Kim Chang-Kil;Oh Jung-Youl;Jee Sun-Ok;Chung Jae-Dong
Journal of Plant Biotechnology
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v.5
no.2
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pp.115-119
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2003
To determine the appropriate concentrations of nutrients and growth regulators for shoot proliferation and root initiation, several rose hybrid tea cultivars were cultured. Cultured shoot tips and lateral buds from different cultivars proliferated multiple shoots on Murashige and Skoog (MS) medium supplemented with 0 to 4 mg/L BA and 0 to 0.05 mg/L NAA. The ability of the explants to proliferate shoots and initiate roots was affected by genotype, the nodal position of explant, the strength of MS basal medium and growth regulators used. The buds nearest the apex exhibited the slowest rate of development. Most cultivars had the highest shoot proliferation when cultured on MS medium with 2 mg/L BA and 0.01 mg/L NAA, but the degree varied by cultivars. Root development was enhanced by lowering the concentration of MS salts.
This experiment was conducted to propagate Zantedeschia spp. in vitro. The frequency of adventitious bud clusters (ABC) formation from shoot tips in Z. 'Best Gold' was high at more than 65% on media with 2.0∼5.0 mg/L BA or 0.1∼1.0 mg/L thidiazuron. The highest formation rate of ABC (75%) was obtained on medium containing 2.0 mg/L BA. Comparing to treatment of BA alone, combined one of BA and NAA did not stimulate the formation of ABC and the shoot regeneration from shoot tips. The proliferation of ABC from sections (0.7∼1.0 cm) of ABC occurred effective on medium with 2.0 mg/L BA. Shoots developed from the sections (0.7∼1.0 cm) of ABC grew and rooted favorably on media containing 1.0∼2,0 mg/L IBA. The shoots were multiplicated effectively on medium with 0.5 mg/L thidiazuron in Z. 'Childsiana', on medium with 3.0 mg/L BA in 2. 'Golden Affair', and on medium with 5.0∼10.0 mg/L BA in Z. 'Pacific Pink'.
A method for induction of multiple shoots using cotyledonary nodes and shoot tips of Macrotyloma uniflorum (Lam.) Verdc. was described. The experiment was conducted in which shoot induction was noticed on Murashige and Skoog (MS) medium supplemented with different concentrations and combinations of four cytokinins (KIN, 2iP, Ads, BAP). These multiple shoots were later developed into normal shoots. The highest rate of shoot proliferation came from MS medium added with BAP 1.5 mg/L. The multiple shoot buds were subcultured into MS medium with BAP (0.5-1.5 mg/L) along with Ads (1.0 mg/L) and GA$_3$ (0.5 mg/L), which gave rise to the highest frequency of shoot proliferation and elongation. The shoots were rooted on MS medium supplemented with 1.75 mg/L IBA.
To investigate the effect of media and growth regulators in micropropagation of persimmon (Diospyros kaki Thunb.), dormant axillary buds taken from trees of persimmon cultivars such as Ichikikeijiro, Tonawase and Hiratenenashi were used. Shoot tips were successfully cultured in full or half of nitrogen strength of MS medium. The most effective cytokinins for shoot proliferation and elongation of persimmon cv. Ichikikeijiro were 5 mg/L and 2 mg/L zeatin, respectively. Shoots were successfully rooted in 1/2N-MS medium with 1 mg/L IBA.
This experiment was designed to improve the in vitro production system of apple rootstock M.26 as being influenced by the growth regulators, TDZ, BA, IAA, IBA, zeatin, and GA$_3$. Different levels of potassium humate (KH), known as cytokinin and auxin-like substance, were also supplemented to the MS basal medium along with IBA 0.6 mg/L to find out it effect on root formation in apple rootstock M.26. ID initiate and establish the in vitro multiplication of shoots byway of meristem culture, MS medium added with zeatin 1.0 mg/L was found to be the most suitable, showing the 100% of survival rate of shoot tips. A combination of thidiazuron (TDZ) 0.2 mg/L and NAA 0.5 mg/L promoted the shoot proliferation when shoot tips were used as explants. MS basal medium plus IBA 0.6 mg/L was very effective for root induction, but an addition of potassium humate (250 mg/L) to the medium containing IBA 0.6 mg/L stimulated the induction and proliferation of the rook by far the better.
This experiment was carried out to establish micropropagation system in Fritillaria thunbergii Miq. Through the culture of bulblet scales, stems, node-buds and shoot tips with special reference to the effect of physiological age of explant and plant growth regulators on bulblet formation. Number of formed bulblets was significantly increased in node-bud or stem tissue compared to scals segments and on the medium supplemented with kinetin than BA containing medium. Optimum levels of kinetin for bulblet formation from node-bud taken from above 3 cm shoot length and stem segments excised from below 3 cm shoot length were 5.0 mg /L and $1.0{\sim}3.0\;mg$ /L kinetin, respectively. Interesting phenomenon was observed, the direct formation of bulblets from the axilliary bud of cultured explants. Bulblet forming capacity in stem tissue was depended on stem age, young stem had high regeneration ability compared to old stem taken from above 10 cm shoot length. 1.0 mg /L kinetin was optimum concentration for the formation of bulblets from old stem segments. Stem tissue taken from underground growing plant was promoted coampare to shoot tips or bulb scale segments. Optimum concentration of sucrose was $5{\sim}7%$. Summariged above results revealed that effective explant for micropropagation was stem and /or node-bud tissue excised from less than 3 cm plant height compared to those of bulb scale segments which showed high contamination after culture. Maximum multiplication rate of young stem and /or node-bud segment was about 20 times. Kinetin requirement for stimulation of bulblet formation from cultured explant depended on source of explants but favorable levels of kinetin for organogenesis ranged from 1.0 mg /L to 5.0 mg /L.
Development of efficient plant regeneration and genetic transformation protocols (using the Particle Inflow micro-projectile Gun and the shoot-tips as target tissue) of Sorghum bicolor (L.) Moench in terms of expression of the reporter gene, $\beta$-glucuronidase(uidA) is reported here. Two Indian cultivars of sorghum were used in the study, viz. M-35-1 and CSV-15. Plant regeneration was achieved from one-week-old seedling shoot-tip explants via multiple-shoot-clumps and also somatic embryos. The multiple-shoot-clumps were produced on MS medium containing BA (0.5, 1.0 or 2.0 mg/$L^{-1}$), with biweekly subculture. Somatic embryos were directly produced on the enlarged dome shaped expansive structures that developed from shoot-tip explants (without any callus formation) when cultured on MS medium supplemented both with BA (0.5, 1.0 or 2.0 mg/$L^{-1}$) and 2,4-D (0.5 mg/$L^{-1}$). Whereas each multiple-shoot-clump was capable of regenerating more than 80 shoots via an intensive differentiation of both axillary and adventitious shoot buds, the somatic embryos were capable of 90% germination, plant conversion and regeneration. The regenerated shoots could be efficiently rooted on MS medium containing 1.0mg/$L^{-1}$ IBA and successfully transplanted to the glasshouse and grown to maturity with a survival rate of 92%. The plant regeneration efficiency of both the genotypes were similar. After the micro-projectile bombardment, expression of uidA gene was determined by scoring blue transformed cell sectors in the bombarded tissue by an in situ enzyme assay. The optimal conditions comprising a helium pressure of 2200 K Pa, the target distance of 11 cm with helium inlet fully opened and the use of osmoticum have been defined to aid our future strategies of genetic engineering in sorghum with genes for tolerance to biotic and abiotic stresses.
This study was carried out to investigate the effect of thidiazuron(TDZ) on callus and shoot primordia formation, to determine the most optimum multiple shoot induction medium, and to obtain the plantlets on solid medium via shoot organogenesis. TDZ 0.01 mg/L in MS medium was most effective on callus formation, and BA 0.1 mg/L was most effective on shoot growth, while TDZ 0.01 mg/L was most effective on callus formation. TDZ 0.001 mg/L was most effective in shoot primordia formation. Shoot tips were cultured with TDZ 0.01 mg/L for 8 weeks and induced callus was transferred to regeneration medium containing TDZ 0.001 mg/L. After 4 weeks induced shoot primordia were resubcultured at growth regulator-free medium for 4 weeks. The induced multiple shoots rooted more efficiently at NAA 1.0, 5.0 mg/L, or IBA 5.0 mg/L.
Shoot tips with 2 leaf primordia were cultured to induce shoot primordia in MS liquid medium supplemented with several concentrations of BA and hIAA under the conditions of 10,000 lux illuminations for 24 h and of vertical shaking of 2 rpm in carrot. Two F$_1$ hybrids and two male sterility lines were used. Shoot primordia were only induced in the medium supplemented with 2.0 mg/L of BA and 0.2 mg/L of NAA. Genotypic specificity and seasonal effect of donor parents on shoot primordia induction were not observed and average 15-20% of the planted dornes developed to shoot primordia. The induced shoot primordia were successfully propagated by subculture in the same medium. However, they were grown into three different types during multiplication, that is, the type with multiple small shoots on the surface, the type of without any shoot, and the type of callus. Shoot primordia clusters with small shoots on the surface differentiated multiple shoots successfully in 1/2 MS solid medium supplemented with 0.2 to 1.0 mg/L of IAA and 0.2 to 1.0 mg/L of kinetin. New shoot primordia with small shoots were well formed when pieces bigger than 2 mm in diameter of the out layer of the shoot primordia cluster with small shoots were subcultured. No differences of multiplication and shooting ability and chromosomal variation of shoot primordia were observed until the 13th sub-culture.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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