Pseudomonas aeruginosa에 대한 soft contact lens 다목적 용액(multi purpose solution, MPS)의 항균효과의 검정을 탁도측정법에 의해 실시하였다. Muller Hinton Broth 액체배지에 pseudomonas aeruginosa를 배양한 후 5개사의 5종류의 MPS를 이용해 각각 시간별로 처리해 대조군과 비교하여 항균효과를 비교해 본 결과 한 제품을 제외하고는 거의 비슷한 효과를 나타내었다. 또한 동일한 조건하에서 MPS의 항균효과는 구성성분, pH에 따라 달라질 수 있으며 5개 회사제품 중 4개에서 pseudomonas aeruginosa에 대한 항균효과가 있는 것으로 나타났다.
Pseudomonas aeruginosa는 기회 감염성 병원균으로, Cystic fibrosis, 미생물 감염성 각막염,화상 부위 2차 감염 등의 다양한 질병을 초래한다. 정족수 인식(쿼럼 센싱)이라고도 알려져 있는 세포간 신호전달 기전이 이러한 감염에서 중요한 역할을 하기 때문에 P. aeruginosa의 정족수 인식 시스템들이 집중적으로 연구되어 왔다. P. aeruginosa의 정족수 인식 시스템들을 소개하는 많은 문헌들이 주로 두 개의 주요 acyl-homoserine lactone (AHL) 계열 정족수 신호물질들인 N-3-oxododecanoyl homoserine lactone (3OC12)과 N-butanoyl homoserine lactone (C4)에 초점을 맞추어 설명하고 있지만, 실제로는 몇 가지 새로운 신호물질들이 발견되어져 왔고, 그들이 P. aeruginosa의 병독성과 신호전달에 중요한 역할을 할 수 있음이 제안되어져 왔다. 그 중 하나가 PQS(Pseudomonas quinolone signal; 2-heptyl-3-hydroxy-4-quinolone)인데, 이 물질은 현재 P. aeruginosa의 잘 규명된 주요 신호물질로 인식되고 있다. 이에 더하여, 최근의 연구들은 또 다른 가능성 있는 P. aeruginosa신호물질들을 제안해 왔는데, diketopiperazines (DKPs)과 pyocyanin이 그들이다. DKPs는 환형 dipeptide로써 이를 구성하는 아미노산의 종류에 따라 다양한 구조를 가진다. P. aeruginosa의 배양액에서 검출된 몇몇 DKPs들이 기존에는 AHL에만 특이적으로 반응한다고 알려졌던 Vibrio 랸�N갸 LuxR biosensor를 활성화 시킬 수 있다는 것이 발견되어 새로운 신호물질로 제안되었다. Pyocyanin (1-hydroxy-5-methyl-phenazine)은 P. aeruginosa가 생산하는 여러 phenazine 화합물들 중의 하나로써, 특징적인 청록색을 띄는 산화-환원 활성물질이다. 이 물질도 정체 성장기 동안 일부 정족수 인식의 조절을 받는 유전자들의 발현을 증가시키는 최종 신호 인자로 최근 제안되었으며, 그 신호는 또 다른 전사 조절 인자인 SoxR에 의해 매개된다고 제안되었다. 본 논문에서는 P. aeruginosa에서 새롭게 발견, 제안되고 있는 이들 신호 전달 물질들에 대해 자세히 다루어 보기로 한다.
A serine proteinase of molecular weight 60 kd was purified from culture supernatant of P. aeruginosa using DEAE-Trisacryl M ion-exchange and AcA 54 gel filtration column chromatography, and the properties of serine proteinase were characterized. By means of SDS-polyacrylamide gel electrophoresis, the molecular weight of the enzyme was 55 kd. The optimal pH for the activity of purified enzyme was 7.5. The activity of the purified enzyme was completely inhibited by Di-isopropylfluorophosphate(DFP) and N-.alpha.-p-tosyl-L-lysine choloromethyl detone(TLCK) but not by other proteinase inhibitors such as E-64, pepstatin A, 1, 10-phenanthroline. The purified enzyme was capable of degrading type I and type IV collagen. Antisera obtained from hymans infected with Pseudomonas aeruginosa reacted to the purified serine proteinase in immunoblots. These results indicate that the purified enzyme is trypsin-like serine proteinase and this enzyme of P. aeruginosa may play an important role in tissue damage as a spreading factor and may be useful for serodiagnosis of Pseudomonas infections.
This study introduced a chick embryos’ infection model to elucidate the pathogenesis mechanism of Pseudomonas aeruginosa, which causes serious diseases in human after ingestion of P. aeruginosa-contaminated animal originated foods. The embryonic chick model is able to give a rapid and relatively inexpensive method to assess bacterial pathogenicity compared to embryos of other vertebrates. Embryos were infected with P. aeruginosa and elastase-deficient P. aeruginosa. After infection with P. aeruginosa cells, total bacterial cell numbers and gelatinase activities in the embryos were compared. Thereafter, precartilage condensation and chondrogenesis were assessed by peanut agglutinin (PNA) binding on day 3 and by Alcian blue staining for sulfated proteoglycans on day 5, respectively. P. aeruginosa significantly increased in embryos, resulting in abnormal limb development, whereas P. aeruginosa defective in elastase activity partly impaired proliferation. In addition, P. aeruginosa-infected chick embryos significantly stimulated the production of matrix metalloproteinases. Several analyses showed that elevated proteases suppressed the proliferation and survival of chondrogenic cells. The results show that this infection model was a useful assay to determine the virulence mechanism of P. aeruginosa in human after intake of microbiologically contaminated foods.
Park Shin-Young;Heo Yun-Jeong;Choi Young-Seok;Deziel Eric;Cho You-Hee
Journal of Microbiology
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제43권5호
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pp.443-450
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2005
The multi-host pathogen, Pseudomonas aeruginosa, possesses an extraordinary versatility which makes it capable of surviving the adverse conditions provided by environmental, host, and, presumably, competing microbial factors in its natural habitats. Here, we investigated the P. aeruginosa-Bacillus subtilis interaction in laboratory conditions and found that some P. aeruginosa strains can outcompete B. subtilis in mixed planktonic cultures. This is accompanied by the loss of B. subtilis viability. The bactericidal activity of P. aeruginosa is measured on B. subtilis plate cultures. The bactericidal activity is attenuated in pqsA, mvfR, lasR, pilB, gacA, dsbA, rpoS, and phnAB mutants. These results suggest that P. aeruginosa utilizes a subset of conserved virulence pathways in order to survive the conditions provided by its bacterial neighbors.
Of the 500 Actinomycetes isolates obtained from soil, one isolate grown on maltose as the sole carbon source produced compound BHK-P19, which inhibited the growth of multiple drug resistant P. aeruginosa 0245. Ultraviolet radiation mutagenesis curtailed production of BHK-P19. Mutation of the BHK-P19 producer using N-methyl-N'-nitro-N-nitroso-guanidine obviated the antibacterial activity to P. aeruginosa 0245, but not towards P. aeruginosa 0225. The mixing of BHK-P19 and BHK-S5 culture extracts inhibited P. aeruginosa 0254, 0225 and 1113. The combined application of BHK-P19 culture extract and Schizandra chinensis Baillon extract inhibited P. aeruginosa 0254, 0225, 0826, 1113, 1378, 1731 and 2492. Use of various concentrations of BHK-P19 culture extract and ampicillin markedly increased antibacterial activity against multi-drug resistant P. aeruginose 1113.
Titanium and its alloys are technically superior and cost-effective materials, with a wide variety of aerospace, industrial, marine, and commercial applications. In this study, the effects of titanium ions on bacterial growth were evaluated. Six strains of bacteria known to be resistant to both metal ions and antibiotics were used in this study. Two strains, Escherichia coli ATCC 15489, and Pseudomonas aeruginosa ATCC 10145, proved to be resistant to titanium ions. Plasmid-cured p. aeruginosa resulted in the loss of one or move resistance markers, indicating plasmid-encoded resistance. The plasmid profile of p. aeruginosa revealed the presence of a 23-kb plasmid. The plasmid was isolated and transformed into $DH5{\alpha}$. Interestingly, the untransformed $DH5{\alpha}$ did not grow in 300 mg/l titanium ions, but the transformed $DH5{\alpha}$ grew quite well under such conditions. The survival rate of the transformed $DH5{\alpha}$ also increased more than 3-fold compared to that of untransformed $DH5{\alpha}$.
활성슬러지로부터 특이한 조성의 polyhydroxyalkanoates (PHAs)를 생합성하는 Pseudomonas aeruginosa P-5를 분리하였다. 이 균주는 nonanoic acid나 heptanoic acid와 같은 홀수개의 탄소수를 가지는 지방산을 단일 탄소원으로 공급해주었을 경우, 3-hydroxyvalerate (3HV)와 medium-chain-length (MCL) 3-hydroxyalkanoates 단위체로 이루어진 공중합체를 생산하였다. 공중합체 내 3HV의 함량은 valeric acid와 같은 보조기질을 공급함으로써 증가시킬 수 있었으며, 2 g/L nonanoic acid와 1 g/L valeric acid로 이루어진 혼합기질로부터 3HV의 함량이 26 mol%에 달하는 공중합체를 얻을 수 있었다. 이러한 공중합체는 결정성이 매우 낮아 점착성 고분자로서의 성질을 보였다. P. aeruginosa P-5 균주는 MCL-PHA synthase 유전자(phaC1, phaC2)를 가지고 있는 반면에 SCL-PHA synthase 유전자는 결여되어 있는 것으로 나타났다. 따라서 P. aeruginosa P-5 균주의 MCL-PHA synthase는 MCL(R)-3-hydroxyacyl-CoAs 뿐만 아니라 (R)-3-hydroxyvaleryl-CoA를 기질로 인지하는 특이한 기질특이성을 갖는 것으로 사료된다.
Purpose: Pseudomonas aeruginosa is an etiologic agent in serious wound infection. Pseudomonas aeruginosa infection is problematic because this organism is resistant to many antimicrobial drugs. The purpose of this study was to compare the bactericidal effect of commonly used topical agents and their effect on wound healing. Methods: Pseudomonas aeruginosa-infected full-thickness skin defect was developed on the mouse to compare 3 commonly used topical agents-Betadine, 2% Gentamicin solution and 0.3% Acetic acid with the control group. Wound size change, bacterial colony counts and histologic findings of each groups were analyzed. Results: The wound size decreased in all treated groups as compared with the control group. However, there was no statistical difference. Gentamicin solution group was showed the lowest bacterial colony count and statistically significant difference compared with the control group(p=0.032). Other treated groups were also effective against Pseudomonas aeruginosa, but not different statistically. Histologic findings revealed that epithelialization, granulation tissue formation and microvessel proliferation were increased and necrosis and inflammation were decreased in all treated groups compared to the control group, but not different statistically. Betadine group significantly increased granulation tissue formation compared to the control group (p= 0.041). Conclusion: There is no universal topical agent that enhances most aspects of wound healing while simultaneously decreasing the bacterial concentration. However, Gentamicin solution may be an optimal topical agent for Pseudomonas aeruginosa infected wound. Further study should experiment on human with Gentamicin solution to confirm a effect on Pseudomonas aeruginosa infected wound for clinical applications.
본 실험은 생분해가 어려운 절삭유를 단일 균주에 의해 생물학적 처리를 하는 데에 목적이 있다. 절삭유, 절삭폐유로부터 호기 균주 81개를 분리하여 이중 절삭유 분해능이 가장 높은 균주로, 48시간 내에 90.4%를 제거한(초기농도 699.1 mg/L) KS47을 선별하였다. KS47은 형태학적, 생리 화학적, 16S rDNA 염기서열, 그리고 지방산 분석을 통해 Pseudomonas aeruginosa로 동정되었다. P. aeruginosa KS47은 절삭유를 탄소원으로 사용하여 성장 할 수 있었으며, 절삭유 분해시, 최적 분해 조건은 1.5 g/L(wet weight), pH 7.0, $30^{\circ}C$이었다. 최적 조건 하에서 절삭유의 제거능을 본 결과, 1,060 mg/L의 절삭유를 12시간 내에 83.7% 제거함을 확인하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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