To evaluate the genotoxicity of CKD-602, an anticancer agent the in viかo reverse mutation assay using Salmonella typhimurium, the Chromosome aberration assay using Chinese hamster lung (CHL) cells and the in vivo micronucleus assay using bone marrow cells of ddY mice were performed. In the reverse mutation assay, CKD-602 did not induced mutagenicity in Salmonella typhimurium TA 98, TA 100, TA 1535, and TA 1537 strains with and without metabolic activation. In the chromosome aberration test using CHL cells, there was an increased incidence of structural aberrations induced by CKD-602 without metabolic activation during 24 and 48 hours, but CKD-602 did not induce chromosome aberration with metabolic activation. The in vivo induction of micronuclei was measured in polychromatic erythrocytes of bone marrow of male ddY mice. At 24 hours after treatment with CED-602 by i.p. once, there was an increased incidence of micronucleated polychromatic erythrocytes in bone marrow of ddY male mice.
To evaluate the genotoxicity of SKP-450, an antihypertensive agent the in vitro reverse mutation assay using Salmonella typhimurium, the Chromosome aberration assay using Chinese hamster lung (CHL) cells and the in vivo micronucleus assay using bone marrow cells of ddY mice were performed. In the Reverse mutation test, SKP-450 did not induced mutagenicity in Salmonella typhimurium TA 98, TA 100, TA 1535 and TA 1537 with and without metabolic activation. In the chromosome aberration assay using CHL cells, there was no increased incidence of structural and numerical aberrations with and without metabolic activation. The in vivo induction of micronuclei was measured in polychromatic erythrocytes of bone marrow of male ddY mice at 30 hours after treatment with SKP-450 by p.o once. The results showed no increased incidence of micronucleated polychromatic erythrocytes in bone marrow of ddY male mice treated with SKP-450.
Objectives: The objective of this study was to assess the genotoxicity of a no-pain pharmacopuncture (NPP) extract developed in 2022 using a bacterial reverse mutation assay, aiming to further substantiate the safety profile of NPP. Methods: The genotoxicity evaluation involved a bacterial reverse mutation assay to assess the mutagenic potential of NPP extracts with and without metabolic activation. Histidine-requiring Salmonella typhimurium strains (TA98, TA100, TA1535, and TA1537) and tryptophan-requiring Escherichia coli strains (WP2uvrA) were used in the assay. Results: The NPP extract did not induce a revertant colony count exceeding two times that of the negative control at any dose level in any of the tested strains, both with and without metabolic activation. Additionally, no growth inhibition or precipitation was observed in the presence of NPP. Conclusion: Based on the findings, it can be concluded that the NPP extract exhibited no mutagenic potential in the in vitro genotoxicity tests conducted.
Objectives : We investigated genetic toxicity of HMCO5 using the Micronucleus Test in bone marrow cells of mice and Bacterial Reverse Mutation Assay in plate incorporation method according to OECD Guidelines and KFDA Guidelines. Methods : 1. Micronucleus test: The male rats were divided into 5 groups, respectively; G(1), treated with distilled water: G(2), treated with 1250mg/kg HMC05: G(3), treated with 2500mg/kg HMC05, G(4), treated with 5,000mg/kg HMC05; G(5), treated with Cyclophosphamide $H_2O$. Sterilized distilled water and HMC05 were administered for two consecutive days. Cyclophosphamide $H_2O$ was administered once on the day of 2nd administration. 2. Bacterial Reverse Mutation Aassay: Experimental groups were divided into two groups: with S-9mix(+S) or without S-9mix(-S). Each group treated with sterilized distilled water only, HMCO5(62, 185, 556, 1,667, $5,000{\mu}g$/plate) and, positive vehicles(Sodium azide, 2-Aminoanthracene, 4-Nitroquinoline N-oxide, ICR 191), respectively. Results : HMC05 did not show any changes in the number of micronucleated polychromatic erythrocytes(MNPCE) among 200 polychromatic erythrocytes compare to negative control. However, there were significant (p<0.01) increase with CPA in MNPCE. In Bacterial Reverse Mutation Aassay, no significant increases in the number of revertant colonies compared to (삭제) negative control were detected in all concentrations of HMC05. Conclusions : These results indicate that HMC05 did not show any genotoxicity against in Micronucleus test and Bacterial Reverse Mutation Aassay.
The genotoxicity of water extract of Bojungikkeehapdaechilki-tang was tested by In Vitro Chromosome Aberration Test. Bacterial Reverse Mutation Assay and Micronucleus test according to OECD Guidelines and KFDA Guidelines. The obtained results were as follows : 1. Chromosome Aberration Test: In Vitro Chromosome Aberration Test of Bojungikkeehapdaechilki-tang extracts was carried out using cultured Chinese hamster lung cells in the presence and absence of metabolic activation system(S-9 mix). No significant changes in the number of aberrant metaphases having structural and number of aberrations were detected in Bojungikkeehapdaechilki-tang extracts treated groups. 2. Bacterial Reveres Mutation Assay: Bojungikkeehapdaechilki-tang extracts was evaluated for its potential to induce reverse mutation in the histidine auxotroph strains of Salmonella typhimurium such as TA100, TA1535, TA98 and TAl537 and the tryptophan auxotroph strain of Escherichia coli WP2 uvrA. No significant changes in the number of revertant colonies compared to its negative control were detected in Bojungikkeehapdaechilki-tang extracts treated groups against all 5 strains. 3. Micronucleus test: Micronucleus test of Bojungikkeehapdaechilki-tang extracts were performed using specific pathogen free 7-week old male ICR mouse. No significant changes in the number of micronucleated polychromatic erythrocytes among 2000 polychromatic erythrocytes compared to negative control were detected in all Bojungikkeehapdaechilki-tang extracts treated groups. In summarized above-mentioned results, it is concluded that Bojungikkeehapdaechilki-tang extracts have not genotoxicity against In Vitro Chromosome Aberration Test, Bacterial Reverse Mutation Assay and Micronucleus test.
Objectives : The genotoxicity of extract of "Hyeonggaeyeongyotang", a polyherbal formula has been used as a tonic agents in oriental medicine was tested. Methods : Extract of "Hyeonggaeyeongyotang" was tested by In Vitro Chromosome Aberration Test, Bacterial Reverse Mutation Assay and Micronucleus test according to OECD Guidelines and KFDA Guidelines [2005-60]. Results : The obtained results were as follows: 1. Chromosome Aberration Test: No significant changes in the number of aberrant metaphases having structural and number of aberrations were detected in all concentrations of "Hyeonggaeyeongyotang" extracts treated in this study. 2. Bacterial Reverse Mutation Assay: No significant increases in the number of revertant colonies compared to its negative control were detected in all concentrations of "Hyeonggaeyeongyotang" extracts treated in this study against all 5 strains except for $50{\mu}g/ml$ treated group where significantly decreases in colony numbers were detected agains all five strains used in this study as pharmacological effects not genotoxicity. 3. Micronucleus test: No significant changes in the number of micronucleated polychromatic erythrocytes among 2000 polychromatic erythrocytes compared to negative control were detected in all "Hyeonggaeyeongyotang" extracts-dosing groups tested. Conclusions : From above-mentioned results, it is concluded that "Hyeonggaeyeongyotang" extracts have not any genotoxicity against In Vitro Chromosome Aberration Test, Bacterial Reverse Mutation Assay and Micronucleus test.
Kim, Youn-Jung;Kim, Mi-Soon;Jeon, Hee-Kyoung;Ryu, Jae-Chun
Molecular & Cellular Toxicology
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제2권3호
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pp.151-158
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2006
Khal was a synthetic congener of halocidin, a heterodimeric peptide consisting of 19 and 15 amino acid residues detected in Halocynthia aurantium. This compound was considered a candidate for the development of a novel peptide antibiotic. The genotoxicity of Khal was subjected to high throughput toxicity screening (HTTS) because they revealed strong antibacterial effects. Mouse lymphoma thymidine kinase ($tk^{+/-}$) gene assay (MOLY), single cell gel electrophoresis (Comet) assay and chromosomal aberration assay in mammalian cells and Ames reverse mutation assay in bacterial system were used as simplified, inexpensive, short-term in vitro screening tests in our laboratory. These compounds are not mutagenic in S. typhimurium TA98 and TA100 strains both in the presence and absence of metabolic activation. Before performing the comet assay, $IC_{20}$ of Khal was determined the concentration of $25.51\;{\mu}/mL\;and\;21.99\;{\mu}g/mL$ with and without S-9, respectively. In the comet assay, Khal was not induced DNA damage in mouse lymphoma cell line. Also, the mutation frequencies in the Khal-treated cultures were similar to the vehicle controls. It is suggests that Khal is non-mutagenic in MOLY assay. And no clastogenicity was observed in Khal-treated Chinese hamster lung cells. The results of this battery of assays indicate that Khal has no genotoxic potential in bacterial or mammalian cell systems. Therefore, we suggest that Khal, as the optimal candidates with both no genotoxic potential and antibacterial effects must be chosen.
In order to investigate the safety of Aralia elata extract causing the reduction in the blood glucose level and oxidative stress in diabetes animals, these genotoxicity studies in bacterial and mammalian cell assay system such as Ames bacterial reverse mutation test and chromosomal aberration assay were performed. As results, in Ames bacterial reversion assay the extract in the range of 5,000-625 ug/plate did not induce mutagenicity in Salmonella typhimurium TA 98, TA 100, TA 1535 and TA 1537 strains with and without metabolic activation of S-9 mixture. For chromosomal aberration assay, $IC_{50}$ (50% inhibition concentration of cell growth) of the extract were determined; 792 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$ without and 524 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$ with S-9 mixture in Chinese hamster lung (CHL) fibroblast cell culture. Any significant chromosomal aberration was not observed in CHL cells treated with the extract at the concentrations of 792, 396 and 198 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$ or 524, 262 and 131 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$ in the absence or presence of S-9 metabolic activation, respectively. From these results, Aralia elata extract did not induce any harmful effects on the gene in bacteria and mammalian cell system used in these experiments.
This study was conducted to evaluate the mutagenic potential of dimethyl isophthalate (DMIP) using Ames bacterial reverse mutation test, chromosomal aberration test and mouse lymphoma $tk^{+/-}$ gene assay. As results, in Ames bacterial reversion assay, DMIP was tested up to the concentration of 5,000 ${\mu}g$/plate and did not induce mutagenicity in Salmonella typhimurium strains TA98, TA100, TA1535 and TA1537, and Escherichia coli WP2uvrA with or without metabolic activation (S9 mix). Using cytotoxicity test, the maximal doses of DMIP for chromosomal aberration assay were determined at 1,250 ${\mu}g/mL$, which was a minimum precipitation concentration ($IC_{50}>1,940\;{\mu}g/mL$ or 10 mM) and at 155 ${\mu}g/mL$ ($IC_{50}:155\;{\mu}g/mL$) in the presence and the absence, respectively, of S9 mix. DMIP in the presence of S9 mix induced statistically significant (P<0.001) increases in the number of cells with chromosome aberrations at the dose levels of over 250 ${\mu}g/mL$, when compared with the negative control. However, DMIP in the absence of S9 mix did not caused significant induction in chromosomal aberrant cells. In MLA, DMIP at the dose range of 242.5-1,940 ${\mu}g/mL$ in the presence of S9 mix induced statistically significant increases in mutation frequencies related to small colony growth, whereas any significant mutation frequency was not observed in absence of S9 mix. From these results, it is conclusively suggested that dimethyl isophthalate may be a clastogen rather than a point mutagen.
To develop the novel anti-allergic drug, many sophoricoside derivatives were synthesized. Among these derivatives, JSH-II-3, VI-3, VII-3, VIII-3, VII-20 and VII-20 (sodium salt) were selected and subjected to high throughput toxicity screening (HTTS) because they revealed strong IL-5 inhibitory activity and limitation of quantity. Single cell gel electrophoresis (Comet) assay, mouse lymphoma thymidine kinase ($tk^{+/-}$) gene assay (MOLY), chromosomal aberration assay in mammalian cells and Ames reverse mutation assay in bacterial system were used as simplified, inexpensive, short-term in vitro screening tests in our laboratory. Through the primary screening using the comet assay, we could choose the first candidates of sophoricoside derivatives with no genotoxic potentials as JSH-VI-3, VII-3, VII-20 and VII-20 (sodium salt). Also JSH-VII-3, VII-20 and VII-20 (sodium salt) are non-mutagenic in MOLY assay, while JSH-II-3 is mutagenic at high concentration with the presence of metabolic activation system in both comet assay and MOLY assay. The selected derivatives (JSH-VI-3, VII-3, VII-20 and VII-20 (sodium salt) are not mutagenic in S. typhimurium TA98 and TA100 strains both in the presence and absence of metabolic activation. From results of chromosomal aberration assay, 6 h treatment of JSH-VI-3, VII-3 and VII-20 (sodium salt) were not revealed clastogenicity both in the presence and absence of S-9 mixture. Therefore, we suggests that JSH-VI-3, VII-3, VII-20 and VII-20 (sodium salt), as the optimal candidates with both no genotoxic potential and IL-5 inhibitory effects must be chosen. To process the development into new anti-inflammatory drug of these derivatives, further investigation will need.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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