목 적 : 소아에서 급성 위장관염을 일으키는 흔한 감염성 원인을 알아보고자 세균, 바이러스, 원충을 비교 분석하였으며, 원인체의 유무에 따라 임상양상 중증도의 차이를 연구하고자 하였다. 방 법 : 2006년 1월부터 2006년 12월까지 급성 위장 관염의 증상으로 연세대학교 원주기독병원 소아과에 입원한 15세 미만의 환아를 대상으로 하였으며, 271명의 환아에서 검체를 분석하였으며, 환아의 임상증상을 기록 하였고, Clark 점수를 통해 중증도를 분석하였다. 결 과 : 총 271명의 환아 중 137명(50.5%)에서 바이러스나 세균, 원충이 검출되었다. 바이러스는 86명(31.7%)에서 보고되었으며 rotavirus가 56명(20.6%)에서 보고되어 가장 호발하는 바이러스로 조사되었다. Norovirus는 29명(10.7%), E. coli는 35명(12.9%)에서 보고 되었다. Rotavirus에 의한 위장관염시에 구토, 설사가 빈번한 것으로 나타났다. 그러나 rotavirus를 포함한 바이러스, 세균, 원충의 양성을 보인 환아에서 Clark score는 음성을 보인 환아군과 큰 차이를 보이지 않았다. 결 론 : 소아 위장관염에서 rotavirus가 가장 흔한 바이러스로 나타났으며, 구토, 설사를 흔하게 동반한다. 그러나 rotavirus를 포함한 바이러스나 세균의 양성 여부에 따른 Clark 점수에서는 큰 차이가 없었다. 따라서 보다 객관적인 연구를 위해서는 외래환자를 포함한 대규모의 연구 및 항생제 사용 여부에 대한 고찰이 필요할 것으로 사료된다.
모유의 뮤신 복합체는 rotavirus에 특이적으로 결합하여 항 바이러스활동을 보여주는 것으로 나타났다. 자연 상태에서의 뮤신은 몇몇 작은 분자들과 복합적으로 연합되어 있는데 70kda의 glycoprotein, butyrophilin, 그리고 glycosylated component, lactadherin을 포함하고 있다. 그중 rotavirus에 가장 높은 결합력과 항바이러스 활동을 나타내는 Lactadherin은 모유의 유단백질의 하나인 뮤신과 결합되어 분비되는 당단백질의 하나로 분자량이 46kda이고, 지방구막 속에 연합되어있다. 이러한 배경에서 본 연구에서는 한국 여성의 breast tissue로부터 lactadherin 유전자의 cloning 및 in vitro에서의 발현을 유도하여 lactadherin band만을 purify하였고 여기서 얻은 lactadherin을 항체 생산을 위한 항원으로 사용하여 anti-lactadherin antibody를 확보하였다. 이 항체는 human milk에서의 lactadherin을 동정하는데 사용하였는데 western blot결과 lactadherin을 포함하여 몇 몇 단백질들이 확인되었다. Human milk내 mucin은 몇몇 작은 분자들과 복합체를 형성하는 것으로 확인되어졌는데 70kda의 glycoprotein, butyrophilin 그리고 46kda의 glyxosylated component, lactadherin을 포함하고 있는 milk mucin은 associated molecular임을 확인할 수 있었다.
본 연구는 kefir로부터 EPS를 분리하여 MA104 세포에 대한 독성과 rotavirus에 대한 저해효과를 확인하기 위하여 수행하였다. Kefir culture 및 grain 파쇄입자에서 Lactobacillus fermentum, Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus brevis 등의 유산균과 Candida kefyr, Cryptococcus albidus, Pichia ohmeri 등의 효모가 분리 동정되었다. EPS의 1% 농도에서, MTT assay에 의한 EPS의 rotavirus에 대한 억제효과는 human rotavirus(KU)가 $72.52{\pm}6.48%$, bovine rotavirus(NCDV)가 $36.06{\pm}7.63%$, porcine rotavirus(OSU)가 $81.66{\pm}1.11%$로 나타났으며, EPS의 1/128% 농도에서, human rotavirus(KU)가 $24.98{\pm}4.58%$, bovine rotavirus(NCDV)가 $4.71{\pm}6.16%$, porcine rotavirus(OSU)가 $4.05{\pm}14.90%$로 나타났다. Kefir에서 분리한 EPS는 다양한 혈청형과 유래 동물의 rotavirus 모두에게 억제 효과가 있는 것으로 확인되었다.
Rotavirus는 유아나 어린아이들에게 가장 일반적으로 나타나는 심한 위장염의 원인자이며 설사로 인한 심한 탈수 증세를 일으켜 급속히 성장하는 유아의 균형적인 영양 공급을 방해함으로써 유아들의 발육과 성장 그리고 심하면 생명에 커다란 영향을 미치게 된다. 한편 모유로 키운 유아들은 설사병의 낮은 발병율과 연관이 있었다. 특히 모유의 뮤신 복합체는 rotavirus에 특이적으로 결합하여 항 바이러스활동을 보여주는 것으로 나타났다. 이러한 배경에서 본 연구는 human breast tissue로부터 lactadherin의 cloning 및 sequence 분석을 통하여 유전자의 다양성을 조사하기로 하였다. 한국 여성 9명의 유두 근처 조직에서 lactadherin을 cloning하여 그 sequence를 보고 된 서양여성의 염기서열과 비교 분석결과 여러 곳에서 single nucleotide variation이 발견되었고 본 연구에서 클론한 lactadherin(31bp-1518bp)의 염기서열과 보고된 서양여성 lactadherin gene의 SNP와 비교하였을 때 8개의 SNP중 3부분만이 일치한다는 것을 확인하였다. 또한 같은 조직중 정상 조직과 암 조직 부분에서 각각 lactadherin을 클론하여 염기서열을 비교 분석하였는데 정상 조직에서 2곳의 silent mutation있었고 암조직에서 2곳의 mutation과 1곳의 silent mutation을 발견하였으며 전체 적으로 정상조직과 암 조직 부분에서 lactadherin을 clone하여 염기서열을 분석해본 결과 암조직일수록 유전자의 변이 비율이 높다는 것을 알 수 있었다. 그리고 동일한 염기서열 상에서 많은 변이가 일어났는데 286dp(A->C), 1418dp(G->C)은 mutation이었고 327dp (A->G), 454(C->T)은 silent mutation이었다. 그 외 DNA상에서 여러 부근에 변이가 존재하였는데 이 결과로 보아 coding region에 위치한 cSNP 중 amino acid 변화를 일으켜 protein structure 또는 function에 영향을 줄 수 있는 non-synonymous cSNP 일 것으로 예상되어지며 natural selection의 영향을 받고 있음을 암시하고 있다. 본 연구에서 관찰되어진 각각의 염기 서열의 변이는 한국 사람이 가지는 lactadherin gene의 cSNP의 일부라고 판단하였다.
목 적 : Rotavirus와 adenovirus는 영유아에서 급성장염을 유발하는 주요 원인인데 한국에서 adenovirus에 관한 연구 논문이 적어 저자들은 최근에 발생한 adenovirus와 rotavirus 장염의 분포를 조사하여 향후 질병 예방 및 발생 정보에 도움을 얻고자 연구 분석하였다. 방 법 : 1998년 3월에서 1999년 6월까지 대상으로 건국의대 부속병원에 급성 위장관염으로 입원 또는 통원 치료를 한 143명을 대상으로 하였다. 결 과 : 전체 환아 143명중 rotavirus 양성은 53명으로 37%의 양성률을 보였으며 1999년 1월에서 3월 사이의 초봄에 가장 많이 발생하였으며 2세 이하에서 가장 많이 발생함을 보였고 2~4세 사이에서도 16%의 양성률을 보였으며 9월에 전체 24례중 6례로 가장 많이 검출되었고 2개월에서 2세 사이에 많은 발생을 보였다. Adenovirus와 rotavirus에 동시 검출된 경우는 7명(5%)이였다. 결 론 : Rotavirus 장염은 1월부터 3월에 가장 많은 발생 빈도를 보여서 겨울 및 초봄에 유행시기를 보였으며 adenovirus는 9월에 가장 많이 검출 되었다. Rotavirus와 adenovirus의 발생의 중간 나이 분포는 각각 1세 4개월, 1세 3개월의 분포를 보였다.
지금까지의 자축의 설사병 치료에 응용되는 경구적 보액요법에 관해서 그 유래와 효과 그리고 경구보액 처방의 선택에 있어서의 참고사항을 소개하였다. 경구보액의 적용은 소아의 설사병 치료에서 유래되어 수의임상에서는 주로 자축의 설사병 치료에 유효하게 응용될 수 있으며 특히 자축에 가장 흔히 발생되는 Salmonella, E. coli 및 Rotavirus에 기인한 설사병에 관해서 실험적 및 자연발생 증예에 대한 경구적 보액의 유효성을 입증하는 여러 근거자료를 제시하였다. 자축의 설사병 치료에 이용되는 경구보액 으로서는 가급적 glucose, glycine, citrate 및 기타의 electrolytes가 함유되는 산성의 등장용액이 바람직하다는 이론을 부연하였다.
인간 Lactadherin은 비유 개시와 동시에 mammary gland의 epithelial cell에 의해 생성되는 46 Kd의 glycoprotein이다. 이 단백질은 성장기 어린이의 diarrheal disease의 원인이 되는 rotavirus에 specific하게 결합하여 그 증식을 억제시켜서 바이러스성 설사를 예방한다. 본 연구에서는 한국 여성의 lactadherin gene을 cloning 하여 그 sequence를 분석 비교하고 서양 여성과의 유전자 변이를 조사하였다. 보고된 서양 여성의 lactadherin 유전자와 비교하여 한 여성의 유전자에는 silent mutation을 포함하여 3 곳의 mutation이 있었고, 또 다른 여성의 유전자에서 새로운 3 곳의 mutation이 존재하여 이 유전자의 SNP가 여러 곳에 산재되어 있음이 관찰되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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