인삼열매는 진세노사이드 함량이 인삼뿌리와 다르게 나타나며, 항 고혈당효과, 항암활성 등의 다양한 약리적 효능이 있다고 보고되고 있다. 본 연구에서는 인삼열매를 수확하여 Rb1 및 Rg1 등의 진세노사이드 함량이 풍부한 4회 증포 인삼열매와 Rg3를 포함한 총 진세노사이드 함량이 풍부한 7회 증포 인삼열매를 혼합하여 열수추출물과 에탄올 추출물을 얻었고, 이를 L. plantarum으로 발효시킨 추출물을 이용하여 액상 스틱을 제조한 후 10, 25, $35^{\circ}C$에서 4개월 동안 저장하면서 진세노사이드 함량 변화 및 이화학적 특성을 조사하였다. 인삼열매 추출물을 함유하는 액상스틱을 $35^{\circ}C$에서 4개월 동안 저장한 후에 pH는 4.81에서 3.81로 저하되었으나, 산도와 고형분 함량은 변화하지 않았다. DPPH 소거능은 $10^{\circ}C$와 $25^{\circ}C$에서 4개월 동안 저장했을 때 큰 변화를 나타내지 않았으나 $35^{\circ}C$에서 4개월 저장했을 때 크게 감소하였다. L값(명도)와 b값(황색도)는 저장기간 동안 감소하였으나, a값(적색도)는 변화하지 않았다. Rg1, Rb1, F2, Rg3(S), Rg3(R), Rg5 등 6종류의 총 진세노사이드 함량은 10, 25, $35^{\circ}C$에서 4개월 동안 저장하는 동안에 큰 변화가 없었으며, 일반세균과 대장균군도 검출되지 않았다.
피부의 장벽 구조는 표피의 각질 형성세포의 분화과정에 의해서 생성된다. 이 구조는 케라틴 단백질로 구성되는 각질세포와 그 사이를 채우고 있는 세포간 지질로 구성된다. 이때 표피의 기저층의 세포의 막을 이루던 인지질 등의 성분은 분해되어 없어지고, 세라마이드 등이 성분이 신규로 합성되어 각질층의 세포간 지질을 구성한다. 본 연구에서는 피부 장벽의 세포간 지질 구조의 패킹과 장벽기능에 진세노사이드 Rg3성분이 미치는 영향을 확인하였다. 이를 위해 3D피부 세포의 분화과정에 Rg3성분을 처리하였다. 3D피부를 대상으로 FT-IR 및 TEWL를 분석한 결과, 각질 세포간 지질의 orthorhombic패킹이 강화되고 장벽기능이 강화되는 것을 확인하였다. 또한 HaCaT세포에 Rg3를 처리한 경우, 긴 체인 길이의 지질을 합성하는 EVOL1 및 EVOL4의 발현 증가와 짧은 길이의 세라마이드의 합성을 당하는 CERS6의 감소 그리고 피토스핑고신을 사용하는 세라마이드를 분해시키는 ACER6의 증가를 검출하였다. 이를 통해 Rg3가 표피 분화 과정 중 지질의 합성에 영향을 주어 장벽 기능 변화를 가져올 가능성을 제시하였다.
본 연구에서는 인삼의 수용성 물질의 추출 수율을 높이고 압출 온도가 ginsenoside 및 당의 변화에 미치는 영향을 조사하기 위하여 압출온도를 달리하여 제조한 압출성형 백삼의 추출수율과 성분의 변화를 조사하였다. 인삼의 증류수 추출 수율은 압출성형 백삼이 가장 높았으며 백삼이 가장 낮았다. 압출 성형백삼의 경우는 압출 온도가 높을수록 추출 수율이 증가하였다. 또한 증류수 추출시 80% 에탄올 추출시보다 추출수율이 증가하였다. 조사포닌 함량은 압출 성형 백삼이 가장 높았으며 이는 압출 온도가 증가함에 따라 조사포닌 함량도 증가하였다. 11종의 총 ginsenoside함량은 홍삼이 가장 높았다. 백삼에서는 Re의 함량이 가장 높았고, 홍삼에서는 Rg1, Rg3, Rb2가 가장 높았다. 압출성형 백삼에서는 Rg2, Rh1 및 Rh2의 함량이 증가되었다. 인삼의 유리당 함량은 홍삼이 가장 높았으며 압출 성형 인삼이 가장 낮았다. 인삼의 명도(L)값은 백삼이 가장 높았으며 압출 성형백삼이 가장 낮았다. 적색도(a)와 황색도(b) 값은 압출성형 백삼이 가장 높았다. 이상의 실험에서 압출 성형 백삼은 정수로 추출 시 추출 수율이 백삼에 비해 25%이상 높았고, 조사포닌 함량도 약 20% 높았다. 또한 Rg2, Rh1, Rh2, Rg3의 ginsenoside 함량이 백삼에 비해 월등히 높았다. 이는 압출 성형 백삼을 이용하여 제품 개발 시 높은 추출 수율, 사포닌 함량이 높은 제품을 만들 수 있을 가능성을 보여 주는 결과라 생각된다.
팽화홍삼으로부터 용매추출, 용매분획 및 silica gel column chromatography를 반복하여 두 개의 화합물을 분리하였다. 이들 두 화합물의 결정특성, 녹는점, 비선광도, Infrared spectrum 분석 결과, TLC에서의 Rf값, HPLC에서의 retention time 및 NMR 데이터를 측정하여 고찰한 결과 두 개의 화합물은 20(S)-ginsenoside Rg3와 ginsenoside Rg5임을 확인할 수 있었다. 특히 $^{1}H$- 및 $^{13}C$-NMR 데이터를 HSQC 및 HMBC와 같은 2D-NMR 실험을 통하여 더욱 정확하게 동정하였다.
Ginsenoside Rg3 (G-Rg3) is one of protopanaxadiol ginsenosides characteristic of red ginseng, steamed and dried ginseng (Panax ginseng), which has recently attracted much attention for its antitumor properties in vitro and in vivo animal models. Experimental studies have demonstrated that it could promote cancer cell apoptosis, inhibit cancer cell growth, the apoptosis of cancer cells, adhesion, invasion and metastasis, and also prevent an angiogenetic formation in prostate, breast, ovarian, colorectal, gastric, liver and lung cancer etc. It has shown the antitumor activities by modulation of diverse signaling pathways, including regulation of cell proliferation mediators (CDKs and cyclins), growth factors (vascular endothelial growth factor), tumor suppressors (p53 and p21), cell death mediators (caspases, Bcl-2, Bax), inflammatory response molecules ($NF-{\kappa}B$ and COX-2), protein kinases (JNK, Akt, and AMP-activated protein kinase) and Wnt/${\beta}$-catenin signaling. In addition, the combination of Rg3 and chemotherapeutic agents have synergistically enhanced therapeutic efficacy and reduced antagonistically side effects. Furthermore, it can reverse the multidrug resistance of cancer cells, prolong the survival duration and improve life quality of cancer patients. Taken together, accumulating evidences could provide the potential of G-Rg3 in the treatment of cancers and the feasibility of further randomized placebo controlled clinical trials.
This study was performed to enhance contents of low molecular weight ginsenoside Rh2 and Rg3 using an ultra high pressure and steaming process in wild cultured-Root in wild ginseng. For selective increase in contents of Rg3 and Rh2 in cultured wild ginseng roots, an ultra high extraction was applied at 500MPa for 20 min which was followed by steaming process at $90^{\circ}C$ for 12 hr. It was revealed that contents of ginsenosides, Rb1, Rb2, Rc and Rd, were decreased with the complex process described above, whereas contents of ginsenoside Rh2 and Rg3 were increased up to 4.918 mg/g and 6.115 mg/g, respectively. In addition, concentration of benzo[${\alpha}$]pyrene in extracts of the cultured wild ginseng roots treated by the complex process was 0.64 ppm but it was 0.78 ppm when it was treated with the steaming process. From the results, it was strongly suggested that low molecular weight ginsenosides, Rh2 and Rg3, are converted from Rb1, Rb2, Rc, and Rd which are easily broken down by an ultra high pressure and steaming process. This results indicate that an ultra high pressure and steaming process can selectively increase in contents of Rg3 and Rh2 in cultured wild ginseng roots and this process might enhance the utilization and values of cultured wild ginseng roots.
Background: Ginsenosides have been reported to have many health benefits, including anti-inflammatory effects, and the resolution of inflammation is now considered to be an active process driven by M2-type macrophages. In order to determine whether ginsenosides modulate macrophage phenotypes to reduce inflammation, 11 ginsenosides were studied with respect to macrophage polarization and the resolution of inflammation. Methods: Mouse peritoneal macrophages were polarized into M1 or M2 phenotypes. Reverse transcription-polymerase chain reaction, Western blotting, and measurement of nitric oxide (NO) and prostaglandin $E_2$ levels were performed in vitro and in a zymosan-induced peritonitis C57BL/6 mouse model. Results: Ginsenoside $Rg_3$ was identified as a proresolving ginseng compound based on the induction of M2 macrophage polarization. Ginsenoside $Rg_3$ not only induced the expression of arginase-1 (a representative M2 marker gene), but also suppressed M1 marker genes, such as inducible NO synthase, and NO levels. The proresolving activity of ginsenoside $Rg_3$ was also observed in vivo in a zymosan-induced peritonitis model. Ginsenoside $Rg_3$ accelerated the resolution process when administered at peak inflammatory response into the peritoneal cavity. Conclusion: These results suggest that ginsenoside $Rg_3$ induces the M2 polarization of macrophages and accelerates the resolution of inflammation. This finding opens a new avenue in ginseng pharmacology.
Background: Although the tumor-suppressive effects of ginsenosides in cell cycle have been well established, their pharmacological properties in mitosis have not been clarified yet. The chromosomal instability resulting from dysregulated mitotic processes is usually increased in cancer. In this study, we aimed to investigate the anticancer effects of ginsenoside Rg1 on mitotic progression in cancer. Materials and methods: Cancer cells were treated with ginsenoside Rg1 and their morphology and intensity of different protein were analyzed using immunofluorescence microscopy. The level of proteins in chromosomes was compared through chromosomal fractionation and Western blot analyses. The location and intensity of proteins in the chromosome were confirmed through immunostaining of mitotic chromosome after spreading. The colony formation assays were conducted using various cancer cell lines. Results: Ginsenoside Rg1 reduced cancer cell proliferation in some cancers through inducing mitotic arrest. Mechanistically, it inhibits the phosphorylation of histone H3 Thr3 (H3T3ph) mediated by Haspin kinase and concomitant recruitment of chromosomal passenger complex (CPC) to the centromere. Depletion of Aurora B at the centromere led to abnormal centromere integrity and spindle dynamics, thereby causing mitotic defects, such as increase in the width of the metaphase plate and spindle instability, resulting in delayed mitotic progression and cancer cell proliferation. Conclusion: Ginsenoside Rg1 reduces the level of Aurora B at the centromere via perturbing Haspin kinase activity and concurrent H3T3ph. Therefore, ginsenoside Rg1 suppresses cancer cell proliferation through impeding mitotic processes, such as chromosome alignment and spindle dynamics, upon depletion of Aurora B from the centromere.
발효식품으로부터 분리한 젖산균 중 ${\alpha}$-rhamnosidase 효소활성을 보유한 젖산균 12점을 선별하였다. 효소활성이 우수한 Weissella confuse 1점, L. pentosus 1점과 효소활성이 우수하였던 4점의 L. plantarum 균주를 사용하여 진세노사이드 Rb1과 Re를 Rg1, Rg5로 각각 생물전환하였다. L. plantarum MBE/L2990 균주를 사용한 생물전환반응에서 Rg1과 Rg5의 함량이 각각 0.58 mg, 0.24 mg 가량 증가하였으며, 대조구로 사용한 L. plantarum KCTC21004 균주에 비해 약 56% 및 42% 우수한 생물전환 효율이었다. L. plantarum MBE/L2990 균주는 한국미생물자원센터에 KCTC18529P로 기탁하였다.
In order to develop the radio-immunoassay procedure for the ginsenoside $Rg_1$ we prepared the $Rg_1-BSA$ conjugate and $Rg_1-tyramine$ conjugate by condensing the $Rg_1-azide$, which was prepared by a series of six step chemical modification of the $Rg_1-side$ chain, with bovine serum albumin(BSA) or with tyramine. Rabbits were immunized by repeated injection of $Rg_1-BSA$ conjugate with Freund's Complete Adjuvant for 5 month long to obtain very potent $anti-Rg_1$ serum. The radio-labelled haptene was prepared by direct radio-iodination $(125_J)$ of $Rg_1-tyramine$ according to the chloramine-T method. The radio-immunoassay procedure was successfully furnished by using DCC method (dextran coated charcoal) and the anti-body titer of the anti-serum was found as being $1600{\sim}3200$ by using 15000cpm tracer per test. Calibration test using non-labelled $Rg_1$ showed linear competetive binding response in the $(8-300){\times}34pg$. range of non-labelled $Rg_1$. The cross reaction test using 19 ginsenoside analogues enabled us a full structure-activity analysis on the antigen-antibody reaction that the anti-body in the serum would recognize the full structure of ginsenoside $Rg_1$ except the side chain moiety.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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