벼(Oryza sativa L. cv Nipponbaie)배양세포에 중력 450,000 x g를 처리하여 cDNA library를 만들고, 무처리 및 고중력을 처리한 cDNA 프로브로 스크리닝을 실시하여 고중력에 특이적으로 양성반응을 나타내는 GSC 13 및 GSC124 cDNA를 선발하였다. 선발된 두 유전자 GSC 13 및 GSC 124의 길이는 각각 1.34 및 0.67 kilobase pairs였으며, 배양세포내에서 관련된 transcript의 크기는 각각 2.0 및 1.9 kilobase pairs인 것으로 나타났다. 두 유전자를 프로브로한 Northern hybridization을 실시한 결과 GSC 13, GSC 124 공히 배양세포내에 고중력처리에 의해 특이적으로 축적되는 mRNA가 나타났으며, 중력강도 300,000 x g 에 비해 450,000 x g 처리에서 더욱 강한 축적을 보였고 450,000 x g 4시간 처리에서 최대의 수준을 보였다.
볏짚 가수분해물로부터 xylitol 생산능력이 가장 우수하다고 알려진 Candida mogii ATCC 18364의 xylose 발효특성에 관한 기초연구를 수행하였다. 상업적인 자일로즈로부터 C. mogii게 의해 xylitol을 생산할 때 수율과 속도에 미치는 여러 영향을 검토한 결과, 포도당을 함유한 기질에서 12시간 배양한 종균을 3.0 g/L의 농도로 접종하여 발효시켰을 때 가장 좋은 결과를 얻었다. 또한 xylose 발효에서 가장 중요한 요인인 용존산소 농도의 영향을 알아보기 위해, 2 L 발효조에서 통기량과 교반속도를 조절해 가면서 xylitol 생산을 비교 검토하였다. 농축균과 10% 접종균을 사용했을 경우 모두, 1 vvm의 통기량과 200 rpm의 교반속도에서 xylitol 생산이 가장 우수하였다.
Interleukin-18 (IL-18), otherwise known as interferon-gamma-inducing factor (IGIF), is one of several well characterized and important cytokines that contribute to host defenses. The complementary DNA (cDNA) of mature human interleukin-18 gene (hIL-18) was fused with the signal peptide of the rice amylase 1A gene (Ramy1A) and introduced into the plant expression vector under the control of a duplicated CaMV 35S promoter. The recombinant plasmid was transformed into tobacco (Nicotiana tabacum L. cv Havana) using the Agrobacterium-mediated transformation method. The integration of the hlL-18 gene into the genome of transgenic tobacco plants was confirmed by polymerase chain reaction (PCR) amplification and its expression was observed in the suspension cells that were derived from the transgenic plant callus by using Northern blot analysis. The hlL-18 protein was detected in the extracts of the transgenic callus and in the medium of the transgenic tobacco suspension culture by using immunoblot analysis. Based upon enzyme-linked immunosorbant assay (ELISA) results, the expression level of the hlL-18 protein approximated $166{\mu}g/L$ in the suspension culture medium. Bioassay results from the induction of $interferon-{\gamma}$ from a KG-1 cell line indicated that the hlL-18 secreted into the suspension culture medium was bioactive.
Searches for the nutrition requirements of three strains of Brevibacterium ammoniagenes reported in the previous paper were carried out with an aim of achieving the striking accumulation of L-glutamic acid and the large multipication of cells. It was recognized that all three strains required both biotin and thiamine, together with amino acids such as histidine or cysteine, for their good growth and extracellular L-glutamic acid accumulation. The quantity of biotin required for remarkable growth of these microorganisms was quite different from that for the maximum production of L-glutamic acid. This result, however, did not apply in the case of thiamine. It was also confirmed that, of 18 amino acids, histidine and cysteine were the msot effective organic nitrogen sources, while the most available inorganic ammonium salt resulting in a large amount of L-glutamic acid-production and considerable cell gorwth was found to be only urea. Maximum accumulation of extracellular L-glutamic acid, more than 50%(w/w) of the initial sugar content, could be obtained from fermentation in the medium containing wheat-bran extract(Brev. ammoniagenes T-1 and Brev.ammoniagenes Y-2) or rice-bran extract(Brev. ammoniagenes YR-2), which confirmed us a possibility that these bacteria might be employed for industrial fermentation of L-glutamic acid.
KANG HEUI YUN;KIM YONG SUNG;KIM GEUN JOONG;SEO JIN HO;RYU YEON WOO
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제15권2호
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pp.362-367
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2005
On the basis of high osmotic tolerance and xylitol production, a novel yeast strain was screened from soils of rice farming. The isolated strain HY200 was systematically characterized by using general approaches of Biolog Microlog$^{TM}$ and 18S rRNA sequence analyses, and consequently was designated as Candida tropicalis HY200. Under formulated culture conditions, relatively high xylitol yield ($77\%$) and productivity (2.57 g/l$\codt$h) were obtained, in practice, when 200 g/l of xylose was supplemented. In the utilization of nitrogen, inorganic compounds could not serve as nitrogen sources. As a promising phenotype, HY200 steadily flocculated during and/or after growing in the formulated medium. The extent of flocculation was partly affected by nitrogen sources. However, regardless of the kinds of carbon source fed, the flocculent cells were always observed at the end of the exponential growth phase. These observations strongly suggest that the strain HY200 could effectively be used as a potential candidate for the production of xylitol from xylose, especially in repeated batch mode, because of its flocculation ability and tolerance to high substrate concentrations.
Recently two thousand year old several villages ruins discovered at Amsadong, Daeshimli and Hunbaukol near the Han River side in Korea. An investigation of the present flora of these three localities was done. There are 84 families including 419 species of vascular plants. The vegetations of flora in the localities of the Han River side are very similar. the forests are poorly developed and appear as the secondary vegetations. The reforest plants can be recognized as Pinus rigida, quercus acutissima, Q. serrata, Robinia pseudoacacia and Alnus hirta. Herbaceous plants of Miscanthus sacchariflorus and Phragmitis japonicus bind up the soiles of the Han River side. Populus nigra grows abundantly in the moist places of sand bars which are located on the river side south of Daeshimli and on the northern side of the Han River across from Hunbaukol. These three area are fully cultivated but still many primitive farm techniques are employed. Farm produce crops include rice, corn, barley wheat, other vegetables, and a few ornamental plants. In this study the author found flower color variations ranging from a dark blue to a pale blue, and chromosome number differences existing between the populations of Commelina communis. The dark blue flowered taxa chromosome number is 44 and in the pale blue taxa it is 72. The wild white flowered Chrysanthemum is Chrysanthemum zawadskii Herb. ssp. acutilobum and which has finely lobed leaves, and has 54 chromosome in the root tip cells.
The DNA fragment representing for Pseudorabies gp50 and gp60(Shope) was cloned by recombinant techniques. The viral DNA was extracted from the infected cells and digested with Bam HI. The 6.8 Kb of Bam HI fragment was isolated from agarose gel and further digested with Nde I followed by Klenow treatment. The blunt ended 4.9Kb fragment was cloned into pTZ18R plasmid vector. The upstream region of gp50 was further manipulated to remove its 5' promoter region and create EcoRl site for possible eukaryotic expression system. The result of partial sequencing of cloned DNA indicated that Shope strain showed 95% homology with gp50 of Rice strain.
Kim, Hanhae;Joe, Anna;Lee, Muyoung;Yang, Sunmo;Ma, Xiaozhi;Ronald, Pamela C.;Lee, Insuk
Molecules and Cells
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제42권2호
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pp.166-174
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2019
Bacterial species in the genus Xanthomonas infect virtually all crop plants. Although many genes involved in Xanthomonas virulence have been identified through molecular and cellular studies, the elucidation of virulence-associated regulatory circuits is still far from complete. Functional gene networks have proven useful in generating hypotheses for genetic factors of biological processes in various species. Here, we present a genome-scale co-functional network of Xanthomonas oryze pv. oryzae (Xoo) genes, XooNet (www.inetbio.org/xoonet/), constructed by integrating heterogeneous types of genomics data derived from Xoo and other bacterial species. XooNet contains 106,000 functional links, which cover approximately 83% of the coding genome. XooNet is highly predictive for diverse biological processes in Xoo and can accurately reconstruct cellular pathways regulated by two-component signaling transduction systems (TCS). XooNet will be a useful in silico research platform for genetic dissection of virulence pathways in Xoo.
왕겨가 Agaricus blazei Murill (AB: 신령버섯)균사체 액체배양 추출물의 항암성을 증가시키는지에 관한 연구를 수행하였다. AB균사체를 대두박을 기본으로 한 액체배지에 다양한 조건으로 배양하여, $\beta$-glucan 함량, Brix, 균사체를 측정하여 적정 생육조건을 선정하고, 이들의 열수추출물의 S-180 cell로 유도한 mouse 복수암에 대한 항암성을 조사하였다. AB균사체는 $25^{\circ}C$에서 5일간 배양하였을 때 최적 생육을 나타내었고, 이 배양물이 다른 조건에서 배양한 배양물보다 우수한 항암성을 나타내었다. AB균사체의 생육 및 항암성은 변온배양에 따른 효과는 없었다. 따라서 이 최적배양조건($25^{\circ}C$, 5일 배양)에서 AB균사체를 1% 왕겨분말이 함유된 액체배지에 배양하고, 이의 열수 추출물의 항암성을 검증하였다. 1% 왕겨가 함유된 액체배지에서 배양한 열수추출물의 항암성은 왕겨가 함유되지 않은 배지의 열수추출물보다 항암성이 유의성 있게 증가되었다(p<0.05). 왕겨의 첨가는 AB균사체의 생육을 오히려 촉진시켰다. 이 결과는 왕겨가 AB균사체 뿐 만 아니라 다른 버섯균사체 액체배양물의 항암성 증진을 위한 원료로 활용될 수 있을 것임을 의미한다.
본 연구는 한국 고유의 전통주인 막걸리 제조시 생성되는 주박 추출물과 유기용매 분획물을 총 85종 분리하여, 이들의 대장암 세포주에 대한 항성장 활성과 활성기전을 연구하였다. 이들 중 세포생존율 연구결과에 따라 3가지 종류의 분획물(KSD-E1-3, KSD-E2-3, KSD-E4-3)을 선별하였다. 이 중 가장 활성이 높은 KSD-E1-3 분획물에 의한 유전체 수준에서의 유전자 발현변화를 확인하기 위하여 oligo DNA microarray 실험을 수행하였다. 그 결과, 2배이상 발현이 증가된 유전자들 가운데 항암 유전자인 NAG-1, ATF3, DDIT3 그리고 p21을 선별하여 추가 실험을 진행하였다. 세포생존율 결과에 따라 선별된 3가지 종류의 분획물(KSD-E1-3, KSD-E2-3 그리고 KSD-E4-3)에 의한 4가지 종류의 유전자의 발현을 확인한 결과, KSD-E1-3에 의하여 모든 유전자의 발현이 높게 증가되었다. KSD-E1-3에 의한 유전자의 발현이 전사조절인자 p53에 의존적인지 확인하고자 p53 null HCT116 세포주를 이용하여 RT-PCR한 결과, NAG-1, ATF3, 그리고 DDIT3 유전자 p53에 비의존적이었으며, 반면 p21 유전자는 p53에 의해서만 발현이 증가되는 것을 확인하였다. 이러한 연구 결과는 주박 추출물이 다양한 기작에 의해 항암 유전자의 발현을 유도함으로써 암 세포에 대한 항성장 활성을 보여주고 있음을 나타낸다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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