This survey was carried out to detect the residual antibiotics in muscles of slaughter cattle from slaughter houses in Seoul from 1991 to 1998 using by EEC-4-plate method. The results were summarized as follows ; 1. Residual materials were detected in 402 samples(3.12%) by EEC-4-plate method. The detection ratios were highest in 1995 (9.51%), autumn (39.8%), Kyeonggi province (54.2%), Holestain(60.4%) and male(50.7%). 2. Residual antibiotics for 18 samples were classified as TCs(72.2%), sulfonamides(38.8% ) and $\beta$-lactams(5.5%) by HPLC 3. The residual concentration of oxytetracycline, sulfonamide and $\beta$-lactams were 0.34~15.93ppm, 0.17~1.18ppm and 0.06ppm, respectively.
Overuse of veterinary antibiotics threats public health and surrounding environment due to the occurrence of antibiotic resistant bacteria. The objective of this study was to evaluate the antibiotic's concentrations of tetracycline (TC), chlortetracycline (CTC), and oxytetracycline (OTC) in a tetracycline group (TCs), sulfamethazine (SMT), sulfamethoxazole (SMX), and sulfathiazole (STZ) in a sulfonamide group, lasalocid (LSL), monensin (MNS), and salinomycin (SLM) in a ionophore (IPs), and tylosin (TYL) in a macrolide (MLs) group from soil, water, and sediment samples adjacent to a cattle manure composting facility. For all samples of soil, water, and sediment, the highest concentrations were detected in TCs among the tested antibiotics because of its higher annual consumption in veterinary farms, Korea and its higher cohesiveness with divalent or trivalent cations in soil. Moreover, the concentrations of residual antibiotics in September were generally higher than in June because of heavier rainfall in June. We suggest that continual monitoring and developing guideline of antibiotics are needed to control residual antibiotics in the environment.
Antibiotics have been used for treating human and animal disease and enhancing growth of cattle, swine, and poultries. However, overused antibiotics can be released into the environment and produce antibiotic resistance genes (ARGs) in the environment. Main objective of this research was to monitor residual of antibiotics in solid matrix such as manure, wastewater sludge, soil and sediment. Total of six antibiotics, Chlortetracycline (CTC), Oxytetracycline (OTC), Tetracycline (TC), Sulfamethazine (SMT), Sulfamethoxazole (SMX), Sulfathiazole (STZ), used for both human and animal was monitored. Result showed that the detection frequency of 6 antibiotics was ordered SMT (100%) > TC = CTC (75%) > OTC (38%) > STZ (13%) > SMZ (0%) and the highest concentration ($309.83{\mu}g\;kg^{-1}$, SMT) was observed in manure. Comparing residual concentration of antibiotics (TC, CTC, and OTC) in soil and sediment, higher concentration was observed in sediment indicating that dissolved forms of antibiotics are released into river and sorbed into sediment particle. In conclusion, monitoring for residual of antibiotics in the environment is necessary and more research should be conducted to verify the source of antibiotic release.
After application of veterinary antibiotics, they may be partially metabolized before they are excreted by feces or urine either as unaltered form or as metabolites. Residual antibiotics enter the adjacent agricultural environments by spraying manure-based compost and liquid fertilizer on farmlands and lead to secondary pollution. The objective of this study was to compare the residual concentrations of 6 veterinary antibiotics by different production stages of liquid fertilizer from livestock manure recycling facilities. The relationship between concentration change of the residual antibiotics and the amount of liquid fertilizer component was also assessed. Pre-treatment showed the recovery of 63.4-106.7% at ppb level and the limit of quantification of 0.009-0.037 ㎍/L.As the result of analyzing the relationship between the residual concentrations of antibiotics and the amount of N component in liquid fertilizer by different production stages, the residual concentrations of antibiotics and N tended to decrease as the stabilization period elapsed during the liquid fertilization process. Average concentrations of sulfamethazine in raw materials, middle and final products of liquid fertilizer were 40.85, 26.17, 3.54 ㎍/L, respectively. Those of chlortetracycline decreased from 2.32 to 1.25 ㎍/L. The other 4 antibiotics also showed a decreasing trend by different production stages of liquid fertilizer. The amount of liquid fertilizer component N decreased from 0.21 to 0.096% by production stages of liquid fertilizer. It is considered that the correlation between residual antibiotic concentrations and N content can be applied as basic data for setting antibiotic reduction indicators.
To detect and quantitation residual antibiotics and antibacterial agents in meats, we performed a biological assay employing the three microorganisms Bacillus subtilis ATCC 6633, Micrococcus luteus ATCC 9341, and Bacillus cereus var. mycoides ATCC 11778 for the screening purpose and developed a Gas Chromatography-mass Spectrometry(GC/MS) analysis for the confirmation and quantiation. In the biological assay (paper disk method), three test solution are used depending on the character of the residual antibiotics and antibacterial agents, follow by a simple clean up procedure which includes homogenization with Mcilvaine buffer, defatting with includes homogenization with Mcilvaine buffer, defatting with hexane, extraction with chloroform, clean-up by Sep-Pak $C_{18}$ and Bakerbond SPE carboxylic acid column. The chloroform layer is used for the analysis of sulfa agents. macrolides antibiotics and antibacterial agents, Adsorbed materials in the Sep-Pak $C_{18}$ were also employed for th analysis of penicillins and tetracyclines. Effluents from the Sep-Pak $C_{18}$ were cleaned-up one more by Bakerbond 10 SPE COOH column and employed for the analysis of aminoglycosides. In the instrumental analysis by using the GC/MSD, residual antibiotics and antibacterial agent were quantitated by selected ion monitoring (SIM) mode after derivatization. A simultaneous analysis of six residual antibiotic and antibacterial agent such as oxytetracycline, penicillin, ampicillin, choliraphenicol and thiamphenicol was developed with simple cleanup procedures revealing good recovery and reproducibility. Also, simultaneous detection of macrolides antibiotics such as erythromycin, spiramycin, and oleandomycin was developed after acid hydrolysis due to their large molecular structures. Because of the high reproducibility and selectivity of these two methods, it is very desirable that the combination of the two methods be used in the bioassay for the screening of residual antibiotics and antibacterial agent and that GC/MSD analysis be used for the confirmation and quantitation.
The pollution of antibiotics is a major cause of spreading antibiotics resistant bacteria in the environment. Applications of ozonation, UV, and ${\gamma}-ray$ irradiations have been introduced to remove antibiotics in the effluents from wastewater treatment system. In this study, we compared the chemical (HPLC) and biological (antimicrobial susceptibility test, AMS) assays in measuring of the concentrations of residual antibiotics after ${\gamma}-ray$ and UV irradiation. Most samples were degraded by ${\gamma}-ray$ irradiation (1~2 kGy). However, lincomycin and tetracycline were not degraded by UV irradiation. The concentration of residual antibiotics, that was treated with ${\gamma}-ray$ and UV irradiation, measuring by bioassay was similar to HPLC. The concentrations of ${\gamma}-ray$ irradiated cephradine measured by AMS test were 2 times higher than that of HPLC assay, indicating AMS test is more sensitive than HPLC assay. These results indicate that ${\gamma}-ray$ irradiation technique is more useful than UV irradiation, and biological assay is more useful to detect the antibiotics and toxic intermediates in antibiotics degradation.
This test process on screening method for the detection of residual antibiotics in milk is simple, economic, sensitive to residual antibiotics and was given approval international organs. Thus, this study was carried out the comparison of Disk assay method and TTC-II method for sensitivity and minimum detectable range of antibiotics in raw milk. The results of this study was summarized as follows ; 1. The number of samples requested for treatment of mastitis was 198 samples. Comparison or analytical results among the methods of TTC-II, disk assay and Delve sp was that TTC-II 37 samples(18.6% ), Disk assay 125samples(63.1%), Delve SP 130 samples(65.7% ) reacted positively. Conformity rate of Delve SP and Disk assay was 70%. 2. Detectable limits of disk assay method in some antibiotics were more sensitive than those of official method(0.05-0.0025ppm in the $\beta$-lactams, 1ppm in two aminoglycoside, 0.2 ppm in one tetracycline, similar in one macrolide) 3. For sensitivity of residual sulfonamides TTC-II was much more sensitive than disk assay. Detectable limits of sulfamethazine and sulfadimethoxine were 30 to 50ppm levels. 4. The best medium preservation period is 1-2 days. 5. Concentration of brome cresol purple related to resistance for B stearothermophilus culture was 24ppm/ml. These results show that disk assay method for screening detection of antibiotics residuces in milk is worthy of use.
A sensitive and simple analytical system for the simultaneous determination of residual oxytetracycline, tetracycline, and doxycycline in honey was described, and that the analytical method for determination of residual propionic acid in honey was established. Experimental subjects were purchased four kinds of honey, native kind honey, acaccia honey, mixed floral honey, chestnut honey in Kyung Sang Nam Do. Several microbiological methods are available to determine tetracycline antibiotecs(TCs) in foods but their precision apears to be variable and the specificity is questionable. These methods are considered to be not suitable for analysis of tetracycline antibiotics in honey because honey itself has bacteriostatic action. For determination of tetracycline antibiotics in honey, therefore the High Performance Liquid Chromatography(HPLC) method was applied, and the propionic acid were determined by Gas Chromatography(5.C). Ethylacetate, as an extract solvent, was found to be suitable for seperation of TCs in honey, but methanol and acetone were not. The recoverly rate of Oxytetracycline(OTC), Tetracycline(TC), Doxycycline(DC) from honey spiked at a level of 10 $\mu $g/g were 97%, 89%, and 91%, respectively. The cailbration curve in TCs was linear expression from 2$\mu $g/ml to 10$\mu $g/ml. As the results of analysis, the residual tetracycline antibiotics were not detected in the 100 samples of honey. The recovery rate of propionic acid from honey spiked at level of 10$\mu $g/g was 98.3% , and the calibra lion curves were linear expression from 21$\mu $g/ml to 101$\mu $g/ml. As the results of analysis, the residual propionic acid was not detected in the 100 samples of honey. Retention time(min) of OTC, DC, and TC were 3.35, 4.61, and 5.30 minutes at the conditions of table 2, respectively, and retention time(min) of propionic acid was 3.50 minutes at the conditions of table 3. The residual TCs and propionic acid were not detected in the 100 samples of honey, but there is a possibility that antibiotics or propionic acid will be to remain in honey if they are used during product period in order to prevent putrefaction of honey-bee.
Antibiotic pollution is one of the factors contributing to the spread of antibiotic-resistant bacteria in the environment. Advanced oxidation and irradiation processes have been introduced to eliminate antibiotics from water and wastewater. However, few studies have reported the toxic effects of residual antibiotics and their byproducts induced by a treatment system. In this study, we compared the efficacies of chemical (high-performance liquid chromatography (HPLC)) and biological (antimicrobial susceptibility test) assays for measuring the concentrations of residual antibiotics after gamma irradiation for degrading amoxicillin, cephradine, lincomycin, and tetracycline. The concentrations of residual antibiotics estimated using the two assay methods were almost identical, except cephradine. In the case of cephradine, inhibited bacterial growth was observed that was equivalent to twice the concentration measured by HPLC in the samples subjected to gamma irradiation. The observed inhibition of bacterial growth suggested the generation of potentially toxic intermediates following antibiotic degradation. These results indicate that biological and chemical assays should be used in concert for monitoring antibiotic contamination and the toxic derivatives of antibiotic degradation. The results demonstrate that these four antibiotics can be decomposed by 2.0 kGy gamma-irradiation without toxic effects of their byproducts.
Recently, as concern about the residual antibiotics in milk increase, the detection methods of residual antibiotics used extensevely at the present time were investigated and compared to their properties and the detection limits of variable antibiotics. At first, comparactive tests of the detectable sensitivity of 4 test organisms, B. cereus, B. subtilis, M.luteus, B.stearothermophilus C-953, were performed by disc assay. As a result, B.stearothermophilus was the most sensitive strain of all other strains and showe the detect limit of 5-50 ppb for penlicillins (PCs). And also, B.subitilis was showed the more effective detection limit, 200-400 ppb, for aminoglycosides (AGs) and M.luteus was showed predominant sensitivity , 50-500 ppb for macrolides(MLs) and B.cereus was the most sensitive strain for tetracyclines (TCs) and showed the detection limit of 100-400 ppb. Therefore, each test strains were showed a different sensitivity in the detection of the different antibiotic families. When the detection limit of disc assay and other methods were compared, TTCmethod was less sensitive than other methods showing 5-50 ppb detectable lebel for PCs. Also, for the detection of other antibiotic families TTC method was showed the worst sensitivity and Delvo and Charm Farm tests were similar to the detectable properties of AGs and MLs. Although disc assay was showed the similar detection limit for PCs with Delvo and Charm Farm, it was more widely effective for the detection of kanamycin, erythromycin, chlortetracycline, doxycycline, verginiamycin and so on than Delvo or Charm Farm. CharmII test was showed the best sensitivity for the most of antibiotics except neomycin and gentamycin. But it was necessary that different tests must be performed to each antibiotic family and so it was regarded that the effectiveness of that method was low.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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