Cigarette butts from 5 smokers were gathered and then, placed in room temperature for 1, 3, 5, 7, 15 days. The possible use of the cigarette butts for individual identification was evaluated in sex determination, amplification of D1S80 locus, polymorphisms of HLA-DQA1 gene from the extracted DNA. 1. DNA extraction was possible in cigarette butts weree left in room temperature for 15days, so it can be applicatable to individual identification by polymerase chain reaction(PCR). 2. Amplification of X-Y homologous amelogenin gene by PCR made it possible to identify the sex in saliva stains (cigarette butts). 3. Amplification of D1S80 locus can be acquired from adding the boving serum albumin and hot start PCR procedures from forensic samples such as saliva stains (cigarette butts), so the AMP-FLPs examining is possible. 4. Genotype could be determined simply and rapidly using Amplitype$TM$ HLA-DQ$\alpha$ forensic kit in examining the HLA-DQA1 gene. From the investigation, DNA extraction, sex determination, amplification of D1S80 locus, polymorphisms of HLA-DQA1 gene was successfully done even though the cigarette butts were left for 15 days at room temperature. Therefore cigarette butts are highly reliable and applicatable as molecular biologic samples for individual identification.
Sex determination in genomic DNA from human blood leucocytes was performed by amplification of human Y chromosome-specific DNA sequences using PCR technique. A clear DNA fragment(154 nucleotides long) was appeared only in the male genomic DNA, but no specific band was observed in the case of female genomic DNA and negative control. To know the sensitivity of this method, the amplification reaction was performed in genomic DNA diluted to 2pg equivalent to the amonut present in the single human cell, and clear band also observed. The PCR amplification was so succesfully performed in the single leucocyte separated from human blood using micromanipulator that this techniqe is assumed to be applied to single blstomere before embryo transfer.
Environmental sex determination by temperature was revealed in different genotypes (putative XX : XY=1 : 1, 1 : 0, 0 : 1) of nile tilapia (Oreochromis nitoticus). There was no significant deviation from expected sex ratio in control group treated with $27^{\circ}C$, while the temperature regimes of $33^{\circ}C$ and $36^{\circ}C$ during labile period induced the differentiation of phenotypic sex into female with a clear trend forward percent female with increasing temperature. The administration of 240 and/or 480 mg estradiol-$17{\beta}$ ($E_2$)/kg diet also showed the additional effect to derive the phenotypic sex to female in putative XX : XY=1 : 1 and 0 : 1 progeny groups.
This study was performed 1) to establish the optimal PCR condition of sex determination in Hanwoo IVM/IVF embryos, 2) to examine the sex determination and sex ratio to the developmental stages of Hanwoo IVM/IVF embryos by two-step PCR method. The sexing of bovine IVF embryos were accurately determined by PCR methods using Y chromosome specific DNA primer(BOV 97M, 141bp) and bovine specific DNA primer(216bp). The fregment size were shown at 141 and 216 base pairs(bp) in male, and 216 bp in female. Two-steps PCR method in which the samples were amplified by 15 cycles with Y chromosome specific DNA primer and then amplified by additional 30 cycles with bovine specific DNA primer was effective in the sexing of bovine IVF embryos. The zona-free embryos were more effective than zona-intact embryos in bovine IVF embryo sexing. The appearance of Y chromosome specific band was 45.2% in embryos treated with protease K and 53.3% in embryos treated with freezing and thawing repeatedly. The optimun volume of DNA for sexing of Hanwoo IVF embryos were 2 to 10 $\mu$1 in Zona-free embryos and 12 to 13 $\mu$1 in zona-intact embryos. The sexing rate of bovine IVF embryos by PCR was 96.0% and questionable rate not identified sex was 4.0%, respectively. Among the sexed embryos, the percentage of male and female was 49.7% and 46.3%, respectively, the sex ratio was 1: 1.1. The successful rate of embryo sexing was increased to the developmental stages.
Sex of the Nile tilapia Oreochromis niloticus is mainly determined by an XX/XY system. However, accumulating evidences suggest the existence of additional sex modifying factors including environmental, autosomal and parental influences. In order to investigate the possibility of parental effects on sex ratios of tilapia progenies, in this study, a series of crosses was carried out using gynogenetic clonal fish, neomales, normal males and females, and YY fish. Crosses between clonal XX male and clonal female have yielded only female progenies and no parental influences were observed. However, in the crosses between clonal males and normal females, female parents were significantly associated with the progeny sex ratios ($X^2$=20.046, 7 d.f., p<0.01). Progeny sex ratios from the crosses between neomales and normal females ($X^2$=60.491, 5 d.f and $X^2$=28.072, 2 d.f.) also showed significant association with female parents (P<0.001). The stability of progeny sex ratios from repeated spawns were confirmed by using 6 different parental pairs. In 16 crosses between normal males and normal females, sex ratios of progenies showed clear maternal influences, and further analysis of the results revealed a negative correlation ($r^2$=0.7718, p<0.05) between the sex ratios of progenies from two different males, indicating a strong paternal influence. No statistically significant relationship between survival rates and sex ratios of progenies was observed in any genotypic groups. Taken together, the influence of parental pairs on progeny sex ratios in this species is evident although the cause of this influence is not clear.
Avian sex determination system involves the male ZZ and female ZW chromosomes. However, very few studies are reported the expression, functional role and importance of genes on the W chromosome because of its small and highly heterochromatic genomic regions. Recent studies demonstrated that the W chromosome may have critical roles in physiology, sex determination and subsequent sexual differentiation in chickens. Therefore, gene annotation, including describing the expression and function of genes in the chicken W chromosome, is needed. In this study, we have searched the W chromosome of chickens and selected a total of 36 genes to evaluated their specific expression in the testis and ovary at various developmental stages such as embryonic day 6 (E6), hatch and adult. Interestingly, out of 36 genes in chicken W chromosome, we have found seven female-specific expression at E6.5 day, indicating that they are functionally related to female chicken gonadal differentiation. In addition, we have identified the stage specific gene expression from the sex specific genes. Furthermore, we analyzed the relative location of genes in the chicken W chromosome. Collectively, these results will contribute molecular insights into the sexual determination, differentiation and female development based on the W chromosome.
Maize (Zea mays L.) is a monoecious plant, which separates male (tassel) and female (ear) floret that evolved into increasing heterogeneity. In each floret, male or female, bears both one pistil and three stamens primodia before diverged to unisexual state. When diverged to tassel, pistil cell death occurs in the pistil primodium, which is mediated by TASSELSEED genes. In contrast, cell protection occurs in the ear pistil from TASSELSEED-mediated cell death, which is mediated by SILKLESS1 gene. On the other hand, cell cycle arrest occurred for a long time in the ear stamens and then the stamens eventually dye. The cell cycle regulating genes such as CYCLIN B and WEE1 are involved in this process. Furthermore, the temporal and spatial regulation of gibberellin biosynthesis may cause cell cycle block in arresting stamen cells. This review describes the cell death, cell protection, and cell cycle arrest mechanism during maize sex determination process at the molecular, cellular and developmental biology, and genetic levels.
Journal of Practical Agriculture & Fisheries Research
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v.24
no.1
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pp.23-28
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2022
The centipede is predatory arthropod that form head and numerous segments. It is known that there are about 3,000 species worldwide and 44 species (four species and seven families) in Korea. Among them, Scolopendra subspinipes called "Wang-ji-ne" has been known as an important medicinal resource and its value is expected to increase in the future. In this study, the Scolopendra subspinipes in Korea was classified as Chilopoda through morphological analysis of forcipule and venom gland, and a method for sex determination was established. These results are expected to be used as basic data for artificial breeding of Scolopendra subspinipes in the future, and through this, it is expected that it will greatly contribute to the expansion of the Scolopendra subspinipes market as medicinal resources.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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v.8
no.2
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pp.161-167
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2004
Silkworms sex determination drew high attention from researchers. Sex chromosomes on the silkworm are of ZW type for females and ZZ type for males. Chromosome W plays an important role in sex determination. Although several molecular linkage maps have been constructed for silkworm, very few markers are discovered on the W chromosome. In order to look for molecular markers and to further locate the Fern gene on chromosome W, we used genomic DNA from both female and male larvae of a silkworm strain named 937 as PCR templates for RAPD amplification with 200 arbitrary 10-mer primers. The amplification results showed three female-specific bands, namely ${OPG-07_496}, {OPC-15_1,660} and {OPE-18_1,279}$. Further verification, however, revealed no band from OPG-07 and OPC-15 in either sex in the strain 798, but OPE-18 provided female-specific band in the strains Suluan7 and C108, and absent in both males and strain 798. This indicates that the bands from ${OPG-07_496} and {OPC-15_1,660}$ are probably female-specific in strain 937, and the band from OPE-18 was probably amplified from a common segment shared by most strains. The genomic DNAs from OPG-07 and OPC-15 were cloned and sequenced. Sequence analysis showed that the DNAs from OPG-07 and OPC-15 have high identities with the retrotransposable elements, and DNA from OPC-15 contains a portion of sequence which probably encodes an eukaryotic translation initiation factor 4E binding protein (eIF4EBP).
Using sexual differences between female and male as the indication of the degree of the physiological distrubance in the sex-limited larval marking strains or sex-limited egg colour strains, it was investigated whether the physiological distrubance caused y the translocated autosome fragment on the W-sex determination chromosome, have an effect on expression of the three quantitative characters; cocoon weight, cocoon shell weight, and cocoon shell percentage in the female silkworm. The mean values of the ratios of female to male the above two experimental groups were 127%, 107%, 85%, in cocoon shell weight, and cocoon shell percentage, respectively. On the other hand, those from the three normal stains, namely the basic stock strains, white egg strains, and hybrids were 129% for cocoon weight, 110% for cocoon shell weight, and 85% for cocoon shell percentage, respectively. From the results, it comes to the conclusion that the translocated autosome fragment on the W-chromosome has no influences on the expression of the quantitative characters of the female silkworm because sexual differences of the sex-limited strains were very similar to those of the three normal strains.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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