Kang, Eun-Jin;Park, Ji Hun;Jin, Seul;Kim, Young-Rok;Do, Hyung-Ki;Yang, Woong-Suk;Lee, Jae-Yong;Hwang, Cher-Won
Journal of Environmental Science International
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v.28
no.2
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pp.225-233
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2019
In this study, we investigated the in vitro anti-biofilm activities of plant extracts of chives (Allium tuberosum), garlic (Allium sativum), and radish (Raphanus sativus L.) against environment harmful bacteria (gram-positive Staphylococcus aureus and, gram-negative Salmonella typhimurium and Escherichia coli O157:H7). In the paper disc assay, garlic extracts exhibited the highest anti-biofilm activity. The Minimal Inhibitory Concentration (MIC) of all plant extracts was generally higher for gram-negative bacteria than it was for gram-positive bacteria. Gram-negative bacteria were more resistant to plant extracts. The tetrazolium dye (XTT) assay revealed that, each plant extract exhibited a different anti-biofilm activity at the MIC value depending on the pathogen involved. Among the plant extracts tested, garlic extracts (fresh juice and powder) effectively reduced the metabolic activity of the cells of food-poisoning bacteria in biofilms. These anti-biofilm activities were consistent with the results obtained through light microscopic observation. Though the garlic extract reduced biofilm formation for all pathogens tested, to elucidate whether this reduction was due to antimicrobial effects or anti-biofilm effects, we counted the colony forming units of pathogens in the presence of the garlic extract and a control antimicrobial drug. The garlic extract inhibited the E. coli O157:H7 biofilm effectively compared to the control antimicrobial drug ciprofloxacin; however, it did not inhibit S. aureus biofilm significantly compared to ciprofloxacin. In conclusion, garlic extracts could be used as natural food preservatives to prevent the growth of foodborne pathogens and elongater the shelf life of processed foods.
Antibiotics are chemical substances produced by various species of microorganisms that suppress the growth of other microorganisms or may destroy them. Among the more than 4000 antibiotics that has been identified, about 20s are using as the therapy of infectious fish diseases. There are several methods used to classify and group antibiotics, and the most common classification has been based on chemical structure and proposed mechanism of action. The effect of antibiotics may be determined by the kind of fish pathogens and by the external environment surrounded the infected fish. It implies that the kind of antibiotics and its application method should be decided after the determination of the reasons of fish disease. The uncontrolled usages of antibiotics may induce the selection of resistant mutants appeared spontaneously and present in any group of bacteria. The epidemic spread of such antibiotic resistant strains of fish pathogenic bacteria already has been reported in various districts of japan. Importantly, transferable drug resistant(R) plasmids were detected in strains of most of fish pathogens. Based on those reports, the antimicrobial resistance appears to be a rapidly emerging problem in the fish industry on the country. The expanding literatures on the pharmacokinetics, clinical trials, withdrawal periods and efficacy of environmental effect for the commonly using antibiotics have met the needs of data for the practical application of antibiotics. However, the most important thing for the treatment of fish diseases would be the communication and exchanging of information between the site of aquaculture and the diagnostic laboratory.
The aim of this study was to screen lactic acid bacteria for the fermentation of garlic and to assess the increase in inhibitory activity of garlic fermented against antibiotic-resistant pathogens for use as an animal feed supplement. We screened 45 strains of lactobacillus for the fermentation of garlic. Of these strains, 23 showed similar growth rates with or without allicin. Cultures of the 23 strains were mixed with an equivalent amount of garlic juice and incubated overnight at $37^{\circ}C$. The three strains with the lowest pH values were Lactobacillus paracasei KCTC 3169, L5 strain, and L. reuteri SW. Garlic juice fermented by the L5 strain more strongly inhibited antibiotic-resistant pathogenic bacteria than L. paracasei KCTC 3169, L. reuteri SW, or garlic juice itself. By examining carbohydrate utilization, morphologic properties and 16S rRNA gene sequences, we identified the L5 strain as Pediococcus pentosaceus and deposited it in the name of P. pentosaceus KACC 91419 into the Korea Agricultural Culture Collection. To identify the antimicrobial compound from the garlic filtrate fermented by P. pentosaceus KACC 91419, we fractionated P. pentosaceus KACC 91419 culture on a C18 column and checked the antimicrobial activity of fractions A6 to A10. Only fraction A9 showed inhibitory activity on Staphylococcus aureus. Comparing the mass spectra of the fractions with and without antimicrobial activity, we observed a single dominant product ion (m/z 157.99) from the fraction showing antimicrobial activity. Its molecular mass (157.99) was 2 atomic mass units less than that of allicin (162.02). This suggests that allicin might be converted to its derivative, which has antimicrobial activity, during fermentation by P. pentosaceus KACC 91419.
Park, Ju-Hee;Han, Ok-Kyung;Lee, Baek-Rak;Kim, Jeong-Hyun
Microbiology and Biotechnology Letters
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v.35
no.4
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pp.278-284
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2007
A novel screening strategy for salt-resistant antimicrobial peptides from a M13 peptide library was developed. Fusion of MSI-344, a magainin derivative and indolicidin to pIII coat proteins did not significantly affect viability of the recombinant phages, which indicated that the pIII could neutralize toxicity of the antimicrobial peptides and therefore it is possible to construct antimicrobial peptide library in Escherichia coli. On the basis of the conserved sequence of ${\alpha}$-helical antimicrobial peptides, a semi-combinatorial peptide library was constructed in which the peptides were displayed by pIII. To remove hemolytic activity from the library, the phages bound to red blood cells were removed, and the subtracted phage library was screened for binding to target bacteria Pseudomonas aeruginosa and Staphylococcus aureus under high salt concentrations. The screened peptides showed relatively low antimicrobial activity against the target bacteria. However, antimicrobial activities of the screened peptides P06 and S18 were not affected by the cation concentrations of 150 mM $Na^+$, 2 mM $Mg^{2+}$ and 2 mM $Ca^{2+}$ without significant hemolytic activity. This screening strategy that is based on binding capacity to target cells provides new potential to develop salt-tolerant antimicrobial peptides.
Isolation and identification of causative microorganisms and susceptibility testing are important in selecting appropriate antimicrobial agent. The purpose of this study was to determine the antimicrobial susceptibility patterns and identification of bacteria for the selection of a therapeutic antibiotic agent for treatment. Specimens were cultured aerobically from dog patients brought to the veterinary medical teaching hospital of Seoul National University between July 1999 and September 2000. A total of 157 isolates were from skin(63), urine(45), ear canal(31) and conjunctiva(18). The result is that the most common organisms isolated from dog patients were S. intermedius was the most common isolates from the skin, ear canal, and conjunctiva. E. coli was the most common isolated from urine. Most of gram-positive isolates were resistant to ampicillin(80.6%), erythromycin(68.8%), penicillin(86.2%), tetracycline(89.2%). Otherwise most of gam-negative isolates were resistant to ampicillin(73.4%), trimethoprim-sulfa(53.3%). E. coli was resistant to ciprofloxacin(61.5%), piperacillin (69.2%). Antimicrobial susceptibility pattern by the sampling site was not remarkably different except 5. aureus isolated from urine.
Some rhizobacteria were isolated, that have copper resistance and can confer copper resistance to plants allowing growth under copper stress. Isolated strains Pseudomonas veronii MS1 and P. migulae MS2 produced 0.13 and 0.26 mmol/ml of siderophore, that is a metal-chelating agent, and also showed 64.6 and 77.9% of biosorption ability for Cu in 20 mg/L Cu solution, respectively. Copper can catalyze a formation of harmful free radicals, which may cause oxidative stress in organisms. Removal activity of 1,1-diphenyl-2-picryl hydrazyl radical and antioxidant capacity of strains MS1 and MS2 increased up to 82.6 and 78.1%, respectively compared to those of control at 24 h of incubation. They exhibited 7.10 and $6.42{\mu}mol$${\alpha}$-ketobutyrate mg/h of 1-aminocyclopropane-1-carboxylic acid deaminase activity, respectively, which reduced levels of stress hormone, ethylene in plants, and also produced indole-3-acetic acid and salicyclic acid that can help plant growth under abiotic stress. All these results indicated that these copper-resistant rhizobacteria could confer copper resistance and growth promotion to plants.
Previous screening of novel antibacterial agents revealed that some bacterial isolates exhibited antibiotic activity against both gram-positive and gram-negative bacteria and that they showed antibacterial activity, even against methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA). Among these isolates, one bacterial strain, BCNU 1204, was identified as Pseudomonas aeruginosa using phenetic and phylogenetic analysis, based on 16S ribosomal RNA gene sequences. The maximum productivities of antimicrobial substances of BCNU 1204 were obtained after being cultured at $35^{\circ}C$ and pH 7.0 for 4 d in King's medium B (KMB). Dichloromethane (DCM) and ethylacetate (EA) extracts of P. aeruginosa BCNU 1204 exhibited strong antimicrobial activity, particularly against gram-positive bacteria. The EA extracts exhibited broad-spectrum activity against antibiotic resistant strains. Fraction 5-2, was obtained by recycling preparative liquid chromatography (LC) and preparative thin-layer chromatography (TLC) and was identified as phenazine-1-carboxylic acid belonging to phenazines using gas chromatography and mass spectrometry (GC/MS). Its minimum inhibitory concentration (MIC) values were $25{\mu}g/ml$, $50{\mu}g/ml$, ${\geq}25{\mu}g/ml$, and ${\geq}50{\mu}g/ml$ for MRSA CCARM 3089, 3090, 3091, and 3095 strains, respectively. P. aeruginosa BCNU 1204 may be a potential resource for the development of anti-MRSA antibiotics. Additional research is required to identify the active substance from P. aeruginosa BCNU 1204.
Ham, J.S.;Kim, H.S.;Hong, K.H.;Kim, J.G.;Jeong, S.G.;Chae, H.S.;Ahn, J.N.;Kang, D.K.;Kim, H.U.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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v.16
no.10
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pp.1550-1554
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2003
One hundred of lactic cultures were evaluated for their ability to inhibit hazardous microbes, such as Salmonella enteritidis, Salmonella typhimurium, Escherichia coli, Listeria monocytogenes, and Bacillus cereus by agar well diffusion method. None of them showed inhibitory halo against S. enteritidis, while 27 strains showed inhibitory activity against S. typhimurium, 6 against E. coli, 9 against ampicillin resistant E. coli, 31 against L. monocytogens, 10 against B. cereus. pH of the culture does not explain for the inhibitory activity except against B. cereus. A neutralized culture from corn silage showed highest inhibitory activity against S. typhimurium, and the size of inhibitory halo was same as 10 ug/mL of ampicillin. The culture was identified to be Lactobacillus buchneri on the basis of biochemical characteristics and utilization of substrates. Using the culture as probiotics could be expected to reduce antibiotics for animal feeding.
A Study was conducted to investigate the effect of feeding Lactobacillus casei YS on the growing performance and gastrointestinal flora of the suckling piglets, which were delivered from 2 heads of three-way crossbred(Landrace$\times$Large White$\times$Duroc) pigs, for 4 weeks. The results from the present study was summarized as follows. Average body weight gains of feeding group was slightly better than that of control group and diarrhea was prevented by successive 7 days feeding. Population levels of lactic acid bacteria were maintained about 107 colony forming unit(cfu) per gram of the contents in both feeding and control group at upper parts of small intestine. In this part, coliform count was greatly reduced in (ceding group but not in control group. pH values of the intestinal contents were gradually decreased especially at the upper part of alimentary track of feeding group. Among lactic acid bacteria, L. salivarius, L. cases and L. fermentum were found most predominant strains in feeding group, Wheareas L. salivarius, L. acidophilus and L. cunts in control group. In the other hand, Escherichia coli recovered from scouring pigs were resistant to the drug such as streptomycin, ampicillin and sensitive to gentamycin and neomycin in vitro test.
Anaerobic bacteria are suggested to be potential source for new antibiotics. In order to search for antibiotics from domestic origin, we collected 800 soil samples across Korean locations and could isolate as many as 989 anaerobic strains. Among them 10, strains were found to have good producing capacity of antibiotics. An anaerobe was finally selected due to secreting antibiotics having high antimicrobial activity towards multiple resistant microorganism(E coli JM 83) transformed by genetic engineering technique. Its morphological, physiological and biochemical charateristics were investigated, together with antimicrobial spectrum therefrom. On antimicrobial spectrum study, substance secreted from this strain, had no activities to fungus and yeast. The selected strain showed G(+) and coccal shape, on Gram, staining and electron scanning microscopy, respectively. Biochemically this strain utilized glucose, fructose lactose, sucrose, but did not arabinose, cellulose, rhamnose, sorbitol, trehalose, mannitol. Catalase test showed negative property. Optimal growth temperature was $37^{\circ}C$. The results obtained above suggest this strain Streptococcus faecium subspp. and we named it Streptococcus sp. An-21-1.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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