This experiment was conducted to propagate Zantedeschia spp. in vitro. The frequency of adventitious bud clusters (ABC) formation from shoot tips in Z. 'Best Gold' was high at more than 65% on media with 2.0∼5.0 mg/L BA or 0.1∼1.0 mg/L thidiazuron. The highest formation rate of ABC (75%) was obtained on medium containing 2.0 mg/L BA. Comparing to treatment of BA alone, combined one of BA and NAA did not stimulate the formation of ABC and the shoot regeneration from shoot tips. The proliferation of ABC from sections (0.7∼1.0 cm) of ABC occurred effective on medium with 2.0 mg/L BA. Shoots developed from the sections (0.7∼1.0 cm) of ABC grew and rooted favorably on media containing 1.0∼2,0 mg/L IBA. The shoots were multiplicated effectively on medium with 0.5 mg/L thidiazuron in Z. 'Childsiana', on medium with 3.0 mg/L BA in 2. 'Golden Affair', and on medium with 5.0∼10.0 mg/L BA in Z. 'Pacific Pink'.
We investigated the anatomical aspects of vitrification in peace poplar. Comparisons were made with regard to characteristics occurring between hyperhydric and normal shoots in shoot proliferation cultures on MS medium containing 0.2 mg/L BA. Compared with normal plants, hyperhydric plants had thick, curled, and dark green leaves. Hyperhydric stems were thicker and shorter than those of normal stems. When examined under the microscopes, the mesophyll palisade cells of hyperhydric leaves were vacuolated, whereas those of normal leaves contained normal and enriched vacuole with cytoplasm. Generally, the hyperhydric leaves showed poorly developed palisade parenchyma, and revealed irregular and bigger sized intercellular structures in both palisade and spongy parenchyma as well as epidermis cells compare to those of normal leaves. In addition, the hyperhydric leaves had lower stomatal density and bigger sized cell. Vascular tissues of hyperhydic stems were less differentiated because of poorly lignified xylem tissue. The greatly expanded cortical cells and pith appeared to be the main cause of thick stems as compared with normal stems.
Experiments were conducted to find out the optimum condition for in vitro proliferation using shoot tip of Gypsophila paniculata. Formation and fresh weight of adventitious shoots were promoted by shoot culture with $0.2mg{\cdot}L^{-1}$ BA and $0.2mg{\cdot}L^{-1}$ NAA in 'Bristol Fairy', while were promoted with $0.2mg{\cdot}L^{-1}$ BA and $0.1mg{\cdot}L^{-1}$ NAA in 'Red Sea'. Vitrification was suppressed by using $7{\times}13cm $$(diameter{\times}height)$ vessel. Aeration treatment on cap and agar concentration did not affect vitrification, but promoted the elongation of adventitious shoots. Formation of adventitious shoot was inhibited by increasing agar concentration in the medium.
An efficient in vitro protocol has been established for somatic embryogenesis and plantlet conversion of Korean wild ginseng (Panax ginseng Meyer). Wild-type and mutant adventitious roots derived from the ginseng produced calluses on Murashige and Skoog (MS) medium supplemented with 0.5 mg/L 2,4-dichlorophenoxyacetic acid and 0.3 mg/L kinetin; 53.3% of the explants formed callus. Embryogenic callus proliferation and somatic embryo induction occurred on MS medium containing 0.5 mg/L 2,4-dichlorophenoxyacetic acid. The induced somatic embryos further developed to maturity on MS medium with 5 mg/L gibberellic acid, and 85% of them germinated. The germinated embryos were developed to shoots and elongated on MS medium with 5 mg/L gibberellic acid. The shoots developed into plants with well-developed taproots on one-third strength Schenk and Hildebrandt basal medium supplemented with 0.25 mg/L 1-naphthaleneacetic acid. When the plants were transferred to soil, about 30% of the regenerated plants developed into normal plants.
Iris koreana (Iridaceae) is an endangered plant native to Korea. In order to develop an in vitro propagation method, we investigated the effect of 2,4-dichlorophenoxy acetic acid (2,4-D) and a-naphthalene acetic acid (NAA) on callus induction in different I. koreana tissues. In addition, we also investigated the effect of 2,4-D and Benzyl aminopurine (BA) treatments on adventitious shoot induction in viable calli and the effect of indole-3-butyric acid (IBA) on root formation in viable shoots. We found that callus production was highest with 1.0 mg/L NAA (94.4% cultured rhizome explants), and adding low concentrations of 2,4-D to BA containing media significantly increased the frequency of shoot primordial formation. The best rooting results were obtained with 1.0 mg/L IBA, on which 98% of regenerated shoots developed roots and produced an average of 7.4 roots within 45 days. This in vitro propagation protocol will be useful for conservation, as well as for mass propagation.
In order to develop an efficient micropropagation technique for an endangered species, Stellera rosea N., stem node cultures were conducted on MS medium supplemented with cytokinins. Generally, BA was better than zeatin on shoot proliferation from stem nodes, whereas zeatin showed more effective on shoot elongation. In vitro rooting of shoots was achieved by application of an auxin pre-culturing method. Overall rooting rate was relatively low and differed depending on the culture period. Pre-culturing of shoots for 15 days at 1.0mg/L IBA revealed a slightly better rooting efficiency reaching 30% rooting rate than NAA. Root induction rate by NAA also varied with concentration of NAA and culture periods. Total 51% of the rooted plantlets survived on artificial soil mixture and grew normally without any distinct morphological variation. The results suggest that the endangered Stetllera plants are propagated via in vitro culture system, but still need to more study for the improvement of rooting and acclimatization of the plantlets in soil.
Kim, Hwa Young;Kang, Sun Pil;Hong, Sae Jin;Eum, Hyang Lan
Journal of Bio-Environment Control
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v.24
no.3
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pp.167-172
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2015
The aim of this study was to develop an effective production system of blueberry plants by using tissue culture technique. Murashige and skoog medium (MS) and woody plant medium (WPM) were compared for shoot formation of highbush blueberries. Also medium supplemented with zeatin/2-isopentenyl adenine (2iP)/benzyl aminopurine (BA) (1, 2/10, 15/4, $6mg{\cdot}L^{-1}$)and zeatin/2iP/BA (0.5/10, 15/$0.05mg{\cdot}L^{-1}$) as plant growth regulators to determine the effect of shoot formation and shoot proliferation, respectively. The shoot explants cultured on WPM showed higher shoot formation rates, more number of nodes, and longer root length than those on MS medium during the primary culture. Shoots were not formed when the explants were cultured on the medium without plant growth regulators or on only BA. The shoot explants cultured on the medium supplemented with 2iP showed low rates of shoot formation. On the other hand, zeatin was the most effective for shoot formation and growth of the explants. Also influence of different cytokinins (zeatin, 2iP) on the shoot proliferation of subcultured shoot explants was studied. There was no significant difference among the different concentrations of zeatin in the rate of shoot formation and number of shoots. However at higher concentration of zeatin, number of nodes was increased, and shoot length was shorted. The proper concentrations of zeatin for shoot propagation in subculture were found to be $0.5mg{\cdot}L^{-1}$ and $1mg{\cdot}L^{-1}$.
Martin, Kottackal Poulose;Zhang, Chun-Lai;Hembrom, Manoj Emanuel;Slater, Adrian;Madassery, Joseph
Plant Biotechnology Reports
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v.2
no.2
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pp.163-169
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2008
Roots of Ophiorrhiza prostrata D. Don serve as a rich source of camptothecin (CPT), an anticancer drug. Because of the large-scale collection of its roots, the plant has become a threatened species. The present study accomplishes the induction of adventitious roots as a means for the production of CPT as well as for the large-scale propagation of this anticancer drug plant using leaf and internode explants. The biomass yield and CPT content of adventitious roots induced from different explants were compared to roots developed on ex vitro rooted stem cuttings. Adventitious roots were produced on half-strength Murashige and Skoog (MS) medium supplemented with $10.74{\mu}M$${\alpha}-naphthaleneacetic$ acid and $2.32{\mu}M$ kinetin at mean fresh weights of 0.753, 0.739 and 0.748 g roots from leaf, internode and shoot, respectively. CPT yield from in vitro derived roots after 50, 80 and 120 days of incubation (0.028, 0.06 and 0.1% dry weight, respectively) was not significantly different from those harvested at the same age from ex vitro rooted (0.03, 0.06 and 0.13%, respectively) stem cuttings. CPT from subcultured roots derived from solid (0.08%) medium was lower than from suspension culture medium (0.12%). Subsequent cultures of the adventitious roots showed a stable production of CPT (0.16%). The yield of CPT from 360-day-old plant-derived roots was 0.19%. Elicitation using methyl jasmonate and acetyl salicylic acid exhibited no enhancement in CPT yield. In vitro propagation through direct shoot regeneration was achieved from the adventitious roots upon transfer to MS medium with $8.87{\mu}M$$N^6-benzyladenine$ (BA) and $2.46{\mu}M$ indole-3-butyric acid (IBA) with a mean of 21.2 shoots per culture in 50 days. The shoots upon subculture on medium having the same level of BA and IBA underwent rapid proliferation. The shoots transferred to field conditions after in vitro rooting exhibited 95% survival. Adventitious root induction, from leaf and internode explants, enables the feasible production of CPT as well as the large-scale rapid propagation of this species which can safeguard it from extinction.
In order to investigate the effect of plant growth regulators on effective in vitro micropropagation, apical meristems of Pulsatilla cernua var. koreana were cultured on Murashige and Skoog's (MS) medium with 2,4-D, NAA, TDZ and BA. Media containing 2,4-D and kinetin, 2,4-D and TDZ, NAA and TDZ were not effective on callus induction. However, embryogenic or organogenic callus was obtained on media containing NAA and BA. Especially, on MS medium with 0.5mg/L NAA and 1.0mg/L BA was optimal for a high frequency (62%) of shoot or shoot bud obtained from callus. Callus proliferation, shoot multiplication and elongation were significantly increased by adding 10% coconut water on MS media with 0.5mg/L NAA and 1.0mg/L BA. Repeated subculturing of in vitro grown shoots resulted in propagation rate of 12.9 shoots per explant every 30 days. Root formation from the adventitious shoots was not easily achieved. However, roots were only produced through callus on MS medium with 2.0mg/L NAA alone or 0.5mg/L NAA and 1.0mg/L BA. These roots were used materials for callus and shoot production repetitively.
This experiment was designed to improve the in vitro production system of apple rootstock M.26 as being influenced by the growth regulators, TDZ, BA, IAA, IBA, zeatin, and GA$_3$. Different levels of potassium humate (KH), known as cytokinin and auxin-like substance, were also supplemented to the MS basal medium along with IBA 0.6 mg/L to find out it effect on root formation in apple rootstock M.26. ID initiate and establish the in vitro multiplication of shoots byway of meristem culture, MS medium added with zeatin 1.0 mg/L was found to be the most suitable, showing the 100% of survival rate of shoot tips. A combination of thidiazuron (TDZ) 0.2 mg/L and NAA 0.5 mg/L promoted the shoot proliferation when shoot tips were used as explants. MS basal medium plus IBA 0.6 mg/L was very effective for root induction, but an addition of potassium humate (250 mg/L) to the medium containing IBA 0.6 mg/L stimulated the induction and proliferation of the rook by far the better.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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