In this study, we attempted to isolate novel mast cell-stimulating molecules from Staphylococcus aureus. Water-soluble extract of S. aureus cell lysate strongly induced human interleukin-8 in human mast cell line-1 and mouse interleukin-6 in mouse bone marrow-derived mast cells. The active molecule was purified to homogeneity through a $C_{18}$ reverse phase HPLC column. By determination of its structure by MALDITOF and $^1H$- and $^{13}C$-NMR, adenosine was revealed to be responsible for the observed cytokine induction activities. Further studies using 8-sulfophenyl theophylline, a selective adenosine receptor blocker, verified that purified adenosine can induce interleukin-8 production via adenosine receptors on mast cells. Moreover, adenosine was purified from S. aureus-engulfed RAW264.7 cells, a murine macrophage cell line, used to induce phagocytosis of S. aureus. These results show a novel view of the source of exogenous adenosine in vivo and provide a mechanistic link between inflammatory disease and bacterial infection.
Objectives : US extract is a mixture of each extract of Ulmi cortex and Smilacis rhizoma. In this study, we investigated the antioxidant, anti-inflammatory, antibacterial, and ovoprotective effects of US extract in in vitro model to identify potential candidates for improving female reproductive function. Methods : The antioxidant activity of US extract was measured using 1,1-diphenyl- 2-picrylhydrazyl free radical and superoxide anion radical scavenging assays. The anti-inflammatory effect of US extract on lipopolysaccharide (LPS)-stimulated RAW 264.7 cells were determined with a nitric oxide (NO) assay, enzyme linked immunosorbent assays, and western blots analysis. The antibacterial activity of US extract against vaginitis infection microorganisms were determined with disc diffusion and minimum inhibitory concentration assays. The ovoprotective effect of US extract on 4-vinylcyclohexene diepoxide (VCD)-induced ovotoxicity in CHO-K1 cells were evaluated with a cell viability assay. Result : US extract showed good antioxidant capacity and inhibited LPS-induced NO production as well as iNOS and COX-2 expression and secretion of pro-inflammatory cytokine IL-6 without affecting the cell viability. It showed significant clear zones for Staphylococcus aureus and Candida albicans but did not indicate the clear zones for Escherichia coli and Enterococcus faecium. VCD-induced ovotoxicity in CHO-K1 cells was significantly reduced by US extract pre-treatment. Conclusions : These results demonstrate that US extract has antioxidant activity, anti-inflammatory effects on the LPS-stimulated macrophages, antibacterial activity against vaginitis infection microorganisms, and protective effects on the ovarian cells against VCD-induced ovotoxicity. These findings suggest that the US extract can be used as new prescriptions, supplements, functional foods, and cosmetics for improving female reproductive function.
Objectives: The purpose of this study was to investigate the effects of Angelicae pubescentis Radix water extract (ACE) on immune properties in macrophage cells. Methods: The cells were divided into two groups: As a control, the first was not treated with ACE, and the other was treated with ACE. Together with the cell viability, productions of nitric oxide (NO) and cytokines such as interleukin (IL)-$1{\beta}$, IL-6, and tumor necrosis factor (TNF)-${\alpha}$ by treating of ACE were monitored. Results: 1. There was no decrease of the cell viability after 24 hr incubation, but a significant decrease after 48 hr incubation with all four concentrations (25, 100, 200, and $400\;{\mu}g/m{\ell}$) of ACE. 2. A significant increase in the production of NO was observed in the concentrations above $50\;{\mu}g/m{\ell}$ of ACE after 24 hr incubation. 3. Further, after 48 hr incubation, the critical concentration of ACE for the increase was reduced to $25\;{\mu}g/m{\ell}$. 4. The production of (IL)-$1{\beta}$ significantly increased with the ACE concentrations of 100 and $200\;{\mu}g/m{\ell}$ after 24 hr incubation. 5. The production of IL-6 significantly increased with the ACE concentration of $200\;{\mu}g/m{\ell}$ after 24 hr incubation. 6. A significant increase in the production of (TNF)-${\alpha}$ was detected with ACE concentrations of 50, 100, and $200\;{\mu}g/m{\ell}$ after 24 hr incubation. Conclusions: These show that ACE increases mouse macrophage NO production at concentrations above $50\;{\mu}g/m{\ell}$, and the cytokines ((IL)-$1{\beta}$, IL-6, and (TNF)-${\alpha}$) at concentrations above $200\;{\mu}g/m{\ell}$. These results suggest that ACE improves macrophage immune property.
Thermal burn injury induces inflammatory cell infiltrates in the dermis and thickening of the epidermis. Following a burn injury, various mediators, including reactive oxygen species (ROS), are produced in macrophages and neutrophils, exposing all tissues to oxidative injury. The anti-oxidant activities of flavonoids have been widely exploited to scavenge ROS. In this study, we observed that several flavonoids-kaempferol, quercetin, fisetin, and chrysin-inhibit LPS-induced IL-8 promoter activation in RAW 264.7 cells. In contrast with quercetin and fisetin, pretreatment of kaempferol and chrysin did not decrease cell viability. Inflammatory cell infiltrates in the dermis and thickening of the epidermis induced by burn injuries in mice was relieved by kaempferol treatment. However, the injury was worsened by fisetin, quercetin, and chrysin. Expression of TNF-a induced by burn injuries was decreased by kaempferol. These findings suggest the potential use of kaempferol as a therapeutic in thermal burn-induced skin injuries.
The anti-inflammatory effects of Sargassum fulvellum water extracts (SFWE) were investigated using lipopolysaccharide (LPS)-induced inflammatory response in this study. To examine the potential anti-inflammatory properties of SFWE, the NO, TNF-${\alpha}$, IL-6, IL-$1{\beta}$, and cell proliferation were measured. It was confirmed that the NO and TNF-${\alpha}$ secretion were significantly suppressed when SFWE was added to LPS-stimulated RAW 264.7 cells. Moreover, the expression of IL-6 and IL-$1{\beta}$ cytokines was suppressed by SFWE in a dose-dependent manner. Especially, IL-6 inhibition activities were over 50% at 1% of SFWE. The cytotoxicity of SFWE and the proliferation of macrophages was measured by MTT assay. As a result, there was no cytotoxicity in the macrophage proliferation treated with SFWE compared to the control. In conclusion, these results suggested that the SFWE may have significant effects on inflammatory factors and can be a potential anti-inflammatory therapeutic materials.
The antitumor components of the protoplast fusants of Lentinula edodes and Ganoderma lucidum were examined for immunological activity to elucidate the mechanism of their antitumor activity. They did not show any direct cytotoxicity against tumor cells. But being examined for immunopotentiation activity, they increased the number of colonies in the bone marrow stem cells to 3.0 times. They also increased the activities of the acid phosphatase in activated macrophages to 2.1 times and the secretion of nitric oxide in RAW 264.7 to 2.2 times, respectively. They activated the components of the alternative complement pathway. In humoral immunity. they increased the activities of the alkaline phosphatase in differentiated B cells to 1.6 times and the number of plaque forming cells to 1.8 times, respectively. In cellular immunity, they restored the depressed response of delayed type hypersensitivity in tumor bearing mice to normal level.
The seeds of Raphanus sativus L. (RSL) and Phaseolus calcaratus Roxburgh (PHCR), the root of Scutellaria baicalensis (SB), and the flower of Lonicera japonica (LJ) have been traditionally used as herbal medicines for anti-inflammation. Unlike the SB and LJ, little information is available for the scientific bases that show the anti-inflammatory mechanisms of RSL and PHCR. In this study, we prepared boiled water extracts from the medicines and determined their potentials in inhibiting nitric oxide (NO) production, cyclooxygenase-2 (COX-2) expression, and tumor necrosis factor (TNF)-$\alpha$ and interleukin (IL)-6 secretion in lipopolysaccharide (LPS)-stimulated RAW 264.7 cells. The effects of the medicines on serum IgE levels in ovalbumin (OVA)-administrated mice were also studied. The medicines inhibited production of TNF-$\alpha$ and IL-6, and COX-2 expression in LPSstimulated macrophages. Especially, PHCR water extract showed more potent inhibition on TNF-$\alpha$ production than SB and LJ extracts, but RSL extract did not exert these effects. Similar to the cases of SB and LJ, PHCR extract prevented the phosphorylation of $I{\kappa}B{\alpha}$ and c-Jun, and the activation of NF-${\kappa}B$-DNA binding. Further, oral supplementation of PHCR extract attenuated significantly serum levels of total and OVA-specific IgE in OVAtreated animals. These results suggest a possibility that PHCR water extract can be used for the treatment of inflammatory and allergic diseases.
Lee, Young Ji;Han, Jeong Yoon;Lee, Chang Geun;Heo, Kyu;Park, Se Il;Park, Yoo Soo;Kim, Joong Sun;Yang, Kwang Mo;Lee, Ki-Ja;Kim, Tae-Hwan;Rhee, Man Hee;Kim, Sung Dae
Journal of Ginseng Research
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제38권3호
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pp.208-214
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2014
Background: In previous work, we reported that Korean Red Ginseng saponin fraction (RGSF) showed anti-inflammatory activities in vitro and in vivo. Methods: The present study investigated the radioprotective properties of RGSF by examining its effects on ionizing radiation (IR)-enhanced and lipopolysaccharide (LPS)-mediated inflammatory responses in murine macrophage cells. Results: RGSF induced strong downregulation of IR-enhanced and LPS-induced proinflammatory responses such as nitric oxide (NO) production (Inhibitory Concentration $50(IC_{50})=5.1{\pm}0.8{\mu}M$) and interleukin-$1{\beta}$ levels. RGSF was found to exert its radioprotective effects by inhibition of a signaling cascade that activated checkpoint kinase 2enuclear factor-${\kappa}B$. In addition, RGSF strongly inhibited IR-enhanced LPS-induced expression of hemoxyganase-1, implying that the latter may be a potential target of RGSF. Conclusion: Taken together, our data suggest that RGSF can be considered and developed for use as an effective radioprotective agent with minimal adverse effects.
Kim, Ju-Won;Jo, You-Young;Kweon, Hae Yong;Kim, Dae-Won;Kim, Seong-Gon
Maxillofacial Plastic and Reconstructive Surgery
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제40권
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pp.10.1-10.6
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2018
Background: The objective of this study was to evaluate the changes in gene expression after incubation of cells with proteins released from different silk mat layers. Methods: A silk cocoon from Bombyx mori was separated into four layers of equal thickness. The layers were numbered from 1 to 4 (from the inner to the outer layer). The proteins were released by sonication of a silk mat layer in normal saline. The concentration of proteins was determined by spectrophotometry. They were incubated with RAW264.7 cells, and changes in the expression of genes were evaluated by cDNA microarray analysis and quantitative reverse transcriptase-polymerase chain reaction (qRT-PCR). Results: Layer 1 and 4 groups had higher protein concentrations compared to those in layer 2 and 3 groups. The genes associated with inflammation and angiogenesis showed significantly higher expression in layer 1 and 4 groups. The results of qRT-PCR were in agreement with those of the cDNA microarray analysis. Conclusions: The silk mat from the middle portion of the silkworm cocoon yielded a lower protein release and caused an insignificant change in the expression of genes that are associated with inflammation and angiogenesis.
Background: Panax ginseng Meyer (Araliaceae) is a highly valued medicinal plant in Asian regions, especially in Korea, China, and Japan. Chemical and biological studies on P. ginseng have focused primarily on its roots, whereas the seeds remain poorly understood. This study explores the phytochemical and biological properties of compounds from P. ginseng seeds. Methods: P. ginseng seeds were extracted with methanol, and 16 compounds were isolated using various chromatographic methods. The chemical structures of the isolates were determined by spectroscopic data. Antiinflammatory activities were evaluated for triterpene and steroidal saponins using lipopolysaccharide-stimulated RAW264.7 macrophages and THP-1 monocyte leukemia cells. Results: Phytochemical investigation of P. ginseng seeds led to the isolation of a novel triterpene saponin, pseudoginsenoside RT8, along with 15 known compounds. Pseudoginsenoside RT8 exhibited more potent antiinflammatory activity than the other saponins, attenuating lipopolysaccharide-mediated induction of proinflammatory genes such as interleukin-1β, interleukin-6, inducible nitric oxide synthase, cyclooxygenase-2, and matrix metalloproteinase-9, and suppressed reactive oxygen species and nitric oxide generation in a dose-dependent manner. Conclusion: These findings indicate that pseudoginsenoside RT8 has a pharmaceutical potential as an antiinflammatory agent and that P. ginseng seeds are a good natural source for discovering novel bioactive molecules.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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