI in bronchial tissue extracts. In summary, a newly synthesized capsaicin analogue H725018 exhibited antinociceptive effect against chemical stimulus in guinea pig, with comparable potency to capsaicin. This desensitizing activity of capsaicin or KR25018 might be related to the loss of SP-LI in peripheral afferent nerves.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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