The foam separation of bovine serum proteins was investigated and the protein fractionation by foam separation was analyzed by PAG electrophoresis. The protein concentration for the surface excess formation of bovine serum was in the range of $20-800\;{\mu}g/ml$. At pH 5, the foamate volume was maximum, but the enrichment ratio minimum. As the temperature was elevated, the foamate volume decreased and the enrichment ratio increase. As the gas flow rate increased from 25 to 100 ml/min, the foamate volume decreased and the enrichment ratio increased. The enrichment ration became maximum when the added ionic strength of serum solution was in the range of 1-3 by the addition of different types of salts, and this was related to the reduction of surface tension of the solution. In general, BSA, ${\alpha}_1$, and ${\alpha}_2-globulins$, which have relatively small molecular weight and high hydrophobicity, moved easily to the foam, and the separation of protein fractions in the serum varied with the changes in pH, temperature, gas flow rate and ionic strength of the solution.
Neurognathostomiasis is a severe form of human gnathostomiasis which can lead to disease and death. Diagnosis of neurognathostomiasis is made presumptively by using clinical manifestations. Immunoblotting, which recognizes antigenic components of molecular mass 21 kDa and 24 kDa in larval extracts of Gnathostoma spinigerum (Gs 21/24), has high sensitivity and specificity for diagnosis of neurognathostomiasis. However, only very small amounts of the Gs 21/24 antigens can be prepared from parasites harvested from natural or experimental animals. To overcome this problem, we recently produced a recombinant matrix metalloproteinase (rMMP) protein from G. spinigerum. In this study, we evaluated this rMMP alongside the Gs 21/24 antigens for serodiagnosis of human neurognathostomiasis. We studied sera from 40 patients from Srinagarind Hospital, Khon Kaen University, Thailand, with clinical criteria consistent with those of neurognathostomiasis, and sera from 30 healthy control adults from Thailand. All sera were tested for specific IgG antibodies against both G. spinigerum crude larval extract and rMMP protein using immunoblot analysis. The sensitivity and specificity for both antigenic preparations were all 100%. These results show that G. spinigerum rMMP protein can be used as an alternative diagnostic antigen, in place of larval extract, for serodiagnosis of neurognathostomiasis.
The hypoglycemic effect of Polygonatum odoratum var. Pluriflorum Ohwi was investigated after extracted with methanol. The methanol extract was fractionated into 4 layers ; hexane, chloroform, butanol and aqueous. Fifty male Sprague-Dawley rats(200-300g) were induced diabetes mellitus by the streptozotocin injection(45mg/kg B.W) into the tail vein and were divided into 5 groups ; diabetic control and 4 experimental groups. All groups of the rats were fed on a AIN-76 diet, and the 4 experimental groups were orally administered with each fraction(500mg/kg B.W) for 12 days and the diabetic control group was orally administered CMC. The body weight gain was monitered and the blood levels of glucose and cholesterol were measured. Levels of protein, triglyceride, and free fatty acid in plasma were analysed. The contents of protein, triglyceride and glycogen in liver and of protein and glycogen in muscle were also determined. The body weight gain was shown significantly higher in the H2O fraction group than that in the diabetic control group and the heart weight was greater in the CHCl3 group. The extents of blood glucose decrement were greater in the BuOH and H2O groups than that in the control group. The urinary glucose excretion was shown relatively small amount in the BuOH and H2O groups. The plasma cholesterol and protein levels were not influenced by these four fractions in diabetic rats. The liver glycogen level was significantly higher in the BuOH group. The results suggest that the orally administered BuOH and H2O fraction of Polygonatum odoratum var. Pluriflorum Ohwi exhibited hypoglycemic effect in streptozotocin induced diabetic rats.
We have investigated the effect of melatonin (MLT) on specific growth rate (SGR% $day^{-1}$), condition factor (k), gonado-somatic-index (GSI), histological structures of gonads, serum as well as gonadal protein and lipid in Nile tilapia Oreochromis niloticus. MLT treatment in the dose of 25 ${\mu}g/L$ for three weeks reduced SGR% $day^{-1}$ ($0.9{\pm}0.04$) as compared to control ($1.23{\pm}0.026$). The GSI value was significantly (p<0.05) reduced to $1.77{\pm}0.253$ from control where it was $2.56{\pm}0.25$. Serum protein level increased from $9.33{\pm}2.90$ mg/ml (control) to $11.67{\pm}1.45$ mg/ml after MLT treatment while there was depressed serum triglycerides ($86.16{\pm}1.078$ mg/dl) and cholesterol ($126.66{\pm}0.88$ mg/dl) as compared to control values where these were $123.0{\pm}1.23$ mg/dl and $132.0{\pm}1.65$ mg/dl respectively. Histological structure of ovary showed small eggs of early perinucleolus stage after MLT treatment while testicular structure of control and MLT treated fish was more or less similar. It is concluded that exogenous melatonin suppressed SGR% $day^{-1}$, GSI, ovarian cellular activity, protein and lipid biosynthesis, in tilapia suggesting that melatonin is useful in manipulating the gonadal maturity in fishes.
Recent studies have indicated a link between levels of cyclooxygenase-2 (COX-2) and development of the multidrug resistance (MDR) phenotype. The ATP-binding cassette sub-family G member 2 (ABCG2) is a major MDR-related transporter protein that is frequently overexpressed in cancer patients. In this study, we aimed to evaluate any positive correlation between COX-2 and ABCG2 gene expression using the COX-2 inducer 12-O-tetradecanoylphorbol-13-acetate (TPA) in human breast cancer cell lines. ABCG2 mRNA and protein expression was studied using real-time RT-PCR and flow cytometry, respectively. A significant increase of COX-2 mRNA expression (up to 11-fold by 4 h) was induced by TPA in MDA-MB-231 cells, this induction effect being lower in MCF-7 cells. TPA caused a considerable increase up to 9-fold in ABCG2 mRNA expression in parental MCF-7 cells, while it caused a small enhancement in ABCG2 expression up to 67 % by 4 h followed by a time-dependent decrease in ABCG2 mRNA expression in MDA-MB-231 cells. TPA treatment resulted in a slight increase of ABCG2 protein expression in MCF-7 cells, while a time-dependent decrease in ABCG2 protein expression was occurred in MDA-MB-231 cells. In conclusion, based on the observed effects of TPA in MDA-Mb-231 cells, it is proposed that TPA up-regulates ABCG2 expression in the drug sensitive MCF-7 breast cancer cell line through COX-2 unrelated pathways.
Present study aimed to investigate the effect of curcumin-pretreatment on intestinal I/R injury and on intestinal mucosa barrier. Thirty Wistar rats were randomly divided into: sham, I/R, and curcumin groups (n=10). Animals in curcumin group were pretreated with curcumin by gastric gavage (200 mg/kg) for 2 days before I/R. Small intestine tissues were prepared for Haematoxylin & Eosin (H&E) staining. Serum diamine oxidase (DAO) and tumor necrosis factor (TNF)-${\alpha}$ levels were measured. Expression of intestinal TNF-${\alpha}$ and tight junction protein (ZO-1) proteins was detected by Western blot and/or immunohistochemistry. Serum DAO level and serum and intestinal TNF-${\alpha}$ leves were significantly increased after I/R, and the values were markedly reduced by curcumin pretreatment although still higher than that of sham group (p<0.05 or p<0.001). H&E staining showed the significant injury to intestinal mucosa following I/R, and curcumin pretreatment significantly improved the histological structure of intestinal mucosa. I/R insult also induced significantly down-regulated expression of ZO-1, and the effect was dramatically attenuated by curcumin-pretreatment. Curcumin may protect the intestine from I/R injury through restoration of the epithelial structure, promotion of the recovery of intestinal permeability, as well as enhancement of ZO-1 protein expression, and this effect may be partly attributed to the TNF-${\alpha}$ related pathway.
Benzidine, a known carcinogen, is closely associated with the development of bladder cancer (BC). Epithelial-mesenchymal transition (EMT) is a critical pathophysiological process in BC progression. The underlying molecular mechanisms of mitogen-activated protein kinase (MAPK) pathway, especially extracellular regulated protein kinases 5 (ERK5), in regulating benzidine-induced EMT remains unclarified. Hence, two human bladder cell lines, T24 and EJ, were utilized in our study. Briefly, cell migration was assessed by wound healing assay, and cell invasion was determined by Transwell assay. Quantitative PCR and western blot were utilized to determine both gene expressions as well as protein levels of EMT and MAPK, respectively. Small interfering RNA (siRNA) was transfected to further determine ERK5 function. As a result, the migration and invasion abilities were enhanced, epithelial marker expression was decreased while mesenchymal marker expression was increased in human BC cell lines. Meanwhile, benzidine administration led to activation of ERK5 and activator protein 1 (AP-1) proteins, without effective stimulation of the Jun N-terminal kinase (JNK) or p38 pathways. Moreover, Benzidine-induced EMT and ERK5 activation were completely suppressed by XMD8-92 and siRNAs specific to ERK5. Of note, ERK1/2 was activated in benzidine-treated T24 cells, while benzidine-induced EMT could not be reversed by U0126, an ERK1/2 inhibitor, as indicated by further study. Collectively, our findings revealed that ERK5-mediated EMT was critically involved in benzidine-correlated BC progression, indicating the therapeutic significance of ERK5 in benzidine-related BC.
In Jun Gyo;Lee Bum Soo;Youn Jae-Ho;Son Hwa;Kim Se Young;Yang Deok Chun
Korean Journal of Plant Resources
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v.18
no.3
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pp.441-449
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2005
Photo system II (PSII) is one of the two photosynthetic reaction centers in the chloroplast of higher plants. The chlorophyll a/b-light harvesting complex serves primarily as an antenna for PSII. We isolated a cDNA that encodes a chlorophyll a/b-binding protein (Cab) from Panax ginseng. The small subunit consists of 935 nucleotides long and has an open reading frame of 795 bp with the deduced amino acid of 265 residues (pI 5.63), 28.6 kDa. The deduced amino acid sequence matched to the previously reported Cab genes. Their degree of amino acid identity ranged from 68 to $92\%$. Phylogenetic analysis based on the amino acid residues was showed that the ginseng Cab gene was grouped with P. persica (AAC34983), A. thaliana (AAD28771), G. hirsutum (CAA38025), G. max (AAL29886), and V. radiate (AAF89205).
Juvenile polyposis is an uncommon condition characterized by the development of multiple juvenile polyps predominantly in the colon but also in the rest of the gastrointestinal tract. Patients with juvenile polyposis commonly present with rectal bleeding, diarrhea, abdominal pain, anemia, prolapse of the polyp. We experienced a juvenile polyposis in a 7 year-old male patient with protein losing enteropathy who was diagnosed by $^{99M}Tc$-human serum albumin abdominal scintigraphy, colonoscopy, and small bowel series. Proctocolectomy with ileostomy was performed and then protein losing enteropathy was resolved.
Background: Golgi phosphoprotein-3 (GOLPH3) is implicated in cancer development and progression. The aim of this study was to evaluate the prognostic significance of GOLPH3 protein and its association with tumor angiogenesis in patients with early-stage NSCLC. Materials and Methods: Immunohistochemistry was performed to determine GOLPH3 protein expression and allow assessment of intratumoral microvessel density (MVD) by counting CD-34 positive immunostained endothelial cells. Correlations of expression with MVD, clinicopathologic features and clinical prognosis were analyzed. Results: A notably higher level of GOLPH3 expression was found in early-stage NSCC tissues at the protein level. However, we do not find any correlation between GOLPH3 expression and clinicopathologic features (p>0.05), although higher MVD was positively associated with GOLPH3 overexpression (p<0.001). Expression of GOLPH3 was found to be an independent prognostic factor in early-stage NSCLC patients, those expressing high levels of GOLPH3 exhibiting a substantially lower 5-year overall survival than GOLPH3-negative patients (adjusted HR =1.899, 95% CI: 1.021-3.532, p=0.043). Conclusions: High expression of the GOLPH3 protein is common in early-stage NSCC, and is closely associated with tumor progression, increased tumor angiogenesis, and poor survival. We conclude a possibility of its use as a diagnostic and prognostic marker in early-stage NSCC patients.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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