For establishing a transformation system of rice, an efficient introduction of foreign genes into embryogenic cell suspension by particle bombardment was conducted. The particle inflow gun based on the acceleration of DNA-coated tungsten particles using pressurized helium was constructed for delivery of DNA into rice cells. Several bombardment parameters were optimized using the transient expression of GUS gene. The conditions that gave the highest GUS gene expression of about 1000 blue spots per g fresh weight of bombarded cells include treatment of the cells with 0.5 M osmotic pressure, and use of the 410 kPa helium, 110 mm target distance, 13 mm syringe filter holder and 5 $\mu$L DNA/tungsten mixtures. It was also confirmed that rice actin promoter-intron construct gave the highest expression of all promoter-sequences studied. Eight weeks after the bombardment, stably transformed calluses were obtained on the selection medium containing 100 mg/L G418 and showed the strong activity in in situ GUS assay.
Panicle blight and seed rot disease caused mainly by Burkholderia glumae and Burkholderia gladioli is threatening rice cultivation worldwide. The bacteria have been reported as seed-borne pathogens from rice. Accurate detection of both pathogens on the seeds is very important for limiting the disease dissemination. Novel primer pairs targeting specific molecular markers were developed for the robust detection of B. glumae and B. gladioli. The designed primers were specific in detecting the target species with no apparent cross-reactions with other related Burkholderia species at the expected product size. Both primer pairs displayed a high degree of sensitivity for detection of B. glumae and B. gladioli separately in monoplex PCR or simultaneously in duplex PCR from both extracted gDNA and directly preheated bacterial cell suspensions. Limit of detection was as low as 0.1 ng of gDNA of both species and $3.86{\times}10^2cells$ for B. glumae and $5.85{\times}10^2cells$ for B. gladioli. On inoculated rice seeds, the designed primers could separately or simultaneously detect B. glumae and B. gladioli with a detection limit as low as $1.86{\times}10^3cells$ per rice seed for B. glumae and $1.04{\times}10^4cells$ per rice seed of B. gladioli. The novel primers maybe valuable as a more sensitive, specific, and robust tool for the efficient simultaneous detection of B. glumae and B. gladioli on rice seeds, which is important in combating rice panicle blight and seed rot by early detection and confirmation of the dissemination of pathogen-free rice seeds.
The effect of brown rice extract on mitomycin C(MMC)-induced chromosome aberration was examined in cultured Chinese hamster lung(CHL) cells, after induction of chromosome aberration and mitotic index in CHL cells cultured with MMC were observed. There were no significant differences between mitotic indices of CHL cells treated with DMSO, and MMC and brown rice extract. The frequency of chromosome aberration showed dose-dependent relationship in CHL cells treated with $0.2{\sim}3.0\;{\mu}g$/assay of MMC. But chromosome aberrations could not be assayed Our to cytotoxicity of MMC when its concentrations were above $3.0\;{\mu}g$/assay. Chromatid type, especially gap and break, of chromosome aberration were most frequently observed. When CHL cells treated with $2.0\;{\mu}g$/assay of MMC and brown rice extracts of concentration ranging $0.75{\sim}10.0\;{\mu}g$/assay were incubated, frequencies of chromosome aberration induced by MMC were significantly decreased at above concentrations(p<0.01, p<0.05). As concentration of brown rice extract was increased, frequencies of chromosome aberration was decreased $7{\sim}30%$, in some irregularity.
Atopic dermatitis (AD) is usually caused by foods such as wheat, egg, milk, and peanuts, leading to common health problems in early childhood with complications like urtication. The aim of this study was to evaluate ethanol extracts of rice and rice snacks concentrated until the ethanol was completely eliminated and hot-air dried. In vitro analyses were carried out using murine macrophage RAW 264.7 cells. We measured cytotoxicity, nitric oxide (NO) production, and inflammatory cytokine level. The NO level of the cells exposed to lipopolysaccharide (LPS) was significantly reduced by rice and rice snack extracts. $TNF-{\alpha}$ level decreased in contrast to the LPS group, although a significant difference was not observed. On the other hand, IL-6 significantly decreased in both rice and rice snack extracts in a dose-dependent manner. The results of the present study suggest that rice and rice snack decreased NO and inflammatory cytokine levels. Therefore, rice could be useful as a raw material for relieving child atopic dermatitis caused by snacks made from wheat.
Six strains of an obligate predatory bdellovibrio isolate that preys on Burkholderia glumae in rice paddy field water and rhizosphere soil, were identified and characterized. The numbers of Bdellovibrio cells varied from $3.2{\times}10^3$ to $9.2{\times}10^3$ plaque-forming unit/g after enrichment in cells of B. glumae. Prey range tests with six Bdellovibrio strains and 17 prey strains of rice-pathogenic, antibiosis-related, or nitrogen-fixing bacteria resulted in unique predation patterns in related prey cells. Strain BG282 had the widest prey range on 7 plant pathogenic bacteria among the 17 prey strains tested. However, no predation occurred with strains of Azospirillum brasilense, Paenibacillus polymyxa, Pseudomonas fluorescens, P. putida, and Serratia marcescens that are associated with antibiosis or nitrogen fixation in the rice ecosystem. Identification was confirmed by the presence of typical bdelloplast in the prey cells of B. glumae and by a PCR assay using B. bacteriovorus-specific primers. Furthermore, 16S rDNA sequencing of the six bdellovibrio strains showed a homology range of 97.2% to 99.2% to the type strain of B. bacteriovorus.
Objective: In this study, the immunomodulatory activity of a mixture of wild Panax ginseng and red-mold rice extracts (MPR) on RAW 264.7 macrophage cells in the presence and absence of methotrexate (MTX), an anti-cancer drug, was investigated. Methods and Results: In the cell viability, MPR showed a significant cell proliferation and inhibited cell regression by red-mold rice (RMR) alone or MTX alone. MPR induced moderate increase in nitric oxide (NO) production. NO production and inducible nitric oxide synthase (iNOS) mRNA expression by LPS decreased after MPR treatment. In addition, MPR slightly induced COX-2 mRNA expression, but it did not affect the expression of COX-2 mRNA by LPS treatment. In RT-PCR analyses, MPR induced IL-$1{\alpha}$, IL-$1{\beta}$, IL-6, and TNF-$\alpha$ mRNA expression, but had no effect on IL-10 and TGF-$\beta$, regardless of MTX treatment. Furthermore, MPR did not interfere with the cytotoxicity of MTX against MCF-7 human breast carcinoma cells. Conclusions: MPR is efficacious in protecting against MTX-induced cell regression as a result of macrophage activation, resulting in induction of cytokine expression, implying that MPR could be considered an adjuvant in MTX-chemotherapy.
The effects of ethanol fractions of three different rice grain extracts, Jakwangchalbyeo, Hwasunchalbyeo, and Ilpumbyeo, on apoptotic cell death in the rat hepatoma H4IIE cell line were investigated using the MTT [3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide] cell viability assay. One hundred mg/mL Jakwangchalbyeo extract significantly reduced cell viability to 69.5, 57.2, and 46.1% within 24, 48, and 72 hr, respectively. Fluorescence-activated cell sorting (FACS) analyses were also performed to characterize the cell death pattern caused by treatment with the rice grain extracts. Apoptotic cell death was clearly observed with time after treatment with the Jakwangchalbyeo extract. In Western blotting analysis, degradation of the 116 kDa poly-ADP-ribose polymerase (PARP) molecule was observed with concomitant formation of an 89 kDa product 24, 48, and 72 hr after treating cells with the Jakwangchalbyeo extract. This indicates that an apoptotic process caused cell death in these cells. In conclusion, red-pericarp Jakwangchalbyeo extract induced apoptotic cell death in H4IIE cells to a larger extent than the other rice extracts.
Adya P. Singh;Park, Byung-Dae;Wi, Seung-Gon;Lee, Kwang-Ho;Yoon, Tae-Ho;Kim, Yoon-Soo
Plant Resources
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v.5
no.2
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pp.95-103
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2002
Microscopic techniques were used to observe the microstructure of rice husk. Microscopic examination showed that two main components of husk, lemma and palea consisted of outer epidermis, layers of fibers, vascular bundles, parenchyma cells, and inner epidermis, in sequence from the outer to the inner surface. The outer epidermal walls were extremely thick, highly convoluted and lignified. The underlying fibers were also thick-walled and lignified. Parenchyma cells were thin-walled and unlignified. Inner epidermal cells were also unlignified. The outer surface of both lemma and palea were conspicuously ridged, but the lower surface had a flat appearance. As part of a detailed study to characterize rice husk using microscopic and micro-analytical techniques, distribution of silica was also examined, and is presented elsewhere. Rice husk can potentially be used as a raw material for making composite products and the observations presented here form valuable background information for our future work related to product development.
An adaptive measure of photosynthetic cells to a condition identified with a reduction of cellular energy charge, caused by water deficit-induced impairment of photosynthetic ATP production, was investigated using hydroponically cultured rice seedlings. Water stress treatment of the seedlings resulted in a marked decrease in cellular ATP level, a significant increase in the content of NAD(H) and concurrent decrease in that of NADP(H) in shoots, which accompanied a decrease in the activity of NAD kinase (EC 2.7.1.23) that specifically converts NAD(H) to NADP(H). The decline in the enzyme activity was particularly evident in the $Ca^{2+}/calmodulin-dependent$ kinase, the major form of NAD kinase in plants, whereas the level of active calmodulin remained unchanged during water deficit. The ratio of $NADP^+$ to NADPH was maintained nearly constant and no increases were seen in the level of $H_2O_2$ and the activities of $superoxide/H_2O_2-detoxifying$ enzymes in shoots stress-treated for two days. Based on these results, it may be suggested that rice plants take a strategy to cope with an adverse situation of limited photophosphorylation created by water deficit in that cells facilitate ATP production through glycolysis and oxidative phosphorylation; in doing so, rice cells suppress NAD kinase activity, consequently up-sizing the NAD(H) pool at the expense of the NADP(H) pool. Several parameters associated with the stress symptoms are also of implicative that there is no overproduction of superoxide radical or the related active oxygen at least in rice seedlings.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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