RAPD analysis was performed from four host-specific toxin (HST) producing Alternaria, i.e., A. kikuchiana, A. mali, a. longipes and A. Longipes and A. alternata f. sp. lycopersici, nonpathogenic A. alternata and A. brassicicola to assess their phylogenetic relationship. DNA polymorphism was detected among species (pathotypes) of HST producing Alternaria by PCR amplification and differentiation of the species was recognized by RAPD analysis. Primer OPA-02 was the most profitable among 7 notificated primers for differentiation of the HST producing Alternaria species. UPGMA analysis of the RAPD bands from alternaria spp. revealed that HST producing Alternaria and nonpathogenic a. alternata are closely related.
Traditional taxonomic methods used for the identification and differentiation of ginsengs rely primarily on morphological observations or physiochemical methods, which cannot be used efficiently when only powdered forms or shredded material is available. Randomly amplified polymorphic DNA (RAPD) was used to determine the unique DNA profiles that are characteristic not only of the genus Panax but also of various Panax subgroups collected from five different countries. RAPD results of OP-5A primer showed a specific single band that is characteristic of all ginseng samples. RAPD results of OP-13B primer demonstrated that OP-13B primer could be used as a unique RAPD marker to differentiate Panax species. These results support that this approach could be applied to distinguish Korean Ginseng (Panax ginseng) from others at the molecular level.
Twenty-three plants of Japanese apricot (Prunus mume) were collected from several sites around Mountains JIRI in Korea. Japanese apricots having the different morphological features were evenly distributed in the groups made from the cluster analysis, indicating no geographic distributions but artificial vegetations in Korea. Japanese apricots were, as based on the PCR-RAPD techniques, clustered into the three groups; a group (prototype) having the five white petals with the five red sepals, a group (green type) having the five white petals with the five green sepals, and a group (hybrid type) having the more than five red petals with various colored sepals. The prototype apricots showed higher toxicities than other type apricot against bacteria and production of less compounds in TLC plates. The polypetal types of Japanes apricot were related to those of p. armebiaca in the characteristics of seed (the ruggedness), but also to be closed to those of p. armebiaca in PCR-RAPD analysis. The cluster analysis of the twenty three apricots and its related species calculated from the two primers were shown to distinguish relationships of cultivars within species, or of individual plants within cultivars, but also to display the two overlapping bands resulted from PCR-RAPD technique.
To investigate the morphological characteristics and genetic relationships among isolate of the artificially cultivated mushroom Hypsizygus marmoreus, 111 isolates were collected from Korea and other countries. Random amplified polymorphic DNA polymerase chain reaction (RAPD-PCR) and ITS rDNA sequencing were used to confirm the genetic relationships among the collected H. marmoreus isolates. As a result of RAPD analysis using universal rice primer (URP)-PCR, all isolates of H. marmoreus clustered into three groups, which showed high sequence similarity (>90%). In addition, isolates with morphological and geographical differences formed independent clusters. However, it was impossible to distinguish between brown and white strains. Sixteen strains showing morphological and geographic differences were selected, and their ITS region sequences (640 bp) were aligned and compared. The ITS region sequences belonging to these isolates showed 94.8-99.1% similarities to those of publicly available H. marmoreus strains in GenBank. In conclusion, there were differences among isolates in terms of morphology and the area from which they were collected, but all the isolates used in the experiment were classified as H. marmoreus.
Proceedings of the Korean Society of Plant Pathology Conference
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2003.10a
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pp.130-130
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2003
Gummy stem blight pathogen is very difficult not only to monitor the inoculum levels prior to host infection, and also it is destructive and hard to control in field condition. We have applied RAPD technique to elucidate the genetic diversity of the genomic DNA of Didymella bryoniae and also to generate specific diagnostic DNA probe useful for identification and detection. The 40 primers produced clear bands consistently from the genomic DNA of twenty isolates of Didymella bryoniae, and two hundred seventy-three amplified fragments were produced with 40 primers. The combined data from 273 bands was analyzed by a cluster analysis using UPGMA method with an arithmetic average program of NTSYS-PC (Version 1.80) to generate a dendrogram. At the distance level of 0.7, two major RAPD groups were differentiated among 20 strains. RAPD group (RG) I included 8 isolates from watermelon except one isolate from melon. RAPD group (RG) IV included 12 isolates from squash, cucumber, watermelon and melon.. In amplification experiment with SCAR specific primer RG1F-RG1R resulted in a single band of 650bp fragment only for 8 isolates out of 20 isolates that should be designated as RAPD Group 1. However, same set of experiment done with RGIIF-RGIIR did not result in any amplified product.. Our attempts to detect intraspecific diversity of ITS region of rDNA by amplifying ITS region and 17s rDNA region for 20 isolates and restriction digestion of amplified fragment with 12 enzymes did not reveal polymorphic band. In order to develop RAPD markers for RGIV specific primer, a candidate PCR fragment( ≒1.4kb) was purified and Southern hybridized to the amplified fragment RGIV isolates. This promising candidate probe recognized only RGIV isolates
Twelve garlic cultivars collected from Korea and Mongolia were evaluated genetic similarity and diversity by RAPD method using oligo-nucleotide random primers. Genomic DNA isolated from twelve garlic cultivars were amplified by polymerase chain reaction using 143 primers, and 55 primers showed polymorphic DNA bands. Among a total of 187 bands amplified by 55 primers, 128 polymorphic bands were subjected to analysis for genetic relationship of garlic cultivars. Garlic cultivars were classified into three groups, such as group-I corresponded to Euiseong, Seosan, Samchuk and Yecheon-A, Yechun-B, Euiseong-norang, Jeongsun, Namdo, Yookback and Danyang cultivars, and group-II to Mongolia and group-III to Daeseo cultivars. Thirty DNA bands showing unique specificity to the specific cultivars are likely to be useful for identification of garlic local cultivars as DNA markers.
Proceedings of the Korean Society of Fisheries Technology Conference
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2002.05a
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pp.281-282
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2002
Out of 20 primers, 6 generated a total of 1,111 major and minor RAPD bands, producing approximately 4.2 average polymorphic bands per primer in shortnecked clam (Ruditapes philippinarum) population from Anmyeondo. The Bandsharing value altered from 0.15 to 0.74, with the average f 0.51, as calculated by bandsharing analysis. The RAPD profiles obtained with DNAs of two populations from Anmyeondo and Seocheon, respectively, were considerably different (0.20 and 0.51, respectively). The varying degrees of difference among populations amy also be of relevance to the restricted hybridization of wild bivalve. Besides gene mapping and breeding applications, PCR-RAPD systems could be very useful for the rapid certification and quality control of seed production and for every projects based on PCR amplification of specific bivalve DNA fragments.
"Konhee" zoysiagrass[Zoysia matrella (L) Merr.](Patent registration no. 2000-723), a vegetative cultivar, was developed by the Dept. of Horticultural Science, Konkuk University, Seoul. "Konhee" was selected from the cross, ZKV6$\times$ZKV10, in 1997 and F1 seed were produced in the greenhouse in 1996. "Konhee" is superior to the other fine leaf zoysiagrass lines in many traits such as erect type, plant height($8.5\pm$2.0cm), short 3rd stolon length($3.4\pm$0.5cm), dark green, fine leaf($2.3\pm$0.2mm), low first sheath height($0.9\pm$0.2cm), rapid establishment and recoverage, many stolon number, and high shoot density. When "Konhee" was compared to the five other zoysisagrass lines at the DNA level using 35 PCR primers, it had the specific bands with primer No. 740, 544, 765, 772 by RAPD analysis.No. 740, 544, 765, 772 by RAPD analysis.
Proceedings of the Korean Aquaculture Society Conference
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2002.08a
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pp.172-174
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2002
Out of 20 primers, 6 generated a total of 1,11 major and minor RAPD bands, producing approximately 4.2 average polymorphic bands pe primer in shortnecked clam (Ruditapes philippinarum) population from Anmyeondo. The bandsharing value altered form 0.15 to 0.74, with the average of 0.5, as calculated by bandsharing analysis. The RAPD profiles obtained with DNAs of two populations from Anmyeondo and Seocheon, respectively, were considerably different (0.20 and 0.51, respectively). The varying degrees of difference among populations may also be of relevance to the retricted hybridization of wild bivalve. Besides gene mapping and breeding applications, PCR-RAPD system could be very useful for the rapid certification and quality control of seed production and for every projects based on PCR amplification of specific bivalve DNA fragments.
A total of 100 samples of chicken-viscera were collected from different poultry-slaughtering houses in Austria;(20 samples of each of gizzard, heart, intestine, liver and spleen). Intestine and gizzard were heavy contaminated with moulds than other examined visceral organs($4.4{\times}10^5$ and $2.6{\times}10^4$ colonies/1g of the samples, respectively). Fungal contamination was not detected in all samples of heart and spleen. Eighty-five mould isolates were collected from the examined samples, the majority of isolates belonging to Aspergillus glaucus group(20.0%) and Trichoderma(14.1%). These isolates comprised 15 species belonging to 9 genera. Members of Aspergillus glaucus(telomorph: Eurotium) group and Trichoderma were further confirmed their identification using random amplified polymorphic DNA-polymerase chain reaction(RAPD-PCR) technique.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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