Su Jianyu;Jia Shiru;Qiao Changsheng;Kim Jung-Gyu;Hong Wan-Hae;Cho Ki-An;Choi DuBok
환경생물
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제23권2호
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pp.135-140
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2005
In order to construct an artificial cultivation of Nostoc flagelliforme on solid medium, we attempted to assess the viability of approaches, which utilized either BG-11 agar or sand medium using both sterile and non-sterile algal segments. In the trial in which the BG -11 agar medium was inoculated with the non-sterile algal segments, the algae exhibited the rapid growth in the initial 4 days of cultivation. However, after 4 days of cultivation, the growth rate of the algae slowed, and the algal growth was completely stopped by 7 days of cultivation. When the BG -11 medium was inoculated with the sterile algal segments, the algae exhibited the rapid growth for a longer period of 8 days, reaching a length of 24.9 mm. The growth rate during this period was measured to be $24.5\%$. After the 8 days of cultivation, the algal growth rate began to slow and had almost stopped by the 13 days of cultivation. On the other hand, when the sterile algal segments were inoculated onto a sand plate, the algal segments decomposed, reaching total decomposition after 11 days of cultivation. By way of contrast, the desiccation treatment samples continued to grow for 14 days of cultivation. After 14 days of cultivation, the algae achieved a length of 26.1 mm, with a growth rate of $30.6\%$. Our results indicate that periodic desiccation may constitute an effective strategy for the prevention of algal decomposition.
본 시험은 버섯 배지를 살균할 때 배지의 내부에 삽입하여 실시간으로 온도 측정값을 저장할 수 있고 고온고압에 견디는 기기(iButton Temperature Data Logger DS-1922T)를 사용하였다. 이 온도측정기는 살균기의 종류, 배지의 종류와 용량, 살균방법별로 일정한 시간 간격에 따라 살균기 및 배지 내부의 온도변화와 살균온도 유지시간의 측정이 가능하였다. 이 실험에 사용한 방법과 결과는 버섯 재배현장에서 응용함으로써 알맞은 배지 살균으로 버섯의 안정생산에 기여할 것으로 기대된다.
Beyaz, Ramazan;Darcin, E. Selcen;Aycan, Murat;Kayan, Mustafa;Yildiz, Mustafa
Journal of Plant Biotechnology
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제43권2호
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pp.240-247
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2016
In this study, routinely used transformation method, which includes transferring explants onto co-cultivation medium after inoculating them with bacterial solution for a while, was compared with 3 different inoculation methods. In every 3 methods, hypocotyl explants excised from 7-day-old sterile flax seedlings having cotyledon leaves and no root system dried under air flow in sterile cabin for 35 min were inoculated with different volumes of bacterial solution at different inoculation periods. GV2260 line of Agrobacterium tumefaciens having 'pBIN 19' plasmid containing npt II (neomycin phosphotransferase II) gene and GUS reporter gene was used in transformation studies. After inoculation, hypocotyl segments of seedlings (0.5 cm in length) - were excised and left to co-cultivation for 2 days. Then, explants were transferred to regeneration medium supplemented with different antibiotics. The presence of npt-II and GUS genes in transformants was confirmed by PCR and GUS analysis. The highest results in all characters examined in all cultivars were obtained from the 2 inoculation method in which hypocotyls excised from seedlings inoculated with $500{\mu}l$ of bacterial solution after drying in sterile cabin for 35 min were used.
One hundred and eighteen cultures of Gram-negative rods isolated from cases of clinical bovine mastitis during lactation were examined for distribution of specific types, and activity of several antimicrobial agents to the isolates was determined by two-fold tube dilution method employing sterile whole milk as fluid medium. Of the isolates, 59.2% were Escherichia coli. Most of the remaining isolates were Klebsiella pneumoniae and Enterobacter aerogenes. Most Gram-negative rods(89.8%) were isolated from acute local and chronic mastitis. The cases of peracute systemic form with a marked symptoms of toxemia were associated with Escherichia coli and Klebsiella pneumoniae. The minimal lethal concentrations (MLC) of gentamicin and oxolinic acid in sterile whole milk were 16-128 times higher than the MLC obtained in trypticase soy broth (TSB), while the MLC of ampicillin and tetracycline in milk increased 2-4 times compared with TSB. Of the drugs tested, gentamicin was the most active antibiotics with MLC of $100{\mu}g/ml$ in sterile whole milk against all of Gram-negative rods isolated from bovine udder infections.
Interspecific cross between Nicotiana trigonophylla and N. tabacum cv. BY4 is highly sterile because of abnormal ovule and embryo development. In vitro culture of excised N. trigonophylla ovules after polination by N. tabacum allows significant numbers of hybrid embryos to develop into mature plants. Total yield of seedlings and number of normal seedlings were produced following in vitro culture of individual fertilized ovules of N. trigonophylla X N. tabacum at four days post-pollination on B5 medium containing 6% sucrose. Hybrids were uniform in morphology and peroxidase isozyme composition and the majority were cytologically stable: flower characteristics were generally intermediate between those of the parents. All hybrids evaluated were self-sterile.
우리나라 japonica 벼의 일대잡종을 다양하게 육성할 목적으로 세포질 유전자적 웅성불임인 BTCMS에 대한 임성회복력이 있는 계통 AR-3을 교잡하여 그 F1을 모본으로 하고 조ㆍ중ㆍ만생의 한국 japonica형 벼 4품종씩을 교본 반복친으로 5회 backcross하여 우리나라 벼 품종 배경의 우엉불임 계통과 임성회복계통을 육성하고 이들의 주요 작물학적 특성을 각각의 반복친과 비교한 결과를 요약하면 다음과 같다. 1. 우리나라 japonica형 품종의 배경을 갖는 세포질 유전자적 웅성불임계통을 조ㆍ중ㆍ만생군으로 각각 4개씩 도합 12계통 육성하였으며, 동일한 품종의 배경을 갖는 임성회복계통친도 조ㆍ중ㆍ만생군으로 각각 4개씩 12계통 육성하였다. 2. 육성된 웅성불임계통은 조중군에서 소백벼 A, 오대벼,A, 관악벼A, 대성벼A, 중생군에서 화진벼A, 팔달A, 수원 224A, 이리 386A, 만생군에서 낙동벼A, 팔굉A, 화청벼A 및 밀양 97A 등으로 명명하였다. 3. 육성된 임성회복계통은 조생군에서 소백벼R, 오대벼R, 팔달R, 수원 224R, 이리 386R, 만생군에서 낙동벼R, 팔굉R, 화청벼R 및 밀양 97R 등으로 명명하였다. 4. 육성된 웅성불임계통들은 반복친(불임유지친)에 비하여 간장이 단축되는 경향이었으나 출수기, 수장 및 수량구성요소 등은 대체로 비슷하였다. 5. 육성된 임성회복계통들은 반복친과 비교하면 대체로 간장, 수장, 수량구성요소 및 수량의 차이가 없었다.
A technique for detection of Xanthomonas axonopodis pv. citri, a causal bacterium of canker on Unshiu orange fruits, was developed using bacteriophage. Procedure for the detection was designed on the basis of the previous reports that one group(CPI) of X. axonopodis pv. citri bacteriophage and corresponding two Iysotypes distributed in Korea. First, fruit surface was washed with sterile distilled water and pellet was obtained from centrifugation. The pellet was resuspended in Wakimoto's potato semi-synthetic broth medium and divided equally into two parts. One part was heated in boiling water to kill bacterial cells. Bacteriophages(CP$_1$) were respectively added into two parts and 0.1 ml from each part was mixed with soft agar medium. After incubation for 18 hrs at 25$^{\circ}C$, the causal bacterium of canker was determined based on plaques formed on the medium. This procedure can be effectively used for detection of living bacterial pathogen on fruit surfaces of Unshiu orange.
To use cultured mucosa as a graft of full thickness, our laboratory has been involved in the development of techniques to grow epidermis together with connective tissue. Human oral mucosa was obtained at dental surgery. Under sterile conditions the tissues were cut into explants of 0.1 $cm^2$ which were placed in the center of 24 well tissue culture dishes and incubated in a growth medium. The growth medium used for epithelial was MEM(Minimum Essential Medium) supplemented with 10% fetal calf serum, 0.5% dimethyl sulfoxide, glutamine (0.292 g/l), epidermal growth factor (40 ug/ml), cholera toxin (30 ng/ml), hydrocortisone (2 ug/ml), insulin (40 ug/ml) and transferin (5 ug/ml). The medium for stratification of epithelial cells was MEM supplemented with 10% fetal calf serum, 0.5% dimethyl sulfoxide and glutamine (0.292 g/l). The medium used for fibroblasts was MEM supplemented with 10% fetal calf serum. With the three types of media used alternatively, a mucosa composed of epidermis and connective tissue was obtained after 3 weeks of culture.
태백벼의 현탁배양세포주로부터 유도된 체세포배를 낱개로 알진산 캡슐화하여 인공종자화하였다. 인공종자는 1/2 MS 고체배지에서 73%의 발아율을 나타내었으며 알진산 캡슐은 체세포배의 발아율에 영향을 주지 않았다. 그러나 멸균되지 않은 여과지에서는 발아율이 60%로 낮아졌다. 캡슐화된 진정종자는 무균상태여부에 관계없이 높은 발아율을 나타내었다. 이상의 결과로 무균상태가 유지되지 않을 때 인공종자 발아율이 낮아지는 것은 체세포배가 진정종자의 접합자배보다 오염을 견디기 어렵기 때문인 것으로 사료된다.
The present study examined various environmental and cultural media conditions for in vitro "rescue" of cross-fertilized ovules formed through sexual crosses between Nicotiana rustica and N. tabacum cv. BY4. The response ovules to two cultural procedures was compared; ovules were cultured either separately or left attached to the placenta. Total yield of seedlings and percent of normal seedlings were increased by culturing individual ovules separately, rather than on excised placenta. Total yield of seedlings and number of normal seedlings were produced following in vitro culture of individual fertilized ovules of N. rustica X M tabacum cv. BY4 at four days post-pollination on NN medium containing 2% sucrose. In the in vitro culture of fertilized ovules, high sucrose concentration increased the frequency of seedlings of abnormal appearance. Therefore, sucrose should be supplied to developing ovules at gradually decreased concentrations. Culture of fertilized ovules from three to eight days after pollination gave increased number of seedlings, but with delayed cultral time the number of morphologically normal seedling were decreased. Hybrids were uniform in appearance and showed vegetative heterosis but flower characteristics were generally intermediate between those of the parents. All hvbrids evaluated were self-sterile.f-sterile.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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