Hossain, Mohammad Belayat;Awal, Aleya;Rahman, Mohammad Aminur;Haque, Samiul;Khan, Haseena
BMB Reports
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제36권5호
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pp.427-432
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2003
Jute is the principal coarse fiber for commercial production and use in Bangladesh. Therefore, the development of a high-yielding and environmental-stress tolerant jute variety would be beneficial for the agro economy of Bangladesh. Two molecular fingerprinting techniques, random-amplified polymorphic DNA (RAPD) and amplified-fragment length polymorphism (AFLP) were applied on six jute samples. Two of them were cold-sensitive varieties and the remaining four were cold-tolerant accessions. RAPD and AFLP fingerprints were employed to generate polymorphism between the cold-sensitive varieties and cold-tolerant accessions because of their simplicity, and also because there is no available sequence information on jute. RAPD data were obtained by using 30 arbitrary oligonucleotide primers. Five primers were found to give polymorphism between the varieties that were tested. AFLP fingerprints were generated using 25 combinations of selective-amplification primers. Eight primer combinations gave the best results with 93 polymorphic fragments, and they were able to discriminate the two cold-sensitive and four cold-tolerant jute populations. A cluster analysis, based on the RAPD and AFLP fingerprint data, showed the population-specific grouping of individuals. This information could be useful later in marker-aided selection between the cold-sensitive varieties and cold-tolerant jute accessions.
양치식물인 참쇠고비에서 인위적인 돌연변이를 유기하기 위하여, 기내배양한 근경조직에 EMS, NMU 등의 화학돌연변이원과 colchicine을 처리하였다. 식물체 재생률을 근거할 때, EMS의 적정 처리농도는 $20{\sim}50mM$이었으며, NMU는 $5{\sim}10mM$인 것으로 확인되었다. 또한 참쇠고비에서 엽의 색소 및 형태적 변이를 유도하는 데 있어 NMU가 EMS보다 효과적인 것으로 확인되었다. 표현형 변이 식물체의 유전적 변이를 분석하기 위하여 RAPD를 수행한 결과, 두 개의 10-mer primer에서 야생종과 변이주 사이에 다형성 DNA 밴드 패턴이 나타났다.
Out of 20 primers, 6 generated a total of 1,111 major and minor RAPD bands, producing approximately 4.2 average polymorphic bands per primer in shortnecked clam (Ruditapes philippinarum) population from Anmyeondo. The Bandsharing value altered from 0.15 to 0.74, with the average f 0.51, as calculated by bandsharing analysis. The RAPD profiles obtained with DNAs of two populations from Anmyeondo and Seocheon, respectively, were considerably different (0.20 and 0.51, respectively). The varying degrees of difference among populations amy also be of relevance to the restricted hybridization of wild bivalve. Besides gene mapping and breeding applications, PCR-RAPD systems could be very useful for the rapid certification and quality control of seed production and for every projects based on PCR amplification of specific bivalve DNA fragments.
Out of 20 primers, 6 generated a total of 1,11 major and minor RAPD bands, producing approximately 4.2 average polymorphic bands pe primer in shortnecked clam (Ruditapes philippinarum) population from Anmyeondo. The bandsharing value altered form 0.15 to 0.74, with the average of 0.5, as calculated by bandsharing analysis. The RAPD profiles obtained with DNAs of two populations from Anmyeondo and Seocheon, respectively, were considerably different (0.20 and 0.51, respectively). The varying degrees of difference among populations may also be of relevance to the retricted hybridization of wild bivalve. Besides gene mapping and breeding applications, PCR-RAPD system could be very useful for the rapid certification and quality control of seed production and for every projects based on PCR amplification of specific bivalve DNA fragments.
To classify Lactobacillus casei strains on the basis of difference in their chromosomal DNA sequence, we have performed polymerase chain reactions on their chromosomal DNA by using random primers, and followed by analyzing randomly amplified polymorphic DNA fragments. We also developed a mini-preparative method to isolate PCR-grade chromosomal DNA from Lacto- bacillus casei strains within 3 hours. Based on RAPD pattems by polymerase chain reactions with degenerated random primers, 4 Lactobacillus casei strains and 2 mutant strains were successfully discriminated. Results were very sensitive, strain-specific and reproducible. It was also reliable. These results suggest that RAPD may be applied efficiently for the identification of several Lactoba- cillus casei strains.
Genomic DNAs were extracted from the muscle of twenty-two specimens of two shortnecked clam, Ruditapes phifippinarum populations collected in Anmyeondo and Seocheon. Genetic differences within and between populations were analysed by random amplified polymorphic DNAs-polymerase chain reaction (RAPD-PCR) using twenty arbitrary decamer primers. Out of 20 primers, 6 generated a total of 1,111 major and minor RAPD bands from individuals of two sites, producing approximately 4.2 average polymorphic bands per primer in individuals from Anmyeondo and ranging in size from less than 50 to larger than 1,500 base pairs (bp). The electrophoretic analysis of RAPD products amplified showed moderate levels of similarity among the different individuals in Seo-cheon population. The average bandsharing values (BS value) of the samples within population from Anmyeondo ranged from 0.155 to 0.684, whereas it was 0.143∼0.782 within population from Seocheon. The average BS value between individuals No. 13 and No. 14 from Seocheon was 0.782 which was higher than that of those from Anmyeondo. The single linkage dendrogram resulted from three primers (OPA-08, -09 and -20), indicating six genetic groupings composed of group 1 (No.4, 8 and 10), group 2 (No. 18), group 3 (No.2, 5 and 7), group 4 (No. 1, 3, 6, 9, 11, 12, 13, 14, 15 and 17), group 5 (16, 19 and 20) and group 6 (No. 21 and 22). In the Seocheon population, the individual No. 18 clustered distinctly from the others of this population. The observed genetic distance between the two populations from Anmyeondo and Seocheon was more than 0.209 (0.247 and 0.275). The shortest genetic distance (0.094) displaying significant molecular differences was between individuals No. 13 and No. 14. Especially, the genetic distance between individuals No. 22 and the remnants among individuals in two geographical populations was highest (0.275). This result illustrated that individual No.22 is distinct from other individuals within two shortnecked populations. The different geographical features of two sites may have caused the genetic diversity in two shortnecked clam populations.
의이인과 염주는 동속 근연종으로 외부형태가 유사하고 종피를 깎아 유통하기 때문에 육안으로 식별하기에는 한계가 있다. 특히, 염주는 일부 수입품에서 의이인과 비슷한 크기로 염주 종피를 깎아 유통시키고 있어 진 위 판별에 논란이 되고 있다. 본 연구에서는 의이인의 유통품을 외부 형태적 특징으로만 식별하기 어려운 문제를 해결하고자 내부형태 특성조사와 정색반응, RAPD등을 이용하여 감별을 위한 기초자료로 이용하고자 한다. 1. 의이인의 과피는 석세포로 구성된 층과 대보강세포와 섬유상 보강세포로 이루어진 2층 구조로 구분되는 반면, 염주의 과피는 외과피와 내과피는 석세포로 이루어져 있고 중앙의 중과피는 대보강세포와 섬유상 보강세포로 구성되어 뚜렷한 3층의 구조로 이루어진다. 2. TLC를 이용한 확인시험에서 Hexane : EtoAc = 10 : 1의 조건으로 전개하였을때 중국산 염주에서는 Rf가 0.2에서만 밴드가 형성되었다. 3. 중국의 "상용중약감정대전(常用中藥鑑定大典)"에서 제시된 요오드반응법에 의한 의이인과 염주의 정색반응은 구별이 어려웠다. 4. RAPD 분석에서 8개 primer에서 품종간 다형성 밴드가 관찰되었고, UBC primer 355와 362에서 중국 염주와 의성 염주의 특이 밴드(500bp, 1300bp)가 관찰되었다.
본 연구는 무작위 분자마커(RAPD)를 이용한 우리나라 골프장에서 이용되고 있는 잔디 13개 잔디품종의 유전적 다형성을 조사하여 보다 효과적인 골프장 관리를 위한 유전적 정보를 제공하고자 조사하였다. 본 연구에서 사용한 54개의 random hexamer primer를 이용하여 RAPD분석을 실시한 결과 13~54개의 다형성 밴드를 형성하였으며 primer당 평균 30.7개의 다형성 밴드를 확인할 수 있었다. RAPD분석 결과 13개의 잔디품종은 크게 3개의 그룹으로 나눌 수 있었다. Group I은 Shadow II, Aurora Gold, Little Big Horn Blue, PennA-1, PennA-4, Group II는 Midnight II, Prosperity, Moonlight SLT, Bright Star SLT, Silver Dollar, Group III은 Olympic Gold Turf-Type, Silver Star Turf-Type, Tar Heel II Turf-Type을 포함하였다. 13개 잔디 품종의 유전적 근연 정도는 0.039~1.0으로 나타났으며, Group III이 유전적 근연 정도가 가장 높게 나타났다. 이상의 결과를 통해 향후, 잔디 종 또는 이종간의 유전적 다양성의 상호관계나 차이점을 규명하기 위해서는 형태적인 특성과 SCARs 마커와 같은 특이적인 분자마커에 대한 연구가 추가적으로 필요할 것으로 사료된다.
RAPD 분석을 이용하여 지황 육성 계통과 지역 수집종 들을 구분할 수 있는 분자표지자를 선발하고, 집단 간, 집단 내 유전적 다양성을 평가하기 위하여 본 실험을 수행하였다. 총 20개의 임의 primer를 이용하여 PCR 한결과, 육성 계통과 수집종 들을 구별할 수 있는 OPA-1 등 10개의 재현성과 다형성이 좋은 프라이머 들을 선발하였다. 특히 OPA-10, OPA-11 및 OPA-19는 고려지황과 지황1호를 다른 계통 및 수집종 들과 구별할 수 있었으며, 이들 프라이머를 이용하여 0.9 kb, 1.2 kb, 1.3 kb 및 1.4 kb등의 육성계통 특이적인 DNA 밴드들을 확보할 수 있었다. 한편 이들의 결과를 토대로 통계처리에 의한 유전분석 결과, 고려지황, 지황1호 및 일본지황은 집단 내 유사도가 높아 다른 집단들과 구별되었다. 결론적으로, RAPD 분석을 통한 결과는 지황의 유전적 다양성 이해와 특정 계통을 다른 계통 및 수집종 들과 구분할 수 있는 방법으로 이용될 수 있다.
홍화(Carthamus tinctorius L.)는 세계 여러 나라에 분포하고 있는 초본류이다. 이 종은 경제적으로 중요한데 홍화는 약용, 적색소, 노랑 색소로 이용된다. RAPD 기법으로 홍화의 26 집단 간 유연관계와 유전적 다양성을 조사하였다. 모든 집단에서 123개 밴드를 얻었으며 시발체(primer) 당 평균 9.5개 밴드를 나타내었다. 홍화의 유전적 다양도는 집단 내에 대부분 귀속되며 높은 집단 간 분화를 나타내었다. OPC18-01 밴드는 시리아 그룹에 특이 밴드였으며 다른 나라 집단에서는 발견되지 않았다. 이런 7개 특이 마크(SCAR)를 발견하였다. 비록 홍화의 분석한 개체 수가 적고 각 나라의 대표성을 의미하지 않지만 본 연구 결과 지중해의 지역(모로코, 시리아, 터키)이 인도를 제외한 다른 지역보다 변이가 높았다. 단순히 RAPD만으로 단정하기 어렵지만 홍화의 기원 센터의 후보군으로 지중해 연안으로 추정된다. 인도 역시 홍화의 2차 센터의 후보군이다. RAPD 마커는 홍화의 자연 집단을 분류하는데 효과적이었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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