Two neuropeptides were purified from the acidified tube feet extract of the starfish Asterias amurensis by C18 reversed phase and size-exclusion high-performance liquid chromatography (HPLC). The tube feet extract and the purified peptides (AST-I and AST-II) showed potent contractile activity on dorsal retractor muscle (DRM) of the starfish Asterina pectinifera and intestine (smooth muscle) of the panther puffer Takifugu pardalis. Treatment of the purified peptides with dithiothreitol (DTT) for 60 min at $37^{\circ}C$ significantly altered their retention times, suggesting that these compounds contained disulfide bonds. The molecular weights of AST-I and AST-II were determined to be 2064.2 Da and 6137.2 Da, respectively, by MALDI-TOF mass spectrometry.
Bioassays using gametes of sea urchins are widely used in ecotoxicological assessments of marine environments. Since most of sea urchin species in Korean coastal water spawn from spring to autumn, bioassay with them during the winter is impossible. In the course of developing standard methods for bioassays with Korean species, we found a winter-spawning starfish, Asterias amurensis, Since reproductive mode of asteroids is similar to echinoids, the bioassay protocol for sea urchins could be applied similarly to the starfish. Here, we tested and determined several conditions for the acceptability of bioassay with A. amurensis. The least required time for formation of fertilization membrane of fertilized eggs to be easily distinguished from unfertilized ones was 60 min. The threshold of sperm to egg ratio that could make acceptable fertilization rates in controls was 3000. The allowed time for manipulation of sperm after dilution in seawater was at most 3 hr. The optimal exposure time of sperms when the response against toxicant solution was relatively stable was in the range of 20-60 min. The tolerance range of sperms to the salinity of test solution was 26-38 psu. The sensitivity of A. amurensis sperm was intermediate among marine organisms commonly used in aquatic toxicity tests. The sperm bioassay with A. amurensis can be satisfactorily applied to toxicity assessments of marine environments.
전라남도 장흥군 인근 해안에서 채집한 불가사리(Asterias amurensis)를 대상으로 불가사리의 장내에 분포하는 종속영양세균의 균체수를 측정하였고, 분리동정된 균주들을 대상으로 탄소원 이용 특성을 조사하였다. 불가사리의 장내에 분포하는 종속영양세균의 균체수는8.65$\pm$0.65 $\times$$10^3$ cfu . g$^{-1}$이 였으며, 분리 동정된 24균주(그람음성균 11균주, 그람양성균이 13균주)중에서 Vibrio속,Staphylococcus속, Corynebacterium속이 높게 나타났다. 불가사리 장내에서 분리 동정된 세균들은 그람양성의 간균이 높은 비율을차지하였고, catalase와 oxidase의 활성은 각각 54.2%,20.8%로 나타났다. 그람음성균의 경우, 탄소원으로 glucose의 이용률이 가장 높았고, 그 다음으로 sucrose, mannose, maltose,그리고 trehalose의 순으로 높은 이용률을 나타냈으며, adipate, phenol acetate는 이용하지 못하였다. 그람양성균의 경우, glucose가 가장 높은 이용률을 나타냈고, 그 다음은 fructose, trehalose, maltose 순으로 높은 이용률을 보였다.
Anastasia Kubarova;Hye-Jin Go;Hye Young Oh;Nam Gyu Park
Fisheries and Aquatic Sciences
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제25권11호
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pp.572-578
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2022
An organism's physiological processes and behaviors are regulated by neuropeptides and hormone peptides. The first neuropeptide identified from echinoderms is SALMFamide. The two most well-studied SALMFamide neuropeptides are S1 and S2, which possess myoactivity on apical muscle, tube feet, and the cardiac stomach of starfishes. However, neuropeptide candidates identified from SALMFamide's precursor protein sequence have not been investigated. This study aims to compare the bioactivity of SALMFamide neuropeptides from the starfish Asterias rubens using various starfish muscle preparations. In this study, the bioactivity of the L-type SALMFamide neuropeptides from the starfish A. rubens, AYHTGLPFamide (SALMFa-A) and the derivative AYHSALMFamide (SALMFa-B) was investigated. The neuropeptides were applied on Asterias amurensis apical muscle, tube feet, which revealed that the neuropeptides exhibit relaxing activity on apical muscle but no activity on tube feet. The native SALMFa-A peptide had lower relaxing activity on the apical muscle compared to the derivative peptide SALMFa-B. The relaxing activity of two neuropeptides also was compared with those on the apical muscle of Patiria pectinifera, which revealed relaxing activity as well as SALMFamide-S1 and S2 neuropeptides. Moreover, the investigation of SALMFa-A and SALMFa-B peptides' bioactivity on P. pectinifera cardiac stomach muscle also showed slight relaxing activity.
본 연구는 2000년 7월에 전남 장흥군에서 채집한 불가사리의 장내에 존재하는 종속영양세균의 다양성에 대해서 알아보았다. 불가사리 장내에 존재하는 균체수를 측정하였으며, 순수 분리된 균주를 대상으로 16S rDNA 증폭기법을 이용하여 세균의 다양성을 조사하였다. 불가사리 장내에 분포하는 종속영양세균의 균체수는 8.65${\pm}$0.65${\times}10^3\;dfu\;g^{-1}$이었다. 29 균주의 세균이 순수 분리되었으며, 그 중 그람양성 세균은 분리된 균주의 59% (17균주)를 차지하였다. 불가사리 장내에서 분리된 균주는 Bacillus속, Microbacterium 속, 그리고 Marinobacter 속 등이 우점이었으며, 이외에도 Staphylococcus 속, Psychrobacter 속, Paracoccus 속, Erythrobacter 속, Zoogloea 속, Kocuria 속과 Arthrobacter 속 등이 포함되었다. 분리된 균주 가운데 Bacillus 속에 속하는 8균주 중 3균주는 type strain과 97% 이상의 유사도를 보인 반면, 5 균주는 유사도가 90%로 비교적 낮은 유사도를 보여 현재까지 알려지지 않은 신종일 가능성이 높다고 하겠다.
아무르불가사리(Asterias amurensis)의 6가지의 조직 추출물들을 사용하여 항균활성, 항산화 활성 및 평활근에 대한 수축과 이완반응에 대한 활성을 측정하였다. 1% (v/v) 초산용액을 사용하여 동결 건조한 샘플들을 추출하여 각각의 활성측정에 사용한 결과, 껍질을 제외한 모든 조직 추출물들은 E. coli D31에 대해 강한 항균활성을 나타내었고, 근육 및 장관 추출물들은 별불가사리(Asterina pectinifera)의 DRM에 대해 수축반응을 나타냈다. 한편, 오징어(Todarodes pacificus) 식도에 대한 수축반응은 실험에 사용한 모든 조직 추출물들에서 검출되었다. 특히, 간 추출물의 수축활성은 다른 조직의 추출물의 활성에 비해 더 높았다. 뿐만 아니라 간, 근육 및 소화관 추출물은 졸복(Takifugu pardalis)의 장관에 대해서 수축반응을 나타냈다. 별불가사리의 DRM에 대한 이완반응은 실험에 사용한 모든 조직 추출물들에서 활성을 나타냈다. 항산화 활성은 장관, 간 및 껍질의 추출물들에서 강하게 나타났다. 따라서 아무르불가사리는 새로운 생체기능 조절물질의 발견에 대한 가능성을 지닌 자원이라는 것을 본 연구의 결과들은 제시한다.
This study examined the antimicrobial, antioxidant, and tyrosinase inhibitory activities of bioactive compounds extracted from two starfish, Asterina pectinifera and Asterias amurensis, using solvent extraction after $Protamex^{TM}$ hydrolysis. Methanol and acetone fractions collected by stepwise extraction from specimens were subjected to silica gel column chromatography (SGCC) (200 mesh and 400 mesh), followed by high-performance liquid chromatography (HPLC). Two fractions (7:3 and 5:5 chloroform : methanol ratio, v/v) eluted using silica gel column chromatography from the two starfishes showed higher antimicrobial activity against Propionibacterium acnes and dermatophyte fungi (Epidermophyton floccosum, Microsporum audouinii, Trichophyton ferrugineum, Trichophyton mentagrophytes, and Trichophyton rubrum), antioxidant activity ($EDA_{50}$, mg/mL), and tyrosinase inhibitory activity compared to the other fractions. The final fractions obtained from Asterina pectinifera (RT 7.53, 8.93, and 10.48 min) and Asterias amurensis (RT 5.02 min) by SGCC (400 mesh) and HPLC from two SGCC fractions (200 mesh) showed 8.94 and 15.59 mg/mL antioxidant activity ($EDA_{50}$) and 46.89 and 40.19 % tyrosinase inhibitory activity, respectively. Extracts from starfishes are potential cosmetic basic material.
우리나라는 삼면이 바다인 환경적 특성으로 인해 연안 양식 산업이 발전해 왔다. 번식력과 포식성이 매우 강한 아무르불가사리에 의해 우리나라 근해의 양식 산업이 받는 피해가 매년 급증하고 있다. 더욱이 아무르불가사리는 살아있는 어패류를 잡아먹기 때문에 양식 어민들의 피해가 매우 크다. 이 논문에서는 수중에서 획득한 아무르불가사리 영상에서 효과적으로 특징을 추출하는 방법을 제안하였다. 제안한 방법에서는 6-방향 스캐닝을 이용한 볼록 특징 추출을 사용하여 기존 방법에 비해서 적은 수의 특징 후보를 산출한다. 또한, 추출된 볼록 특징과 영역 중심점을 이용하여 후보 오목점을 선정한 후 최종 오목 특징을 추출한다. 군집 생활을 하는 불가사리의 특성 때문에 입력 영상의 불가사리 개체도 밀집되어 있다. 따라서 입력 영상에서 추출되는 특징 후보의 수를 최소화하는 것은 중요한 의미를 갖는다. 실험결과, 제안한 특징 추출 방법은 특징 후보수 대비 특징 추출률이 약 88%로 기존 방법에 비해 개선되었다.
이 논문에서는 다양한 불가사리 영상을 판단하여 불가사리를 인식하는 기법을 제안하고자 한다. 아무르불가사리의 단일개체를 인식하는 경우는 불가사리의 오목 특성과 단선 특성을 이용하여 불가사리 여부를 판단할 수 있으나, 다중개체의 경우는 오목과 단선을 이용한 불가사리의 특징 추출이 불가능하기 때문에 불가사리로 인식할 수 없다. 따라서 다중개체의 영역 중심 모멘트와 장선을 이용하여 장선의 표준편차, 장선별 표준편차 값, 상대각 표준편차, 유효편차수 등의 특징을 이용한 인식 기법을 제안하고자 한다. 제안한 기법의 실험 결과 장선의 표준편차 조건이나 상대각의 유효편차수 조건을 만족하지 못하여 인식에 실패한 경우도 있었으나 약 95%의 높은 인식률을 보였다.
Asterias amurensis (starfish) is a marine organism that is harmful to the fishing industry, but is also a potential source of functional materials. The present study was conducted to analyze the profiles of fatty acids extracted from A. amurensis tissues and their anti-inflammatory effects on RAW264.7 macrophage cells. In different tissues, the component ratios of saturated fatty acids, monounsaturated fatty acids, and polyunsaturated fatty acids differed; particularly, polyunsaturated fatty acids such as dihomo-gamma-linolenic acid (20:3n-6) and eicosapentaenoic acid (20:5n-3) were considerably different. In lipopolysaccharide-stimulated RAW264.7 cells, fatty acids from A. amurensis skin, gonads, and digestive glands exhibited anti-inflammatory activities by reducing nitric oxide production and inducing nitric oxide synthase gene expression. Asterias amurensis fatty acids effectively suppressed the expression of inflammatory cytokines such as tumor necrosis $factor-{\alpha}$, interleukin-$1{\beta}$, and interleukin-6 in lipopolysaccharide-stimulated cells. Cyclooxygenase-2 and prostaglandin $E_2$, which are critical inflammation biomarkers, were also significantly suppressed. Furthermore, A. amurensis fatty acids reduced the phosphorylation of nuclear $factor-{\kappa}B$ p-65, p38, extracellular signal-related kinase 1/2, and c-Jun N-terminal kinase, indicating that these fatty acids ameliorated inflammation through the nuclear $factor-{\kappa}B$ and mitogen-activated protein kinase pathways. These results provide insight into the anti-inflammatory mechanism of A. amurensis fatty acids on immune cells and suggest that the species is a potential source of anti-inflammatory molecules.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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