Park Jong Seong;Nishimura Shoyo;Marumo Shingo;Katayama Masato
Korean Journal Plant Pathology
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v.2
no.2
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pp.82-88
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1986
Five antifungal substances were isolated from the long-term storaged extract of common purslane, and identified as isobutyric, butyric, isovaleric, valerie and caproic acids belonging to short-chain fatty acids (C4C6). Each of these fatty acids showed more or less antifungal potency against spore germination and mycelial growth of Alternaria alternata Japanese pear pathotype in vitro. Antifungal potency of each fatty acid against spore germination was greater than that against the mycelial growth. No one of these fatty acids completely inhibited the mycelial growth at concentration lower than 200 ppm, while 50 ppm of caproic acid and 200 ppm of valerie acid completely inhibited the spore germination. The results of bioassay also suggested that chain-length of the fatty acids might be related with the antifungal potency, since fatty acids with longer chain showed higher antifungal potency.
The effects of dietary ${\beta}$-glucan, obtained from bacterial fermentation, on the intestinal mass, short chain fatty acids, lactate production and pH in Sprague-Dawley (SD) rats were evaluated. SD rats fed with 0% (control group), 1% or 5% ${\beta}$-glucan supplemented diets (w/w) for 3 weeks. The presence of ${\beta}$-glucan in the diets resulted in a significant increase in colonic contents in a dose dependent manner. The amount of short chain fatty acids increased in rats fed ${\beta}$-glucan diets. Rats fed the 5% ${\beta}$-glucan diets had higher levels of acetate, propionate and butyrate by 1.8, 1.7 and 3.0 fold of the control group in the cecum, and 2.2, 2.9 and 3.1 fold of the control group in the colon, respectively. The ${\beta}$-glucan diets also significantly increased the levels of cecal and colonic lactate by 1.4~3.4 fold, when compared to the control diet, indicating that dietary ${\beta}$-glucan stimulated the growth of lactic acid bacteria within the intestine. These results suggest that dietary ${\beta}$-glucan, by providing short chain fatty acids and reducing the cecal and colonic pH, may be beneficial in improving gut health, and provide evidence for the use of ${\beta}$-glucan as a dietary supplement for human consumption.
Commercial food grade porcine-pancreatic lipase was incorporated into cheese at two different levels of concentration and ripened at $7^{\circ},\;13^{\circ}\;and\;21^{\circ}C$ Gas chromatographic analysis showed that the pancreatic lipase-treated cheese produced significantly higher levels of short-chain free fatty acids than controls. At $21^{\circ}C$ the high level of pancreatic lipase-treated cheese produced medium flavor cheese at 1 wk and close to sharp flavor cheese at 3 wk without causing distinctive defects. The low level of pancreatic lipase-treated cheese developed a number of good quality cheese. They were roughly equivalent to medium and sharp cheeses when ripened at $7^{\circ},\;13^{\circ}\;and\;21^{\circ}C$ for 3 to 15wk. Statistical analyses indicated that there were significant correlations between aged Cheddar flavor and the concentration of c6 as individual short chain free fatty acids (FFA) or C4 and C6 FFA combinations. Pancreatic lipase may be applicable for the accelerated ripening of Cheddar cheese if appropriate conditions are used.
The lipolytic yeast Candida aaseri SH14 contains three Acyl-CoA oxidases (ACOXs) which are encoded by the CaAOX2, CaAOX4, and CaAOX5 genes and catalyze the first reaction in the β-oxidation of fatty acids. Here, the respective functions of the three CaAOX isozymes were studied by growth analysis of mutant strains constructed by a combination of three CaAOX mutations in minimal medium containing fatty acid as the sole carbon source. Substrate specificity of the CaAOX isozymes was analyzed using recombinant C. aaseri SH14 strains overexpressing the respective genes. CaAOX2 isozyme showed substrate specificity toward short- and medium-chain fatty acids (C6-C12), while CaAOX5 isozyme preferred long-chain fatty acid longer than C12. CaAOX4 isozyme revealed a preference for a broad substrate spectrum from C6-C16. Although the substrate specificity of CaAOX2 and CaAOX5 covers medium- and long-chain fatty acids, these two isozymes were insufficient for complete β-oxidation of long-chain fatty acids, and therefore CaAOX4 was indispensable.
A simple and modified method is developed to determine a lipase activity. A linear relationship exists between the color intensity and the free fatty acid liberated by enzyme action. The range of determination is from 0.05 to $1.5\;{\mu}moles$ of long chain fatty acid (oleic acid) and 0.2 to $2.0\;{\mu}moles$ of short chain fatty acid (caproic acid). The cumbersome procedure of the removal of the upper aqueous phase which was required in the previous copper soap extraction method was eliminated by the movement of solvent phase to upper phase in the respective biphasic system with a mixture solvent (chloroform: n-hexane:ethanol = 49:49:2) and copper reagent saturated with sodium chloride.
Acyl carrier protein is related with fatty acid biosynthesis in which specific enzymes are involved. Especially, acyl carrier protein (ACP) is the key component in the growing of fatty acid chain. ACP is the small, very acidic protein that covalently binds various intermediates of fatty acyl chain. Acylation of ACP is mediated by holo-acyl carrier protein synthase (ACPS), which transfers the 4'PP-moiety of CoA to the 36th residue Ser of apo ACP. Acyl carrier protein P (ACPP) is one of ACPs from Helicobacter plyori. The NMR structure of ACPP consists of four helices, which were reported previously. Here we show how acylation of ACPP can affect the overall structure of ACPP and figured out the contact surface of ACPP to acyl chain attached during expression of ACPP in E. coli. Based on the chemical shift perturbation data, the acylation of ACCP seems to affect the conformation of the long loop connecting helix I and helix II as well as the second short loop connecting helix II and helix III. The significant chemical shift change of Ile 54 upon acylation supports the contact of acyl chain and the second loop.
The five short-chain fatty acids such as isobutyric(C-4), butyric(C-4), isovaleric(C-5), valeric(C-5) and caproic (C-6) acids obtained from the extract of common purslane showed wide antifungal spectra against spore germination and mycelial growth of the twenty five phytopathogenic fungi tested in vitro, although there were differences in antifungal potency among them. The antifungal potency of each fatty acid varied significantly against different fungi in spore germination and mycelial growth. The seventeen fungi used for spore germination test and the sixteen fungi used for mycelial growth test can be divided into three groups depending upon differences in minimal inhibitory concentration of each fatty acid for them, respectively. Caproic acid was significantly more toxic to germination than to mycelial growth of the test fungi, while the other four fatty acids did not show such a significant differences in toxicity with a few of exceptions as shown in valerie acid. The longer the chain-length of fatty acid was, the higher the antifungal potency was shown. The normal fatty acids such as butyric and valerie acid were more toxic than their isomers to spore germination and mycelial growth of the test fungi. Each fatty acid was more toxic to spore germination of obligate parasites and some of facultative parasites, and mycelial growth of facultative parasites than to spore germination and mycelial growth of saprophytes, respectively.
Acyl-CoA oxidases (ACOXs) play important roles in lipid metabolism, including peroxisomal fatty acid ${\beta}$-oxidation by the conversion of acyl-CoAs to 2-trans-enoyl-CoAs. The yeast Yarrowia lipolytica can utilize fatty acids as a carbon source and thus has extensive biotechnological applications. The crystal structure of ACOX3 from Y. lipolytica (YlACOX3) was determined at a resolution of $2.5{\AA}$. It contained two molecules per asymmetric unit, and the monomeric structure was folded into four domains; $N{\alpha}$, $N{\beta}$, $C{\alpha}1$, and $C{\alpha}2$ domains. The cofactor flavin adenine dinucleotide was bound in the dimer interface. The substrate-binding pocket was located near the cofactor, and formed at the interface between the $N{\alpha}$, $N{\beta}$, and $C{\alpha}1$ domains. Comparisons with other ACOX structures provided structural insights into how YlACOX has a substrate preference for short-chain acyl-CoA. In addition, the structure of YlACOX3 was compared with those of medium- and long-chain ACOXs, and the structural basis for their differences in substrate specificity was discussed.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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